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文档简介
1、实验一实验一 细菌检验基本技术细菌检验基本技术( (二二) )目的v掌握平板划线法、斜面、液体和半固体培养基等各种接种方法。v熟悉接种细菌工具、接种细菌的环境要求和无菌操作要领。 【器材器材】接种工具接种工具 接种环与接种针接种环与接种针【标本标本】琼脂平板琼脂平板:腐生葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、腐生葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 斜面:斜面:大肠埃希菌大肠埃希菌 牛肉膏汤:牛肉膏汤:铜绿假单胞菌,表皮葡萄球菌铜绿假单胞菌,表皮葡萄球菌 半固体:半固体:大肠埃希菌、表皮葡萄球菌大肠埃希菌、表皮葡萄球菌 【操作】【操作】v1.分区划线分离法(分区划线分离法(用于细菌标本的分离纯
2、化。)用于细菌标本的分离纯化。) 五段分区法五段分区法孵育后情况孵育后情况单菌落(单菌落(clone)菌苔菌苔(lawn)光滑型菌落光滑型菌落粗糙型菌落粗糙型菌落 菌落的描述菌落的描述v细菌的菌落特征细菌的菌落特征:v菌落大小(菌落大小(1mm,小;小;1m3mm,大),大)v形状(露滴状、圆形、菜花样、不规则等)形状(露滴状、圆形、菜花样、不规则等)v高度(突起、扁平或凹陷)高度(突起、扁平或凹陷)v边缘(整齐、波形、锯齿状、卷发状等)边缘(整齐、波形、锯齿状、卷发状等)v表面(光滑、粗糙等)表面(光滑、粗糙等)v湿润度(干燥、湿润等)湿润度(干燥、湿润等)v透明度(不透明、半透明、透明等)
3、透明度(不透明、半透明、透明等)v颜色(红色、灰白色、黑色、绿色、黄色或无色等)颜色(红色、灰白色、黑色、绿色、黄色或无色等)v溶血性(溶血性(溶血、溶血、溶血或溶血或溶血)溶血)v特殊气味特殊气味(2)琼脂斜面接种法)琼脂斜面接种法 主要用于单个菌落的纯培养及保存菌种,也主要用于单个菌落的纯培养及保存菌种,也可用于某些生化鉴定试验的接种。可用于某些生化鉴定试验的接种。斜面培养基斜面培养基斜面培养基接种后菌落生长示意图菌苔(lawn)(3)穿刺接种法)穿刺接种法 用于半固体培养基或用于半固体培养基或KIA、明胶等具有高、明胶等具有高层的培养基接种。半固体培养基的穿刺接种层的培养基接种。半固体培养基的穿刺接种可用于观察细菌的动力。可用于观察细菌的动力。 v动力阳性动力阳性v动力阴性动力阴性(4) 液体接种法液体接种法 用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。糖发酵管等的接种。【注意事项】【注意事项】v接种细菌时不要说话,严格无菌操作;接种前要灼烧接种环, 灼烧后接
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