菊花的组织培养23665658

1、菊花的组织培养菊花的组织培养 植物的组织培养又叫植物的组织培养又叫离体培养离体培养，指植物的组织，指植物的组织、器官或细胞等（器官或细胞等（外植体外植体课本课本34页旁栏页旁栏）在）在离体条件离体条件下，通过下，通过无菌无菌操作，在操作，在人工控制条件人工控制条件下（一定下（一定的营养物质、激素、温度等其他外界条件）进的营养物质、激素、温度等其他外界条件）进行培养以获得再生的行培养以获得再生的完整植株完整植株或生产具有经济或生产具有经济价值的其他产品的技术。价值的其他产品的技术。 一、一、植物组织培养植物组织培养的概念的概念原理原理概念：概念：原因：原因：应用：应用：（回想）植物组织培（回想）

2、植物组织培养养植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞的全能性是指细胞的全能性是指已分化已分化的细胞具有的细胞具有发育成完整个体的发育成完整个体的潜能潜能。生物体的每一个细胞都是由生物体的每一个细胞都是由同一个受同一个受精卵有丝分裂精卵有丝分裂而来，都含有该物种所而来，都含有该物种所特有的特有的全套遗传物质全套遗传物质 微型繁殖、作物脱毒、人工种子微型繁殖、作物脱毒、人工种子二、植物组织培养的基本过程二、植物组织培养的基本过程 离体器官、 组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 植物体 脱分化（或去分化）脱分化（或去分化）：由高度分化的植物组由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。织或

3、细胞产生愈伤组织的过程。再分化再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。又可以重新分化成根或芽等器官的过程。外植体外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段用于离体培养的植物器官或组织片段。细胞分化细胞分化：植物个体发育过程中，细胞在形态、：植物个体发育过程中，细胞在形态、结构和功能上会出现稳定性的差异。结构和功能上会出现稳定性的差异。实质？实质？愈伤组织愈伤组织：细胞排列疏松：细胞排列疏松而而无规则、高度液泡无规则、高度液泡化的无定形的薄壁细胞。化的无定形的薄壁细胞。几个概念几个概念三、影响植物组织培养的因素：三、影响植物

4、组织培养的因素：1、材料（外植体）的选取、材料（外植体）的选取（1）不同植物的组织培养难度不同）不同植物的组织培养难度不同 什么样的植物容易进行组织培养？什么样的植物容易进行组织培养？ （2）同一种植物的不同组织培养难度不同）同一种植物的不同组织培养难度不同 什么样的组织容易进行组织培养？什么样的组织容易进行组织培养？容易进行无性生殖的植物，如烟草、胡萝卜容易进行无性生殖的植物，如烟草、胡萝卜幼龄、保存时间短的组织幼龄、保存时间短的组织菊花的组织培养一般选用何种材料？菊花的组织培养一般选用何种材料？未开花植物的茎上部新萌生的侧枝未开花植物的茎上部新萌生的侧枝2、营养成分（培养基）、营养成分（培

5、养基）（1）植物组织培养常用的培养基？）植物组织培养常用的培养基？ MS培养基培养基大量元素大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 （2）MS培养基的主要成分？培养基的主要成分？培养基中的各种成分的作用是什么？培养基中的各种成分的作用是什么？大量元素和微量元素提供植物细胞需要的各种无机大量元素和微量元素提供植物细胞需要的各种无机盐；蔗糖提供碳源的同时维持细胞渗透压；甘氨酸、盐；蔗糖提供碳源的同时维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是满

6、足离体植物细胞的特殊营养维生素等物质主要是满足离体植物细胞的特殊营养物质需求物质需求课本课本33页旁栏思考：页旁栏思考：微生物培养基以有机营养为主，微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大量无机营养培养基则需提供大量无机营养3、植物激素、植物激素（1）关键激素是什么？）关键激素是什么？（2）两种激素的不同）两种激素的不同使用顺序使用顺序出现不同结果出现不同结果（3）两种激素的不同用量出现不同结果）两种激素的不同用量出现不同结果4、pH、温度、光照等、温度、光照等 菊花组织培养的菊花组织培养的PH？温度？光照？温度？光照？生长素，细胞分裂素生长素，细胞分裂素思考：思考：胡萝卜胡萝卜组织培

7、养的光照组织培养的光照要求与菊花组织要求与菊花组织 培养相同吗培养相同吗？如何控制细胞的脱分化与去分化？如何控制细胞的脱分化与去分化？菊菊花花的的组组织织培培养养再分化再分化材料性质材料性质：培养基：培养基：营养物质、调节物质营养物质、调节物质环境条件环境条件：pH、温度、光照、温度、光照基本原理基本原理:细胞的全能性细胞的全能性基本过程基本过程:脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织影响因素：影响因素：操作流程：操作流程：外植体的消毒外植体的消毒接种接种配制配制MS固体培固体培养基养基培养培养移栽移栽栽培栽培制备制备MS固固体培养基体培养基外植体消毒外植体消毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培四、实验操

8、作四、实验操作 移移 栽栽流水流水冲洗冲洗无菌纸吸干无菌纸吸干70%酒精酒精无无菌水菌水冲洗冲洗无菌纸吸干无菌纸吸干0.1%氯化氯化汞汞无菌水无菌水冲洗至少三次之上冲洗至少三次之上（流水是为消毒吗？能消毒的是什么？（流水是为消毒吗？能消毒的是什么？无菌水冲洗是为了干啥？）无菌水冲洗是为了干啥？）（哪（哪6步？）步？）1、配制各种母液、配制各种母液（大量元素、微量元素（大量元素、微量元素各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）2、配制培养基、配制培养基（菊花组培是否添加植物激（菊花组培是否添加植物激素？）素？）3、灭菌、灭菌（哪种灭菌方法？）（哪种灭菌方法？）注意

9、接种时的各种无菌操作。注意接种时的各种无菌操作。将菊花茎段插入培养基时特别应注意什么？将菊花茎段插入培养基时特别应注意什么？最好在哪儿培养？温度？光照？定期消毒？最好在哪儿培养？温度？光照？定期消毒？直接移栽到土壤中吗？直接移栽到土壤中吗？1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）灼烧）4、无菌箱中的培养；、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间、移栽到消过毒的环境中生存一段时间在整个操作过程中，是如何来实现在整个操作过程中，是如何

10、来实现无菌无菌环境的？环境的？35页旁栏思考：页旁栏思考：至少做一组以上的重复。对照实验用一个不接至少做一组以上的重复。对照实验用一个不接种的空白培养基与接种的培养基一同培养，用种的空白培养基与接种的培养基一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。结果分析与评价结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）是否进行了统计、对照与记录（三）是否进行了统计、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格课题延伸（略）练习练习1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，