不同蒸制时间制首乌对亚急性衰老大鼠抗衰老作用的影响

1、不同蒸制时间制首乌对亚急性衰老大鼠抗衰老作用的影响                 作者：陈正爱，李贵铃，尹大维 【摘要】  目的探讨不同蒸制时间黑豆汁制首乌对亚急性衰老大鼠抗衰老作用及机制，从而寻找何首乌对抗衰老作用的最佳蒸制时间。方法Wistar系大鼠随机分正常组、模型组（D?舶肴樘?50 mg?kg-1?d-1）、人参皂苷组（100 mg?kg-1， D?舶肴樘?50 mg?kg-1?d-1）、生首乌组（4.5 g?kg

2、-1，D?舶肴樘?50 mg?kg-1?d-1）、黑豆汁制首乌（以下简称黑豆汁制）0，2，4，6，8，10 h组（各组给予制首乌4.5 g?kg-1?d-1， D?舶肴樘?50 mg?kg-1?d-1），连续42 d。末次给药后，同时取血、脑、肝，测定超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果注射D?舶肴樘呛螅?不同蒸制时间黑豆汁制首乌与模型组相比，均不同程度地提高血清及组织中SOD活性，降低血清及组织中MDA含量。结论 黑豆汁制首乌均可延缓D?舶肴樘撬?致的大鼠衰老，其中以黑豆汁制10 h为抗衰老最佳作用时间。论文论文参考网 【关键词】  制首乌；蒸制时间； 抗衰老A

3、bstract：ObjectiveTo investigate the anti?senile effect of  Polygonum miltiflorum Thunb. of different steamed times in subacute senile rats.MethodsWistar rats were randomly divided into ten groups: normal group，model group (D?galactose，50 mg?kg-1?d-1), ginsenoside group (100 mg?kg-1?d-1D?galacto

4、se, 50 mg?kg-1?d-1)， Polygonum miltiflorum Thunb. by steamed without adjuvant group and 0，2，4，6， 8，10 h of Polygonum miltiflorum Thunb. by steamed with bean groups, contineously 42 days, after the last time, SOD activity and MDA content in serum, liver or brain were assayed. ResultsThe activity of S

5、OD were reduced by Polygonum miltiflorum Thunb. of different steamed time with bean groups compared with model group,at the meantime,the contents of  MDA decreased. ConclusionPolygonum miltiflorum Thunb. of different steamed times has a obvious anti-senile effect. However, 10 h of Polygonum mil

6、tiflorum Thunb. by steamed with bean is the best steamed time.Key words：Polygonum miltiflorum Thunb. with bean；  Steamed times；  Anti?senile    何首乌，又称首乌、赤首乌、乌肝石等，是蓼科植物何首乌（Polygonum miltiflorum Thunb.）的干燥块根。根据其炮制方法不同可分为生首乌和制首乌两种。将原药洗净切片或切成块状，晒干为生首乌，其味苦、涩、性平；若将生品以黑豆汁拌蒸者或其它炮制法炮

7、制者称为制首乌，其味苦、甘、涩，性温。何首乌主要含有蒽醌类、磷脂类和二苯乙烯苷类等化学成分1，2，具有抗衰老、降血脂和抗动脉粥样硬化、增强免疫功能、抗炎镇痛等多方面作用,但尚未见不同蒸制时间的黑豆汁制首乌对抗衰老作用的研究报道。本次实验研究不同蒸制时间的黑豆汁制首乌对抗衰老作用的影响。1  材料1.1  药品与试剂 实验所用各何首乌制品（干品）由吉林敖东药业集团股份有限公司提供；D?舶肴樘窍瞪虾约炼?厂出品，批号：F20050422；人参（总）皂苷为市售品；SOD、MDA试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.2  动物 Wistar大鼠，雌雄各

8、半，体重为180220 g，由延边大学医学部实验动物科提供。论文论文参考网 2  方法与结果2.1  对亚急性衰老大鼠血清、肝组织、脑组织SOD活性的影响取体重（180220）g  Wistar大鼠100只，雌雄各半，随机分为8组。正常组、D?舶肴樘悄妥椋?简称模型组）、人参皂苷组、生首乌组、黑豆汁制首乌（简称黑豆汁制）0，2，4，6，8，10 h组。除正常组外，各组均于颈背部皮下注射D?舶肴樘牵?3，4，剂量为50 mg?kg-1?d-1，制成亚急性衰老模型。人参皂苷组灌胃人参皂苷混悬液100 mg?kg-1?d-1，何首乌各组灌胃各浓缩液4.5 g?kg-1?

9、d-1。连续42 d，每周称重一次调整注射和灌胃剂量。实验前禁食不禁水12 h，腹腔注射10%水合氯醛（1 ml/100 g）麻醉下固定，开胸心脏采血，并迅速取出肝脏、脑。分离血清，用SOD试剂盒测定其活性；肝脏、脑组织用冰生理盐水冲洗后，制成5%匀浆液，离心（3000 r/min）15 min，取上清液，用试剂盒测定SOD活性。对8组数据用SPSS11.0软件进行单因素方差分析处理，结果见表1。表1  不同蒸制时间黑豆汁制首乌对亚急性衰老大鼠血清、（略）2.2 对亚急性衰老大鼠血清、肝组织、脑组织MDA含量的影响取体重（180220）g  Wistar大鼠100只，雌雄各

10、半，随机分为8组。设正常组、D-半乳糖模型组（简称模型组）、人参皂苷组、生首乌组、黑豆汁制首乌（简称黑豆汁制）0，2，4，6，8，10 h组。除正常组外，各组均于颈背部皮下注射D-半乳糖3，4，剂量为50 mg?kg-1?d-1，制成亚急性衰老模型。人参皂苷组灌胃人参皂苷混悬液100 mg?kg-1?d-1，何首乌各组灌胃各浓缩液4.5 g?kg-1?d-1。连续42 d，每周称重一次调整注射和灌胃剂量。实验前禁食不禁水12h，腹腔注射10%水合氯醛（1 ml/100 g）麻醉下固定，开胸心脏采血，并迅速取出肝脏、脑。分离血清，用MDA试剂盒测定其含量；肝脏、脑组织用冰生理盐水冲洗后，制成5%

11、匀浆液，离心（3000 r/min）15 min，取上清液，用试剂盒测定MDA含量。对8组数据用SPSS11.0软件进行单因素方差分析处理。结果见表2。表2  不同蒸制时间黑豆汁制首乌对亚急性（略）3  讨  论    机体的衰老过程是一个随年龄变化的复杂的生理与病理性过程。自从1956年Denham Harman 提出衰老的自由基学说，在众多有关衰老的学说中，由于自由基学说的特点在于它与其他学说有直接或间接的关系，受到广泛的重视并得到众多实验的支持。衰老的自由基学说认为，随着年龄增大的退行性变化，是由自由基的副作用引起的。机体自由基

12、的产生与消失在正常情况下处于动态平衡，衰老时这种平衡消失。过剩的自由基除引起大分子交联阻碍营养物质的扩散外，还损伤组织。许多报道表明不饱和脂类过氧化作用的特征产物MDA的生成量反应体内细胞受自由基氧化的程度，在衰老过程中起重要的作用。    在一定时间内连续给动物注射D-半乳糖，使机体细胞内半乳糖浓度增高，在醛糖还原酶催化下，还原成半乳糖醇，这种物质不能被细胞进一步代谢而堆积在细胞内，影响正常渗透压，导致细胞肿胀，功能障碍，代谢紊乱，破坏并消耗机体抗氧化防御系统，使自由基积聚。同时在半乳糖还原成半乳糖醇的过程中又产生O2,这样使细胞膜受损，而过氧化脂质等增高出现衰

13、老5。SOD是体内重要的抗氧化酶，它的活性下降使自由基产生过量，引起不饱和脂肪酸氧化生成过氧化物，形成脂褐素和使DNA、蛋白质和酶等改变、破坏，从而加速衰老6。SOD活性间接反应机体清除氧自由基的能力。MDA是自由基对不饱和脂肪酸引发的脂质过氧化物的最终产物，MDA水平高低间接反映细胞受自由基攻击的严重程度7。衰老时，脂质过氧化作用增强，MDA产生增多，SOD活性降低。本实验结果提示， 黑豆汁制首乌各组血清、肝、脑中的MDA含量均低于模型组，提示黑豆汁制首乌抗衰老作用与降低体内脂质过氧化产物MDA含量有关；而黑豆汁制首乌各组血清、肝、脑中的SOD活性均高于模型组，提示黑豆汁制首乌抗衰老作用与提

14、高机体抗氧化能力有关。    总之，何首乌具有抗衰老作用，而且其抗衰老作用是多个因素综合作用的结果。何首乌作为传统的延年益寿之佳品，具有广泛的开发前景，对其不同炮制方法及炮制时间的研究，有利于今后更合理科学地利用并发挥它的药用价值。 【参考文献】  1刘惠茹，罗选刚.清蒸豆制何首乌主要成分比较研究J.基层中药杂志，2000，14（1）：39.2廖海民，胡正海.何首乌的生物学及化学成分研究进展J.中草药，2005，36（2）：311.3赵 鹏，杨玉英.半乳糖制备亚急性衰老动物模型的可行性J.中国食品卫生杂志，1999，11（1）：52.4徐 智，吴国明，钱桂生，等.大鼠衰老模型的初步建立J.第三军医大学学报，2003，25（4）：312.5石根勇，吕中明，陈新霞，等.建立衰老模型的实验研究J.江苏预防医学，2003，14（2）：63.6Tamai KT,Gralla EB,Ellerby LM,et al.Yesst and mammaliam metallothioneins functionally substitute for yeast copper z