生脉散加味方抗家兔动脉粥样硬化的实验研究

1、生脉散加味方抗家兔动脉粥样硬化的实验研究农 慧1盛庆寿1农 钊2(1.广州中医药大学2005级博士研究生,广东广州 510405;2.广西水产学校,广西南宁 530021关 键 词:动脉粥样硬化; 生脉散加味方; 中医药疗法中图分类号:R285.8 文献标识码:A 文章编号:1671-7813(200604-0373-02祖国医学对于冠心病的防治,既往多着眼于活血化瘀,改善血液流变学,少有针对动脉粥样硬化斑块的稳定性做相关的研究。笔者在临证中,从祖国医学整体观念出发,结合现代医学的研究成果,自拟生脉散加味方,以益气养阴法为主,防治动脉脉粥样硬化。本实验研究复方药物在抗动脉粥样硬化斑块方面的疗效

2、并试图探讨其中可能的机理。1实验材料和方法动物雄性纯种新西兰大白兔32只体重1.5 0. 5kg,1个半月龄(由广西医科大学动物实验中心提供。实验药品生脉散加味方(生晒参、麦冬、五味子、当归、穿心莲组成由广西中医学院第一附属医院制剂室用水提浓缩法,按1:1比例制备。胆固醇由中国医药集团上海化学试剂公司提供,批号: F20031015。洛伐他汀胶囊由江苏扬子江药业集团公司生产,批号:03101601。主要试剂和仪器总胆固醇(TC试剂盒,甘油三酯(TG试剂盒,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C试剂盒(以上由伊利康生物技术有限公司提供,批号20041106;超氧化物歧化酶

3、(S OD试剂盒,丙二醛(M DA试剂盒(由南京建成生物工程公司提供,批号: SOD20040724,M DA20040712;美国贝克曼CX-5CE全自动生化分析仪。实验分组实验动物随机分为4组,即正常对照组(简称正常组、模型组,中药生脉散加味治疗组(简称中药组,西药洛伐他汀胶囊对照组(简称西药组,每组8只。造模方法1、2每组的饲料量为56g/kg/天。正常组给予普通饲料,其余各组在普通饲料中混合加入胆固醇1g/只/天,猪油5g/只/天,待全部吃完后补充足量饲料,连续63天。给药剂量及方法1从第33天起,灌胃给药,每天1次。正常组、模型组灌蒸馏水55m l/天;中药组灌生脉散加味方水提药液2

4、1.81m l/kg/天,西药组灌洛伐他汀胶囊2. 5m g/只/天。连续用药30天。2检测指标血脂、S OD、M DA动态变化实验第33天、63天家兔在空腹禁食8小时(不禁水后,从耳中央动脉取血2m,l分离血清,用全自动生化分析仪测定:TC、TG、HDL-C、LDL-C。SOD活力用黄嘌呤氧化酶法测定,M DA含量用T B A法测定。按试剂盒说明操作。病理形态学检查实验结束后,处死家兔,分离主动脉,纵行剖开,冰盐水冲洗,观察新鲜标本的主动脉内膜病变情况。内膜粥样斑块用油红O染色,显微镜微机图像处理系统测量油红O染色阳性的面积并计算出斑块占主动脉内膜的百分比,观察病理改变。数据处理组间比较方差

5、齐时用方差分析,方差不齐用对数转换后用方差分析,自身前后比较用配对样本t检验。参数表示用:均数 标准差( X s。3结果血脂检测结果用药后,自身前后对照:中药组T C下降(P<0.05、TG升高(P<0.05,H DL-C下降(P<0.01,LDL-C无差异(P>0.05;西药的血清TC、TG降低(P<0.05,H DL-C下降(P<0.01,LDL-C升高,但无意义(P>0.05。模型组血清TC、TG明显升高(P<0.01,HDL-C下降(P<0.01,LDL-C升高,但差异无意义(P>0.05。用药后,组间比较:中药组与西药组间T

6、C比较无差异(P>0.05,中药组的TG较西药组高(P<0.01;中药组、西药组与模型组比较TC有一定程度的下降(P<0.05、TG 明显低于模型组(P<0.01;各造模组HDL-C下降(P< 0.01,组间比较无差异(P>0.05,LDL-C治疗前后无差异,组间比较无差异(P>0.05。结果见表1。表1 用药前后各组家兔的血脂含量比较( X s, mmo l/L组别n TC TG HDL-C LDL-C正常组用药前 2.70 0.121.88 0.18 1.03 0.111.58 0.19用药后8 2.65 0.101.59 0.190.95 0.0

7、71.40 0.27模型组用药前24.34 0.55!5.06 0.75!4.95 0.11!17.45 0.89!用药后830.40 1.8110.47 1.032.37 0.3918.85 0.99#中药组用药前24.47 0.45!4.66 0.86!4.98 0.11!17.15 0.63!用药后822.06 2.49%&#5.76 0.84%*2.84 0.57#17.14 3.17#西药组用药前24.47 0.43!4.45 1.30!4.84 0.11!17.62 1.30!用药后821.40 2.84%&2.58 1.00%*2.59 0.1020.02 3.4

8、1# 与正常组比较:!P<0.01;自身前后对照:P?<0.01,%P<0.05,#P>0.05;与模型组比较: *P<0.01,&P<0.05,P>0.05;与洛伐他汀西药组比较:P<0.01,#P>0.05血清SOD、MDA检查结果用药后,自身前后对照:中药组的SOD升高但无显著意义(P>0.05;西药组、模型组SOD下降(P<0.01;中药组、西药组的M DA在治疗后下(373(降(P<0.01,模型组M DA升高(P<0.01。用药后,组间比较 中药组SOD与西药组、模型组比较有差异(P<0.0

9、1,西药组与模型组比较无差异(P>0.05;中药组、西药组间M DA无差异(P>0.05,与模型组比较有显著差异(P<0.01。结果见表2。表2用药前后各组家兔SOD、MDA的比较结果( X s组 别n SOD(U/m lM DA(nm ol/m l正常组用药前59.80 6.999.68 0.19用药后852.32 8.779.89 0.46模型组用药前131.09 22.71*97.98 11.09*用药后892.35 8.17*155.15 26.42*中药组用药前131.71 17.24*99.24 11.38*用药后8162.70 34.96#*#70.62 19.

10、63*#!西药组用药前138.51 34.31*99.64 11.73*用药后886.51 8.49*66.59 22.67*# 与正常组比较:*P<0.01;自身前后对照:P<0.01,#P> 0.05;与模型组比较:#P<0.01,P>0.05;与西药组比较:P< 0.01,!P>05病理形态学观察肉眼观察:正常组家兔主动脉内膜白色,光滑平整,未见异常病变。各造模组家兔主动脉可见血管内膜分布有大小形状各异的病灶呈黄色,扁平或轻微隆起,斑点状、片状或条纹状,后者与动脉纵轴平行。病变以主动脉弓及主动脉分叉处分布较集中、明显。其中模型组有1例主动脉弓处病

11、变严重,肉眼观为明显隆起于内膜表面的灰黄椭圆形斑块。各造模组家兔肉眼观,心脏外为大量脂肪包裹,正常组家兔的心脏外只有少量脂肪附着。镜下观察:中药组、西药组所形成的动脉粥样硬化斑块占主动脉内膜的百分比与模型组比较有显著差异(P<0.01,两组间比较无差异(P>0.05。结果见表3。表3各组家兔动脉粥样斑块占主动脉内膜的百分比( X s,%组别n百分比(%正常组80.00 0.00模型组821.19 3.73中药组89.88 1.01*!西药组89.91 1.45*与模型组比较P<0.01;!与西药组比较P>0.054结论中医基础理论强调气在人体生理病理中所起到的重要作用。

12、气是构成人体的最基本物质,是维持人体生命活动的动力。气的失常表现在气虚和气机失调。导致老年人气虚的主要病因是年老体衰。+素问(阴阳应象大论,谓:年四十而阴气自半也。+素问(上古天真论,曰:六八,阳气衰竭于上。气虚的病理表现涉及到全身的各个方面,五脏六腑皆可气虚。心肺气虚可影响心搏和血流,推动无力,可见心悸或血行迟缓,甚至血瘀。气虚可导致气的升降出入异常。同时气化功能失常,引起血液、津液生成不足,出现阴液不足,脏腑功能失调,津液代谢障碍,以致津液气化失常,水湿停聚于体内,水聚成饮,饮聚成痰,痰浊和/或瘀血停留和附着于脉中管壁之上,日久形成AS。故临床上动脉粥样硬化亦主要发生在老年人。因痰浊、血瘀

13、、阴液不足的形成责之于气虚,根据治病必求于本的原则,在病变缓解期或静止期,先治其本,治法当以益气为主,兼以养阴增液,活血化瘀,清化脉中浊痰。养阴增液还可达到增液行舟活血化瘀的作用。本实验所用的生脉散加味方即具备上述功效,而长于益气阴养增液。现代研究表明:生脉散具有体外抗氧化作用3。生脉散中的君药人参,其主要有效成分是人参皂甙。现代药理研究认为:人参皂甙有钙离子通道阻滞作用、清除自由基、提高SOD活性、抗脂质过氧化作用;调节异常脂蛋白胆固醇代谢。麦门冬具有活血化瘀的作用,五味子素有扩张血管和清除氧自由基,抑制脂质过氧化的作用。当归是一种抗氧化剂,在体外可以抑制LDL的氧化,还可缩小家兔AS的主动

14、脉粥样硬化斑块的面积4。穿心莲的提取物A P I0134能提高AS家兔血清一氧化氮(NO、环磷酸鸟苷(c GM P和SOD 活性,降低内皮素(ET和脂质过氧化物(LPO含量,具有抗氧化、保护内皮功能和维护NO/ET平衡的作用5。实验结果显示:生脉散加味方和洛伐他汀组均有降低T C的作用,未发现升高HDL-C的作用及降低LDL-C的作用。实验中生脉散加味方的TG在用药后升高,且有意义(P<0.05,但低于用药后的模型组,亦有统计学意义,说明在相同的条件下,生脉散加味方有一定的减缓TG升高的作用。生脉散加味方抗AS的机制之一,可能主要是通过降低TC,其对TG也有一定的影响。在用药前,各组的S

15、 OD、MDA因为氧自由基和过氧化脂质的增加,而明显升高。用药前后,生脉散加味方SOD、M DA差异不显著(P>0.05,与模型组比较差异明显(P<0.01。而西药组、模型组的SOD在用药63天后显著下降,说明持续的高脂血症、高脂质过氧化物、氧自由基的存在对这两组家兔SOD的活性产生抑制。中药组的S OD显著高于西药组,说明中药组仍保持着较高的抗氧化能力。实验结果提示:生脉散加味方抗A S 的机制之二可能为提高SOD的活性,从而提高机体抗氧化能力,减少氧自由基对血管内皮的损伤。参考文献1张均田.现代药理实验方法M.北京:中国协和医科大学、北京医科大学联合出版社,1993.1259-12602施新猷.医学动物实验方法M.北京:人民卫生出版社,1980.2333Ich i k a w a H.In v i tro an tioxidant potenti als of trad iti onal Ch i n esem ed ici ne,Shengma iSan and their relati on to i n v i vo p rot ecti ve ef