经典液相色谱法()平面色谱

1、18.1 概述液相色谱平面色谱柱色谱按操作形式液相色谱现代液相色谱经典液相色谱按固定相规格、流动相的驱动力等薄膜色谱纸色谱薄层色谱18.2 液固吸附柱色谱法18.2.1 分离原理18.2.2 吸附剂结构： 内部硅氧交联结构多孔结构 表面有硅醇基吸附活性中心氢键作用硅胶： SiO2xH2OSiOH特性： 1）与极性物质或不饱和化合物形成氢键 物质极性，吸附能力 2）吸水失活 1051100C烘干30分钟(可逆失水)吸附力最大 5000C烘干(不可逆失水)活性丧失，无吸附 表：硅胶的活度与含水量硅胶含水量活性级别氧化铝含水量005315625103815 3）硅胶的分离效率与硅胶粒度、孔径及表面积

2、等几何结构有关。适用范围： 硅胶表面的pH约为5，适合分析酸性或中性物质。 碱性氧化铝 pH 910 适于分析碱性、中性物质 中性氧化铝 pH7.5 适于分析酸性碱性和中性物质 酸性氧化铝 pH 45 适于分析酸性、中性物质氧化铝 色谱用的氧化铝是含有一定杂质的型氧化铝，通常加热可使活性增加，但不能超过10000C。 聚酰胺 聚酰胺是一类化学纤维素原料，分子中含大量的酰胺基团，能与极性物质形成氢键，产生不同的作用力。 除了硅胶、氧化铝、聚酰胺外，常用的吸附剂还有硅藻土、硅酸镁、活性炭、二氧化锰、玻璃粉、天然纤维等。18.2.3 色谱条件的选择 按竞争吸附的原理，应同时考虑试样的结构与性质、吸附

3、剂的活性和流动相的极性三者的因素。1）被测物质的结构与极性饱和碳氢化合物为非极性化合物(难发生色谱行为)。基本母核相同的化合物，分子中引入的取代基的极性越强，则整个分子的极性越强，吸附能力越强。不饱和化合物比饱和化合物的极性强，分子中双键越多，吸附能力越强。分子中取代基的空间排列对吸附性也有影响。常见化合物的吸附能力有下列顺序： 烷烃烯烃醚类硝基化合物酯类酮类醛类胺类醇类酚类酸吡啶甲醇乙醇正丙醇丙酮乙酸乙酯乙醚氯仿二氯甲烷甲苯苯三氯乙烷四氯化碳环己烷石油醚18.3 离子交换柱色谱法18.3.1 离子交换树脂固定相离子交换树脂流动相水为溶剂的缓冲溶液分离对象离子型化合物最常用的是聚苯乙烯型离子交

4、换树脂1）阳离子交换树脂OHCOOHHSO3、羟基、羧基磺酸基ClHNaRSO ClNaHRSO33交换再生1）阴离子交换树脂3233NHCHNH)CH(N、仲胺基、伯胺基季胺基NaOHCl)CH(NCHR NaClOH)CH(NCHR332332交换再生18.3.2 离子交换树脂的性能交联度： 指离子交换树脂中交联剂的含量。通常以树脂中二乙烯苯在原料中所占总重量百分比表示。 交联度与树脂空隙有关。交换容量： 理论交换容量：每克干树脂内所含有的酸性或碱性基团的数目。 实际交换容量：在实验条件下，每克干树脂真正参加交换的基团数。单位以mmol/g表示。的保留时间越长。越大，说明选择性系数：离子交换过程的通式：BK KKK A B-R B A -R B/AABB/A18.3.3 离子交换色谱法的分离原理 通常，离子的价数越高，原子序数越大，水合离子半径越小和离子交换树脂的亲和力就越大。 阳离子在强酸型阳离子交换树脂上的交换顺序： Fe