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文档简介
1、 2.植物组织培养的过程:植物组织培养的过程:离体的植离体的植物组织或物组织或细胞(又细胞(又叫外植体)叫外植体)愈伤组织愈伤组织胚状体、胚状体、 丛芽等丛芽等新个体新个体脱分化脱分化再分化再分化生长生长 细胞分化:细胞分化:形态、结构、生理功能形态、结构、生理功能稳定性稳定性。 愈伤组织:愈伤组织:是通过是通过细胞分裂细胞分裂形成的,其细形成的,其细胞排列胞排列疏松而无规则疏松而无规则,高度,高度液泡化液泡化的呈的呈无无定形定形状态的状态的薄壁细胞薄壁细胞 脱分化脱分化(或者叫去分化或者叫去分化):由高度分化的植物由高度分化的植物组织或细胞产生组织或细胞产生愈伤组织愈伤组织的过程的过程 再分
2、化:再分化:脱分化脱分化产生的产生的愈伤组织愈伤组织继续进行继续进行培养,又可以重新分化成培养,又可以重新分化成根或芽根或芽等器官等器官 外植体外植体:巩固练习:巩固练习:下图是植物组织培养的简略表示。据此回答:下图是植物组织培养的简略表示。据此回答:(1)表示表示_,它能被,它能被培养成为培养成为的根本原因是的根本原因是_。(2)表示表示_,它与,它与相比分相比分化程度化程度_,全能性,全能性_。脱分化脱分化再分化再分化离体的植物组织或器官离体的植物组织或器官植物细胞具有全能性植物细胞具有全能性愈伤组织愈伤组织低低高高(二二)、影响植物组织培养的因素、影响植物组织培养的因素.思考思考一般来说
3、,容易进行一般来说,容易进行_繁殖的植物容繁殖的植物容易进行组织培养。易进行组织培养。思考思考选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因?无性无性嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化2.营养营养 成分:成分:大量元素大量元素: 如如N、P、K、Ca、Mg、S;微量元素微量元素: 如如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co;有机物有机物: 如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。使用的先后顺序使用的先后顺序:使用顺序使用顺序实验结果实验结果先使用生长素,后使用细先使用生长素,后使用细胞分裂素
4、胞分裂素有利于细胞分裂但不分化有利于细胞分裂但不分化先使用细胞分裂素,后使先使用细胞分裂素,后使用生长素用生长素细胞既分裂又分化细胞既分裂又分化同时使用同时使用分化频率提高分化频率提高生长素用量比细胞分生长素用量比细胞分裂素用量裂素用量植物细胞的发育方向植物细胞的发育方向比值高时比值高时使根分化、抑芽形成使根分化、抑芽形成比值低时比值低时使芽分化、抑根形成使芽分化、抑根形成比值适中时比值适中时促进愈伤组织的形成促进愈伤组织的形成用量的比例用量的比例:(1)MS培养基中各种营养物质有何作用?培养基中各种营养物质有何作用?微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必
5、需的无机盐;需的无机盐;蔗糖提供碳源,维持细胞的渗透压;蔗糖提供碳源,维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。产生的特殊营养需求。讨论:讨论:(2)同专题)同专题2中微生物培养基的配方相比,中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?培养基的配方有哪些明显的不同?微生物培养基以有机营养为主。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,与微生物的培养不同,MS培养基则需提供培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生大量无
6、机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。长必须的大量元素和微量元素两大类。(3)生长素比细胞分裂素比值低时生长素比细胞分裂素比值低时 , 则则 ( ) 。A.有利于根的分化有利于根的分化 , 抑制芽的形成抑制芽的形成 B. 有利于芽的分化有利于芽的分化 , 抑制根的形成抑制根的形成C. 促进愈伤组织形成促进愈伤组织形成D. 促进根和芽的分化促进根和芽的分化B 实验操作实验操作1.制备制备MS固体培养基固体培养基2.外植体消毒外植体消毒 (70酒精、氯化汞、无菌水、无菌吸水纸)酒精、氯化汞、无菌水、无菌吸水纸)3.接种接种(步骤)(步骤)4.培养培养(条件)(条件)5.移
7、栽移栽6.栽培栽培思考思考外植体在培养过程中可能会被污染,你认为造成污染的原外植体在培养过程中可能会被污染,你认为造成污染的原因有哪些?因有哪些? 外植体消毒不彻底;培养基灭菌不彻底;接种中被杂菌污染;锥外植体消毒不彻底;培养基灭菌不彻底;接种中被杂菌污染;锥形瓶密封性差等。形瓶密封性差等。思考思考在此消毒过程中,是不是强度越大越好,为什么?在此消毒过程中,是不是强度越大越好,为什么? 不是。对外植体进行表面消毒时,既要考虑到药剂的消毒效果,不是。对外植体进行表面消毒时,既要考虑到药剂的消毒效果,又要考虑到植物的耐受力。又要考虑到植物的耐受力。结果分析与评价结果分析与评价 定期观察生长状态并记录,如果出现问定期观察生长状态并记录,如果出现问题,及时分析处理。题,及时分析处理。(一)选材是否恰当:要选取生长旺盛的嫩枝。(一)选材是否恰当:要选取生长旺盛的嫩枝。(二)无菌技术是否过关:如果出现了污染现象,(二)无菌技术是否过关:如果出现了污染现象,说明某些操作步骤,如培养基灭菌、花蕾消毒说明某些操作步骤,如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。或接种等有问题。
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