第8章对氨基苯甲酸酯类药物分析(2012)

1、药物分析教研室药物分析教研室辽宁医学院药学院辽宁医学院药学院分类与典型药物理化特征鉴别试验杂质检查含量测定对氨基苯甲酸酯类对氨基苯甲酸酯类酰苯胺类酰苯胺类COR2OR1HN苯佐卡因（苯佐卡因（benzocainebenzocaine）COOC2H5H2NCOOCH2CH2N(CH3)2CH3(CH2)3NHHCl盐酸丁卡因（盐酸丁卡因（tetracainetetracaine hydrochloride hydrochloride）CONHCH2CH2N(C2H5)2N2HHCl盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺（procainamideprocainamide hydrochloride hydr

2、ochloride）COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl H2N盐酸普鲁卡因（盐酸普鲁卡因（procaine hydrochlorideprocaine hydrochloride）二、酰苯胺类药物的基本结构与典二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物型药物R3R4NHR1CR2O基本结构基本结构CH3H3CNHCOCH2N(C2H5)2HClH2O盐酸利多卡因（盐酸利多卡因（lidocainelidocaine hydrochloride hydrochloride）CH3CH3NHCONC4H9HCl盐酸布比卡因（盐酸布比卡因（bupivacainebupivacaine hydroch

3、loride hydrochloride）盐酸罗哌卡因盐酸罗哌卡因NCH3CH3ONC3H7H.HCl 1.1.芳伯氨基特性：芳伯氨基特性：对氨基苯甲酸酯类结构中对氨基苯甲酸酯类结构中有芳伯氨基，发生重氮化有芳伯氨基，发生重氮化-偶合；与芳醛缩合；偶合；与芳醛缩合；易氧化变色。易氧化变色。盐酸丁卡因无此特性。盐酸丁卡因无此特性。酰苯胺类酰苯胺类分子结构中含有芳酰氨基，酸水解后显芳伯氨分子结构中含有芳酰氨基，酸水解后显芳伯氨基的特性反应。注意空间位阻的影响。基的特性反应。注意空间位阻的影响。 三、主要理化性质三、主要理化性质2.2.水解特性：水解特性：对氨基苯甲酸酯类对氨基苯甲酸酯类分子结构中的

4、分子结构中的酯键易水解，除盐酸丁卡因水解产物为对丁基酯键易水解，除盐酸丁卡因水解产物为对丁基苯甲酸外，其余均为对氨基苯甲酸苯甲酸外，其余均为对氨基苯甲酸(PABA)(PABA)。3. 3. 络络合，合，6. 6. 其它特性：因结构中有其它特性：因结构中有 芳伯氨基或同时具芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其游离碱多为碱型油状液体有脂烃胺侧链，其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。其盐酸盐则易溶于水。第二节第二节 鉴别试验鉴别试验一、重氮化一、重氮化偶合反应偶合反应 分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的分子结构中

5、含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生此反应。药物，均可发生此反应。ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄猩红色萘酚OH-直接反应：直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普盐酸普鲁卡因胺。鲁卡因胺。丁卡因虽无芳伯氨基，但可与丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNO2反应生成反应生成N亚硝基化合物的乳白色沉淀。亚硝基化合物的乳白色沉淀。NHC4H9COOCH2CH2(C2H5)2+ HNO2C4H9N-NOCOOCH2CH2(C2H5)2+ H2O 乳白色n苯佐卡因、盐酸普鲁卡因鉴别方法：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因鉴别方法：本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录本品显芳香第一胺类的

6、鉴别反应（附录IIIIII） 取供试品约取供试品约50mg50mg，加稀盐酸，加稀盐酸1ml1ml，必要时缓缓，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L0.1mol/L亚硝酸钠溶液亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。同，生成由橙黄到猩红色沉淀。NH2COOCH2CH2N(C2H5)2+ NaNO2 + 2HClN2+ClCOOCH2CH2N(C2H5)2+ NaCl + 2H2O_N2+ClCOOCH2CH2N(C2H5)2+ + NaOHOHNCOOCH2CH2N(C2H5)2NHO+

7、 NaCl + H2O_猩红或红色二、与金属离子反应二、与金属离子反应1. 1. 盐酸利多卡因的鉴别方法盐酸利多卡因的鉴别方法（与铜离子反应）与铜离子反应）蓝紫色蓝紫色 转入氯仿中显黄色转入氯仿中显黄色CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2 + Cu+ 2CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2 CuCH3CH3(C2H5)2NCH2CONH亮绿色细小钴盐沉淀亮绿色细小钴盐沉淀（与钴离子反应）（与钴离子反应）CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2 + CoCl2 CH3CH3NCOCH2N(C2H5)2 CH3CH3(C2H5)2NCH2CONCo+ 2HCl基于普鲁卡因胺分子中的芳

8、酰胺结构。基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构。H2NCONHCH2CH2N(C2H5)2+H2O2H2NCONCH2CH2N(C2H5)2OH+H2OFeCl3H2NCONCH2CH2N(C2H5)2O3Fe+3HCl紫红色紫红色 暗棕色暗棕色 棕黑色棕黑色三、水解产物反应三、水解产物反应1.1.盐酸普鲁卡因的鉴别盐酸普鲁卡因的鉴别盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因+NaOH+NaOH白色白色（普鲁卡因）普鲁卡因）H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2HClH2NCOOCH2CH2N(C2H5)2NaOHH2NCOONa + HOCH2CH2N(C2H5)2NaOHH2NCOONaHClH2NCOOHH

9、2NCOOHHClHCl普鲁卡因普鲁卡因油状物油状物蒸气蒸气湿润红色石蕊试纸变蓝湿润红色石蕊试纸变蓝对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸钠+HCl+HCl白色白色+ +过量过量HClHCl溶解溶解H2NCOOC2H5 + NaOH H2NCOONa + C2H5OH C2H5OH + 4I2 + 6NaOHCHI3+ 5NaI + HCOONa + 5H2O四、制备衍生物测熔点四、制备衍生物测熔点1.1.紫外吸收光谱：分子结构中含有苯环紫外吸收光谱：分子结构中含有苯环2.2.红外吸收光谱：红外吸收光谱：利用化合物结构中特殊基团的利用化合物结构中特殊基团的振动和转动等红外活性振动产生的红外吸收峰振动和转动

10、等红外活性振动产生的红外吸收峰对药物进行鉴别的方法。对药物进行鉴别的方法。第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查一、一、COOCH2CH2N(C2H5)2H2NCOOH + HOCH2CH2N(C2H5)2H2NH2NCOOH-CO2H2NOO（为什么要检查？）（为什么要检查？）ChP2010规定盐酸普鲁卡因及其注射液以及注射规定盐酸普鲁卡因及其注射液以及注射用盐酸普鲁卡因均需要检查对氨基苯甲酸。用盐酸普鲁卡因均需要检查对氨基苯甲酸。盐酸普鲁卡因原料药以及注射用灭菌粉末盐酸普鲁卡因原料药以及注射用灭菌粉末中对氨基苯甲酸不得超过中对氨基苯甲酸不得超过0.5%。n盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲

11、酸不得超过盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸不得超过1.2%。nAgillent 安捷伦安捷伦nWaters 沃特斯沃特斯nBruker 布鲁克布鲁克nVarian 瓦里安瓦里安nAB 美国应用生物系统美国应用生物系统nShimadzu 岛津岛津nFinnigan 菲尼根菲尼根H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2Cl.HCl杂质来源：在生产和贮藏过程中，其注射液在杂质来源：在生产和贮藏过程中，其注射液在一定的灭菌时间、温度和一定的灭菌时间、温度和pH条件下，更易发条件下，更易发生水解反应，生成生水解反应，生成4-氨基氨基-2-氯苯甲酸降解产物。氯苯甲酸降解产物。检查方法（检查方法（USP34

12、-NF29）：）：HPLC限量：限量： 4-氨基氨基-2-氯苯甲酸氯苯甲酸0.625% 4-氨基氨基-2-氯苯甲酸注射液氯苯甲酸注射液3.0%CH3H3CNHCOCH2N(C2H5)2HClH2ONH2CH3H3C杂质来源：生产和贮藏杂质来源：生产和贮藏过程中水解。过程中水解。0.04% 其他各杂质其他各杂质1.0%第四节第四节 含量测定含量测定一、亚硝酸钠滴定法一、亚硝酸钠滴定法本类药物分子结构中具有芳伯氨基或水解后具本类药物分子结构中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中可与亚硝酸钠反应，有芳伯氨基，在酸性溶液中可与亚硝酸钠反应，可用亚硝酸钠滴定法测定含量。可用亚硝酸钠滴定法测定含

13、量。 NHCOR + H2ONH2 + RCOOHH+nChP2010中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和注中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和注射用盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺及其射用盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺及其片剂与注射剂，可直接采用本法测定含量。片剂与注射剂，可直接采用本法测定含量。芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示反应应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示反应终点。终点。ArNHCOR + H2OH+ArNH2 + RCOOHArNH2 + NaNO2 + 2HClA

14、rN2+Cl- + NaCl + 2H2O3.3.测定的主要条件测定的主要条件反应速度取决于：溶液中芳伯氨基的浓度和反应速度取决于：溶液中芳伯氨基的浓度和NONO+ +的浓度的浓度NaNO2 + HClHNO2 + NaClHNO2 + HClNOCl + H2OArNH2NO+Cl-慢ArNHNO快ArNNOH快ArN2+Cl-（第一步）（第一步）HBr + KClHNO2 + HBrNOBr + H2OKHBr KHBr 比比KHCl大大300倍倍 生成生成NOBr量大得多量大得多加快重氮化反应速度加快重氮化反应速度加入溴化钾（加入溴化钾（ChP2010规定加入规定加入2g）HNO2 +

15、HClNOCl + H2OKHClArN2+Cl- + H2NArArNNNHAr + HCl偶氮氨基化合物偶氮氨基化合物(4)(4)滴定速度：滴定速度：滴定速度不宜太快。为了避免滴定过滴定速度不宜太快。为了避免滴定过程中亚硝酸挥发和分解，滴定时宜将程中亚硝酸挥发和分解，滴定时宜将滴定管尖端插入液面下约滴定管尖端插入液面下约2/32/3处滴定，处滴定，一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入，后将滴定管尖端提条件下迅速加入，后将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗，再缓缓滴定。出液面，用少量水淋洗，再缓缓滴定。“先快后慢先快后慢”4.4.指示终点的方法指示终点

16、的方法(2)(2) 外指示剂法外指示剂法用用KI-KI-淀粉指示剂淀粉指示剂指示终点的原理：指示终点的原理： 2NaNO2NaNO2 2 +2KI+4HCl +2KI+4HCl 2NO+I2NO+I2 2 +2KCl+ 2NaCl + 2H2O+2KCl+ 2NaCl + 2H2O计算：精密称取盐酸普鲁卡因计算：精密称取盐酸普鲁卡因0.5207g0.5207g，按，按永停滴定法永停滴定法, ,在在15152525用亚硝酸钠滴定液用亚硝酸钠滴定液（0.1022mol/L0.1022mol/L）滴定到终点，用去亚硝酸）滴定到终点，用去亚硝酸钠滴定液钠滴定液18.52ml.18.52ml.已知已知,

17、 ,每每1ml1ml亚硝酸钠滴亚硝酸钠滴定液（定液（0.1mol/L0.1mol/L）相当于）相当于27.28mg27.28mg的盐酸普的盐酸普鲁卡因。求盐酸普鲁卡因的百分含量？鲁卡因。求盐酸普鲁卡因的百分含量？2(CH3CO)2O (CH3CO)3O+ + CH3COO-CH3CH3NONC4H9H.HCl+HClO4CH3CH3NONC4H9H.HClO4+HClChP2010采用紫外分光光度法测定注射用盐酸采用紫外分光光度法测定注射用盐酸丁卡因的含量丁卡因的含量nChP2010采用该法测定盐酸利多卡因注射液采用该法测定盐酸利多卡因注射液的含量。的含量。3.3.下列药物中不能用亚硝酸钠滴定

18、法测定含量下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量的是的是 A .A . 乙 酰 水 杨 酸乙 酰 水 杨 酸 B .B . 对 氨 基 水 杨 酸 钠对 氨 基 水 杨 酸 钠 C C注射用盐酸普鲁卡因注射用盐酸普鲁卡因 D.D.盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 E.E.苯佐卡因苯佐卡因 4.4.亚硝酸钠滴定法中，加亚硝酸钠滴定法中，加KBrKBr的作用是的作用是A.A.使终点变色明显使终点变色明显 B.B.使氨基游离使氨基游离 C.C.增加增加NONO+ +的浓度的浓度 D.D.增强药物碱性增强药物碱性 E.E.增加离子强度增加离子强度5.ChP20105.ChP2010收载盐酸利多卡因注射液的含量测定收载盐酸利多卡因注射液的含量测定方法是：方法是：A. A. 亚硝酸钠滴定法亚硝酸钠滴定法 B. B. 紫外分光光度法紫外分光光度法C. C. 高效液相色谱法高效液相色谱法 D. D. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法E. E. 溴量法溴量法 6.以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸 A. 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 B. 盐酸氯普鲁卡因盐酸氯普鲁卡因 C.盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺 D