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文档简介

1、血球计数板介绍用优质厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用 盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。 计数池画有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大方格，每个大格面积为1.0mm.容积为0.1mm（ul ），其中，中央大方格用双线分成 25个中方格，位于正中及 四角5个中方格是红细胞计数区域，用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为 16个中方格。根椐国际标准局（NBS规 定，大方格每边长度允许误差为土 1%使用方法1 视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。2

2、取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块 盖玻片。3将菌悬液摇匀，用 滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖 玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数 区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。 也可以将菌悬液 直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。4 静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。将血球计数板放 置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并 计数。由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。

3、5. 计数时若计数区是由16个大方格组成，按对角线方位，数左上、左下、 右上、右下的4个大方格（即100小格）的菌数。如果是25个大方格组成的计数区，除数上述四个大方格外，还需数中央1个大方格的菌数（即80个小格）。 为了保证计数的准确性，避免重复计数和漏记，在计数时，对沉降在格线上的细 胞的统计应有统一的规定。如菌体位于大方格的双线上，计数时则数上线不数下 线，数左线不数右线，以减少误差。即位于本格上线和左线上的细胞计入本格， 本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。 见右图：即本格中计数细胞 为3个。6. 对于出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计 算。每个样品重复计数2-3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），按 公式计算出每mL（g）菌悬液所含细胞数量。7. 测数完毕，取下盖玻片，用水将血球计数板冲洗干净，切勿用硬物洗刷 或抹擦，以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。计数公式1、16格X 25格的血球计数板计算 公式：细胞数/ml=100小格内细胞个数/100 X 400X 10000X稀释倍数

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