抗青枯病病菌植物杀菌剂的研究

1、抗青枯病病菌植物杀菌剂的研究方案与结果如表3所示。1.1.1 归模型建立与检验采用DPS数据处理系统对表3中的结果进行二次多项式逐步回归分析，得到水杉提取物、马尾松提取物、银杏提取物、野艾蒿提取物、乳化剂浓度的回归模型：Y=9.21557+0.23618X1+0.40726X2-0.18255X3-009647X4+0.20597X5+0.30484X12-0.06404X22+016521X32-0.11773X42-0.16560X52+0.35570X1X2-025177X1X3-0.12333X1X4-0.10692X1X5+0.16473X2X3-032470X2X4+0.31145

2、X2X5-0.05836X3X4-0.05252X3X5+001042X4X5。由表4可知，回居方程的失拟性检验，Fl=1.49864Y=9.21557+0.23618X1+0.40726X2-0.18255X3+0.20597X5+0.30484X12+0.16521X32-0.16560X52+035570X1X2-0.25177X1X3-0.32470X2X4+031145X2X5。1.1.2 主效应分析P值即概率，反映某一事件发生的可能性大小。各因素的P值可以反映出各因素对试验指标的重要性，P值越小，表明该因素对试验结果影响越大，即重要性越大。由表4可知，5个试验因素对抑菌效果影响大&

3、#39;依次为马尾松提取物浓度>水杉提取物浓度>乳化剂浓度>银杏提取物浓度野艾蒿提取物浓度。1.1.3 单因子效应分析当水杉提取物浓度、马尾松提取物浓度、银杏提取物浓度、野艾蒿提取物浓度、乳化剂浓度这5个影响因素中的任意4个为0,其中一个对抑菌效果的影响见图6。由图6可知，在-2.00水平下，水杉和银杏提取物的抑菌效果随浓度升高而下降，但在02.0水平时，却随浓度升高而升高，这可能是由于植物提取物间存在看抑制作用，在低浓度时，水杉和银杏对其他植物的抑制较弱，体现了其他植物较好的抑菌效果，而到达0水平时，抑菌效果的下降则与水杉和银杏与其他植物间的抑制作用逐渐增强直接相关。到达高

4、水平时，抑菌效果又明显增加，表明银杏和水杉提取物的抑菌效果强于植物间的抑制作用。在-2.00水平下，马尾松提取物和乳化剂浓度的升高均可以增加抑菌效果，但在02.0水平时，再增加乳化剂浓度却使抑菌效果略微下降，这可能是乳化剂浓度过高导致植物提取物不能充分溶解；而抑菌效果随马尾松提取物浓度的增加呈线性上升趋势，表明马尾松提取物浓度对抑菌效果的影响明显。野艾蒿提取物浓度的改变对抑菌效果的影响不明显。1.1.4 双因子效应分析从交互项系数可以看出，马尾松与水杉提取物、马尾松提取物与乳化剂以及马尾松与野艾蒿提取物3种组分的交互作用达到极显著水平；水杉与银杏提取物的交互作用达到显著水平，表明4种组分之间的

5、配比对抑菌作用有显著影响，响应面结果如图7至图10所示。在水杉提取物浓度较低时，马尾松提取物浓度的增加对抑菌效果的影响不明显，而当浓度增大到02.0水平时，马尾松提取物浓度的改变对抑菌效果的影响明显。在马尾松提取物为低浓度水平时，水杉浓度在-2.00.5水平时，抑菌直径呈下降趋势，在1.02.0水平，则有所上升。可见在-0.51.0水平下的水杉与其他植物间具有较强的抑制作用,在低于这个浓度时，其他植物的抑菌效果显然强于水杉的抑制作用，而高浓度的水杉提取物则对抑菌效果影响明显。当乳化剂浓度处于较低水平时，马尾松提取物浓度的增加对抑菌效果的影响不明显，可能是马尾松提取物并未能全部溶于溶剂中,但在高

6、浓度的乳化剂下，随着马尾松提取物浓度的增加抑菌效果明显；而马尾松提取物浓度较低时，乳化剂浓度的增加可使马尾松提取物浓度下降导致抑菌效果减在水杉提取物浓度身氐和银杏提取物浓度最高以及银杏提取物浓度身氐和水杉提取物浓度最高时，抑菌直径达到最大。而在银杏和水杉浓度都为最高时，抑菌直径却较小，可见这2种植物间存在抑制作用。在马尾松提取物浓度为-2.0水平时，随野艾蒿提取物浓度的增加抑菌效果呈上升趋势；当野艾蒿浓度为-2.0水平时，随着马尾松提取物浓度增加抑菌效果逐渐加强。而在-2.01.5水平时,随着两者浓度等量增大时抑菌效果也逐渐增大，两者都处于2.0水平时，抑菌效果却下降，可见两者存在相互促进作用

7、，而高浓度提取物的抑菌效果的下降可能与提取物不能充分溶解有关。1.1.5 有效植物提取物最适乳油配方寻优及验证对不同设计水平下的组合进行模拟试验，从55=3125个组合中，获得抑菌直径9.30mm的方案1940个。根据频次分析结果和实际情况取任一值即可得出优化组合，现取中值可得出，各组分的优化组合为水杉提取物浓度506mg/mL,马尾松提取物浓度827mg/mL,银杏提取物浓度481mg/mL,野艾蒿提取物浓度409mg/mL,乳化剂浓度0.205mL/mL溶剂，预测抑菌直径为9.49mm。经多次的验证性试验，该乳油配方的抑菌直径为9.28mm,与预测值无显著差异(F=2177,P>0.

8、05),说明该模型与试验相吻合，能适用于生产实践。3讨论3.1 抗青枯病病原菌植物提取物的筛选相关研究表明，几乎每种植物都能产生抑菌活性，但是抑菌效力和抑菌范围存在看差异。冀玉良等研究发现，银杏、大蒜、黄花蒿、紫茎洋兰等植物对青枯病菌均有较好的抑制作用8,10,18-19。本试验从银杏、樟树、水杉、马尾松、八角金盘、冬青卫矛、龙葵、野艾蒿中筛选出银杏、马尾松、野艾蒿、水杉4种较农用链毒素具有明显抑菌效果的植物，其中马尾松的抑菌效果最强，这可能与其所含的菇类化学物质有关，如薄采颖等研究表明，松针叶二菇酸对番茄灰毒病菌也有明显抑制作用20。由此表明，马尾松提取物具有较强的抑菌作用，可作为新型植物源

9、农药重点开发的研究对象。3.2 有效植物提取物乳油配方的优化大量研究证明,二次正交旋转组合试验设计与传统的单因子试验法、正交试验法相比,能根据预测值直接寻求最优区域，从多角度对模型进行模拟分析，以充分发掘模型所提供的信息21-23。故本试验以各有效植物提取物、乳化剂浓度为试验因素，采用二次正交旋转组合试验进行优化，得到最优乳油配方为：水杉提取物506mg/mL,马尾松提取物827mg/mL,银杏提取物481mg/mL,野艾蒿提取物409mg/mL,吐温-800205mL/mL溶剂，经验证试验后抑菌直径与预测值9.49mm无显著差异。由单因子效应分析可知，马尾松提取物浓度与抑菌效果的关系呈线性上

10、升趋势，较其他植物提取物对抑菌效果有极显著影响。毛胜凤等研究发现，马尾松提取物在浓度为12.5100.0mg/mL时抑菌效果随着浓度的增大而增大24。本试验中马尾松浓度在25400mg/mL范围内，抑菌直径呈线性上升趋势，而浓度高于400mg/mL后抑菌效果趋于平缓，表明在低浓度时马尾松抑菌效果随浓度增大而显著增大，但高于一定水平时，马尾松的抑菌效果则会趋于稳定，这可能与溶剂的溶解度大小有关。从双因子互作效应分析可知，马尾松提取物浓度较高时，随着乳化剂浓度的增加抑菌效果明显增加，研究表明天然的植物源杀菌剂在作用于寄主时，其渗透性、延展性都是有限的，须添加助剂使其充分发挥药效25-26。本试验研

11、究表明，吐温-80乳化剂的添加能增加有效植物提取物的渗透性和延展性，可达到增效的作用。在乳油剂型中，溶剂是其加工和使用中不可或缺的重要组分，用于溶睇口稀释原药协助乳化分散，增加乳油流动性27-28。根据蔡亚东的研究表明，龙葵素乳油具较好扩散性和溶解度的溶剂为N,N-二甲基甲酰胺和二甲苯，而丙酶则相对效果较差29。本试验通过对溶剂的扩散情痛口溶解度的测定，确定丙酮为有效植物提取物乳油的最佳溶剂。由此可见，溶剂的选择具有针对性。综上所述，经二次正交旋转组合试验优化得到植物提取物的最适乳油配方，抑菌效果显著优于农用链毒素。但该乳油配方仍存在着不少问题，如植物活性成分难分离、易分解的问题还有待解决，乳

12、油剂型的稳定性还有待进一步研究。参考文献：1肖相政，刘可星，廖宗文.生物有机肥对番茄青枯病的防效研究及机理初探J.农业环境科学学报,2009,28(11):2368-2373.2张彦，车建美，刘波，等.蜡样芽抱杆菌ANTI-8098A在番茄内的定殖和对青枯病的防治研究J.中国生物防治学报，2011,27(2):221-227.3高君君.植物根际促生菌的筛选及其对番茄青枯病的生防作用D.扬州：扬州大学，2011:16-17.4李永刚.一种植物源杀菌剂的研制及其在番茄叶霉病防治中的应用D.哈尔滨：东1旅业大学，2003:10-11.5王志学，黄廷锌，胡永兰，等.抑菌植物研究初报几微生物学杂志，19

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