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文档简介

1、第一节 沙门氏菌检验食品中肠道致病杆菌的检验食品中肠道致病杆菌的检验 沙门氏菌Salmonella是肠杆菌科中最复杂的菌属,1880年Eberth首先发现伤寒沙门氏菌,1885年Salmon与Smith又分别出猪霍乱沙门氏菌,以后取名Salmon氏之名为本菌属属名。已发现近2000个血清型,我国已发现近200个血清型。 对人类有致病性肠热症伤寒沙门菌,甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌食物中毒鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌败血症猪霍乱沙门菌最常见生物学性状形状染色 符合肠杆菌特点,革兰氏染色阴性短杆菌,无荚膜,无芽胞,多数有鞭毛(周生毛菌),有动力也有无动力的变种。鼠伤寒沙门菌s

2、amonella typhimurium 沙门氏菌革兰氏染色照片培育特性EMB、SS上呈无色透明乳糖不发酵菌落沙门氏菌SS平板培育物黑色菌落 鼠伤寒沙门鼠伤寒沙门在SS培育基上构成半透明较小菌落 在酸性条件下菌落中心产生H2S(SS培育基 生化反响 乳糖-,葡萄糖+/+,多数H2S+,动力+,尿素- 抗原构造 O抗原特异性低、稳定、分群组 H抗原特异性高,不稳定,分型 Vi抗原毒力抗原不稳定,可阻止“O凝集 抵抗力 不强致病性与免疫性 致病物质 侵袭力 菌毛吸附 型分泌系统穿入细胞,分散 Vi抗原微荚膜抗吞噬 内毒素 外毒素个别鼠伤寒沙门菌产生,与ETEC肠毒素类似 肠热症 临床过程 埋伏期2

3、W 发病初期:第1W第一次菌血症、高热、肝脾肿大、皮疹、WBS等全身中毒病症,此期血液80%、骨髓90%+有大量细菌 发病极期:第2-4W,全身病症继续加重,此期血、骨髓中仍有菌,但粪便60%、尿20%、皮疹液中可查到细菌, 由于型变态反响并发症发生, 血液抗体到达阳性规范肥达反响 恢复期:第周围末,体温下降,病症消逝,恢复期带菌1年粪便仍阳性,血液抗体仍高 胃肠炎食物中毒 埋伏期短,6-24h,起病急,病程短2-4天,发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻 败血症 经口感染,经肠道入血,败血症病症明显而肠道病症不明显 带菌者 安康带菌者,恢复期带菌者 免疫性 肠热症,病后免疫结实,其它可反复感染微生物

4、学检查与防治 分别培育与鉴定 标本采取: 肠热症:第1-2W,血、骨髓;第2-3W,粪便、 食物中毒:粪便、呕吐物、可疑食物 败血症:血 带菌者:粪便 分别鉴定: 增菌血、骨髓EMB、SS生化反响血清鉴定血清学诊断肥达反响Widal 原理 用知伤寒沙门氏菌O抗原及H 抗原,以及引起副伤寒的沙门氏菌H抗原与待检血清作凝集实验,测定待检血清中有无相应抗体及其效价。TO、TH、PA、PB 方法:试管凝集法定量 TO1:80,TH1:160,PA、PB均1:80才有意义 动态察看:双份血清抗体四倍升高有诊断意义临床意义O抗体IgM, H抗体IgGO 、H抗体均升高,患伤寒的能够性大O 、H抗体不升高,

5、患伤寒的能够性小只需H升高,那么能够是预防接种过或非特异性回想反响,只需O升高而H不高,那么能够是感染早期或其他沙门菌的交叉反响。 沙门氏菌主要寄生在人体、哺乳动物和家禽的肠道内,可伴随粪便的排泄污染水源,食品与药品。沙门氏菌的种类繁多,有些对人有致病力,如伤寒沙门菌和副伤寒沙门氏菌;有些对动物有致病力,如鸭沙门氏菌和雏沙门氏菌;尚有一些对人和动物皆有致病力,如肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和猪霍乱沙门氏菌等。它们能引起人类伤寒症、急性胃肠炎和败血症等。 带有这些细菌的人与动物常可直接或间接地污染药品的消费环境、工具设备和原料辅料,以及半废品和废品等。特别是用动物脏器制成的药品,污染机率较高,影

6、响患者用药平安,并有能够经过药品的流通而传播。故将沙门氏菌,应列为某些药品的必检工程。 一增菌培育: 取供试品稀释液毫升,接种于备妥的毫升胆盐乳糖增菌液内。置培育小时,进展增菌。 二分别培育: 取上述增菌培育物,划线接种于琼脂和琼脂平板各一个划线时,适当添加琼脂平板的涂抹量-环,可提高阳检率,置培育-小时。凡沙门氏菌,在和琼脂平板上,菌落普通无色透明或半透明,圆形,周边整齐,外表光滑潮湿,在琼脂平板上中心有时呈黑褐色。如有上述疑似菌落,应选取-个分别进展纯培育,按以下方法鉴别。 伤寒沙门菌在SS琼脂平板上的菌落特征伤寒沙门菌在CHROMagar显色培育基上的菌落特征伤寒沙门菌在CHROMaga

7、r显色培育基上呈紫色菌落沙门氏菌SS平板培育物黑色菌落沙门氏菌在BS平板上的典型菌落产H2S菌株沙门氏菌在BS平板上的菌落Salmonella typhimurium 三初步鉴别: 将上述纯培育物分别穿刺并划线接种三糖铁琼脂,置培育小时。凡在琼脂中不分解乳糖及蔗糖即上部斜面呈碱性,不变色,下层底部分解葡萄糖呈酸性变黄色有气泡或无气泡,有动力或无动力,以及产生或不产生黑褐色的硫化氢反响,并经涂片染色镜检为革兰氏阴性杆菌,都应继续做生化实验和血清学检查。 沙门氏菌三糖铁沙门氏菌革兰氏染色照片 四生化实验: 取上述疑似菌落的纯培育物、分别接种至葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和蔗糖等发酵管培育基,并接种蛋白胨水和尿素培育基,经培育-天,察看结果。沙门氏菌普通生化反响和动力检查,绝大数应为、葡萄糖,乳糖,麦芽糖,甘露醇,蔗糖,靛基质,硫化氢,尿素酶,动力。当普通生化实验符合时,应做赖氨酸脱羧酶及氰化钾实验。沙门氏菌赖氨酸脱羧酶实验,氰化钾。沙门氏菌氨基酸脱羧酶沙门氏菌蛋白胨水尿素琼脂实验出现异常,缘由能够是沙门氏菌变种 (五动力实验: 取上述纯培育物穿刺接种半固体培育基,于培育小时后,察看动力表现。无动力表现的培育物,应在室温左右保管-

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