推拿加功能训练对膝骨关节炎家兔模型关节液中细胞因子的影响

1、推拿加功能训练对膝骨关节炎家兔模型关节液中细胞因子的影响         【摘要】 目的观察推拿加功能训练对膝骨关节炎家兔模型关节液中细胞因子IL-1和TNF-a的影响，探讨推拿加功能训练治疗膝骨关节炎的机制。方法将新西兰大白兔40只随机分为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、电针治疗组（C组）、手法治疗组(D组)。除A组外，其余3组将大        【摘要】  目的观察推拿加功能训练对膝骨关节炎家兔模型关节液中细胞因子

2、IL-1和TNF-a的影响，探讨推拿加功能训练治疗膝骨关节炎的机制。方法将新西兰大白兔40只随机分为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、电针治疗组（C组）、手法治疗组(D组)。除A组外，其余3组将大白兔左膝关节伸直位石膏固定7周制成骨性关节炎动物模型，造模成功后,A组和B组正常饲养,不处理；C组电针治疗，D组给予推拿手法加功能训练治疗，连续治疗21 d。处理前、后分别取各组家兔关节冲洗液，采用放射免疫分析法（RIA），测定关节冲洗液中IL-1和TNF-a的含量。结果经治疗后，C、D组与A、B组比较有显著性差异(P<0.05)；D组治疗前后有显著性差异(P<0.05)。结论推拿加

3、功能训练治疗能降低膝骨关节炎关节液中细胞因子IL-1和TNF-a的含量,从而发挥对膝骨关节炎的防治作用。 【关键词】  膝骨关节炎 推拿手法 细胞因子膝关节骨性关节炎(Knee Osteoarthritis，KOA) 是临床中常见的关节疾病，好发于中老年人，是由于关节滑膜退变，软骨破坏引起的以膝关节疼痛、僵硬和活动受限为特征的慢性骨关节病，主要病变为膝关节软骨退行性变和继发性骨质增生。近年来,临床上不断报道用针灸、推拿加功能训练及针刀等方法治疗膝骨关节炎取得较好疗效1。研究发现，细胞因子IL-1及TNF-a是参与骨性关节炎进程的重要介质, 是炎症反应的重要调节剂，是调节炎症的始动因素

4、，与软骨破坏密切相关2。本实验研究推拿加功能训练对膝骨关节炎家兔模型细胞因子的影响,旨在证实推拿手法治疗膝骨关节炎的疗效，探讨膝骨关节炎的发病机理。1  材料与仪器1.1  仪器与试剂IL-1和TNF-放射免疫测定药盒从解放军总医院放免研究所购买，采用放射免疫分析法（RIA），放免测定程序按试剂说明书进行。离心机(中佳公司,KDC-2046型)、电针仪(广东省汕头市医用设备厂, 6805-)和放射免疫计数器(众城公司, DFM-96型10管)等。1.2 动物健康新西兰大白兔40只(从重庆医科大学动物中心购买)，雌雄各半，雌无孕，体重2.02.5kg。随机分为空白对照组（A）

5、、模型对照组（B）、电针治疗组（C）和手法治疗组（D），每组10只。造模成功后C，D两组每只分别给予电针或手法治疗，1次/d。2 方法2.1  动物模型实验动物同等条件下稳定饲养7 d后，B，C，D组按照膝关节石膏制动法造模。先剪去所有动物左后肢踝关节以上的兔毛，用管型石膏将其左后肢伸直位固定，石膏外以透明胶纸封好，以防兔撕咬，若石膏松动或脱落者及时重新固定。制动满7周后，随机从A，B，C，D组各抽出1只动物处死，取关节软骨作病理检查以观察造模情况，确定模型成功后解除石膏外固定。2.2 组织学检查分别于造模成功后和治疗结束后随机从B，C，D各组中抽出1只家兔处死，处死后立即切取家兔胫

6、骨平台内侧关节面的完整软骨及软骨下骨组织标本，用10的甲醛溶液固定48 h，脱钙23 d，石蜡纵向包埋固定，常规切片，HE染色。观察滑膜与软骨的病理变化3。2.3 推拿加功能训练方法D组每天用按摩、揉捏、点压、分筋、理筋等手法以松解股四头肌，顺逆时针旋揉髌骨，再作内旋内收、外展外旋、屈伸髋和膝关节各5次，15 min/次，最后平地赶跑100 m，治疗1次/d，连续治疗21 d；C组参照实验针灸学4与动物针灸学5,取左后肢“内外膝眼、阳陵泉、血海、足三里和梁丘”6个穴位。以30号、1寸毫针针刺，得气后，针柄接电针治疗仪，电压6 V，疏密波型，频率1.62 Hz，输出调节强度12,以局部皮肤肌肉轻

7、微颤动为度，1次/d，留针30 min/d，连续治疗21 d。 正常组、模型组正常饲养。2.4 关节液标本采集分别于造模成功后及治疗结束后采集A，B，C，D四组的关节液，获得4组动物膝关节冲洗液，回收量0.40.6 ml，平均0.5 ml，于-20低温冰箱中保存待测。具体方法：施行膝关节穿刺，证实刺入关节腔后，注入0.9%的生理盐水0.5 ml，反复回抽、注入3次后，再尽量抽出腔内液体。抽取关节液后，每只兔肌注2万单位庆大霉素，以防膝关节感染。采用放射免疫分析法（RIA）处理标本，放免测定程序按试剂说明书进行6。2.5 统计学处理方法所有实验数据用SAS9.0以上软件进行分析,以±s表示,组间差异采用方差分析(ANOVA)中的SNK法,各组治疗前后差异采用t检验，以P<0.05作为显著性差异的标准。3 结果3.1  病理切片观察造模后随机从各组中取出1只动物处死,解剖A组动物,肉眼观察膝关节面光滑呈淡蓝色；B，C，D组动物关节软骨面粗糙