常用培养基配制

1、常用培养基1 口拉美苴 LB培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨10 g1.0% (w/v)酵母抽提物5 g0.5% (w/v)NaCI10 g1.0% (w/v)H2O至1升调节pH值至7.0低盐LB培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨10 g1.0% (w/v)酵母抽提物5 g0.5% (w/v)NaCI10 g0.5% (w/v)H2O至1升调节pH值至7.0Terrific Broth培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨12 g1.2% (w/v)酵母抽提物24 g2.4% (w/v)甘油4 g0.4% (w/v)加H2O至 900 ml火菌，冷却至60°C后加入100 ml过滤火菌的10X

2、TB磷酸盐(0.17MKHPQ 0.72 MKzHPG)SOB培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨20 g2.0% (w/v)酵母抽提物5 g0.5% (w/v)NaCI0.5 g0.05% (w/v)250 mM KCI10 ml2.5 mMH2O至 900 ml调节pH值至7.0，力口 H2O至990 ml火菌、冷却至室温。使用前加入10 ml火菌的1 M MgCl2 溶液10 mMSOC培养基SOB培养基（1升）加入20 ml过滤灭菌的1 M葡萄糖M9基本培养基/升终1 X浓度5X M9 salts200 ml火菌H2O至1升1 M MgSO1 ml1 mM20%葡萄糖10 ml0.2 (w/

3、v)1 M CaCl 20.1 ml0.1 mM5X M9 Salts/升终1 X浓度Na>HP(4X7H2O64 g47.8 mMKHPQ15 g22 mMNaCl2.5 g8.6 mMNH5 g18.7 mM添加剂/升终1 X浓度抗生素（如果需要）氨卞冃霉素50 g/ml氯霉素20 g/ml卡那霉素30 g/ml四环素12 g/ml半乳糖苷（如果需要）X-Gal20 g/mlIPTG0.1 mM培养基含有琼脂或琼脂糖琼脂（平板）15 g1.5% (w/v)琼脂（软性琼脂）7 g0.7% (w/v)琼脂糖（平板）15 g1.5% (w/v)琼脂糖（软性琼脂糖）7 g0.7% (w/v)

4、参考文献1. Atlas, R.M., Han dbook of Microbiological Media, sec ond editio n, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12,2001.常用储存液10 M醋酸铵醋酸铵385.4 gHO至 500 m

5、l1 M CaCI 2CaCl2x6H2O219.1 gHO至1升100X Den hardt 溶液终浓度Ficoll 40010 g0.02% (w/v)聚乙烯吡咯烷酮10 g0.02% (w/v)牛血清白蛋白10 g0.02% (w/v)H2O至 500 ml过滤灭菌后分装（25 ml） , -20° C保存0.5 M EDTA (乙二胺四乙酸)(pH 8.0)NEDTAx2HO186.1 gH2O至 700 ml10 M NaOH (50 ml)调节 pH值至 8.0H2O至1升10 mg/ml溴化乙锭溴化乙锭0.2 gH2O至 20 ml充分混匀后4°C黑暗保存警告

6、：溴化乙锭是一种突变剂。使用溴化乙锭溶液时需带手套；称量其粉末时需带面具。1 M KClKCl74.6 gH2O至1升1 M MgCI 2MgCl2x6H2O20.3 gH2O至 100 ml1 M MgSC4MgSMWO24.6 gH2O至 100 ml5 M NaCINaCI292.2 gH2O至1升10 M NaOHNaOH400.0 gH2O至1升1 M Tris-HCI 三羟甲基氨基甲烷盐酸盐Tri base121.1 gH2O至 800 ml用于浓缩的HCI调节至所需的pH值混合后加HO至1升3 M 醋酸钠(pH 5.2 或 7.0) (2)醋酸钠x 3H 2O401.1 gH2O

7、至 800 ml用醋酸调节pH值至7.0或用冰醋酸调节 pH值5.2H2O至1升参考文献1. Atlas, R.M., Han dbook of Microbiological Media, sec ond editio n, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2

8、.12,2001.常用缓冲液10X磷酸盐缓冲液(储存液)(PBS)/升终1 X浓度NaCl80.0 g137 mMKCl2.0 g2.7 mMNa>HPO14.4 g100 mMKHPQ2.7 g2 mMHO至 800 mlHCl至 pH 7.4HO至1升20X SSC/升终1 X浓度NaCl175.3 g150 mMNascitrate x H2O88.2 g15 mMH2Q至 800 ml1M HCl调节pH值至7.0H2O至1升20X SSPE/升终1 X浓度NaCI175.3 g150 mMNaHPQxHbO27.6 g10 mMNEDTA7.4 g10 mMH2O至 800 m

9、l10 M NaOH调节pH值至7.4H2O至1升5X Tris-甘氨酸,Native电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri碱15.1 g25 mM甘氨酸72.0 g192 mMH2O至1升稀释溶液的pH至8.35X Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri碱15.1 g25 mM甘氨酸72.0 g192 mMSDS5.0 g0.1% (w/v)H2O至1升稀释溶液的pH至8.35X Tris-三（羟甲基）甲基甘氨酸-SDS电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri碱121.1 g0.1 MTricine179.2 g0.1 MSDS10.0 g0.1% (w/v)H2O至1升稀释溶液的pH至

10、8.350X TAE (Tris- 醋酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri碱242.0 g40 mM冰醋酸57.1 ml20 mM0.5 M EDTA (pH 8.0)100 ml2% mMH2O至1升稀释溶液的pH大约为8.510X TBE (Tris- 硼酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri碱108.0 g90 mM硼酸55.0 g90 mM0.5 M EDTA (pH 8.0)40 ml2% mMH2O至1升10X TPE (Tris- 磷酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri碱108.0 g90 mM磷酸(85%)15.5 ml23 mM0.5 M EDTA

11、 (pH 8.0)40 ml2% mMH2O至1升TE (Tris-EDTA) 缓冲液 pH 7.4, 7.6 或 8.0/升终1 X浓度1 M Tri, pH 7.4, 7.6, 8.010.0 ml10 mM0.5 M EDTA (pH 8.0)2.0 ml1 mMHO至1升参考文献1. Atlas, R.M., Han dbook of Microbiological Media, sec ond editio n, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A La

12、boratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12,2001.常用缩写A腺嘌呤或腺苷；丙氨酸单字母代码A260260 nm吸光值ACESN-（2-乙酰氨基）-2-氨基乙磺酸Ad-2腺病毒-2ADAN-（2-乙酰氨基）-2-亚氨基一乙酸ADP腺苷5'-二磷酸AMP腺苷单磷酸AMV禽成髓细胞瘤病毒AP碱性磷酸酶APS过硫酸铵aRNA反义RNAATP腺苷5'-三磷酸BCIP5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸BESN,N-双（2-羟乙基）

13、-2-氨基乙磺酸BGG牛血清球蛋白BICINEN,N-双（2-羟乙基）甘氨酸Bio-dNTP生物素-脱氧核苷二磷酸BMEbeta-巯基乙醇；2-巯基乙醇bp碱基对Bq贝可BSA牛血清白蛋白B/W监/白克隆C胞嘧啶或胞苷；半胱氨酸单字母代码CA酪蛋白氨基酸CAPSN-环已胺-3-丙磺酸cDNA互补脱氧核糖核酸CEU粘性末端连接单位Ci居里CIAP小牛肠碱性磷酸酶CMPc胞苷单磷酸cpm次/分钟CTP胞苷5'-三磷酸Da道尔顿dAMP脱氧腺苷单磷酸dATP脱氧腺苷三磷酸dCTP脱氧胞苷三磷酸ddATP双脱氧腺苷三磷酸ddCTP双脱氧胞苷三磷酸ddGTP双脱氧鸟苷三磷酸ddNTP双脱氧核苷三

14、磷酸ddTTP双脱氧胸苷三磷酸DE-81Whatma n二乙基胺基乙基纤维素纸DEPC焦碳酸二乙酯DIG地咼辛dITP脱氧肌苷三磷酸dGTP脱氧鸟苷三磷酸DMSO二甲亚砜DNA脱氧核糖核酸DNase脱氧核糖核酸酶dNMP脱氧核糖核苷单磷酸dNTP脱氧核糖核苷三磷酸dpm分解量/分钟ds双链Dll二硫苏糖醇dTTP脱氧胸苷三磷酸dUTP脱氧尿苷三磷酸EDTA乙二胺四乙酸EGTA乙二醇-双-（2-氨基乙基）四乙酸ELISA酶联免疫吸附实验EMBL欧洲分子生物学实验室EMSA凝胶电泳迁移分析ENDO内切脱氧核糖核酸酶分析en do内切核酸酶exo外切核酸酶EXO5'和3'-外切脱氧核

15、糖核酸酶分析FOA (5-FOA)5-氟乳清酸G鸟嘌呤或鸟苷；甘氨酸的单字母代码GalD-半乳糖GMP鸟苷单磷酸GMPD糖基酶介导的多态性检测GUSbeta-D-葡萄糖醛酸酶GTP鸟苷5'-三磷酸GQ遗传质量合格HC高浓度HEPESN-（2-羟乙基）哌嗪-N' -2-乙磺酸HRP辣根过氧化物酶HPLC咼效液相色谱I EF等电聚焦IPTG异丙基-beta-D-硫代半乳糖苷kb千碱基kDa千道尔顿LAMP环介导恒温扩增LBLuria Berta ni培养基LC低浓度LE低电渗LM低熔点LO标记的核苷酸MCS多克隆位点MES2-码啉乙磺酸MDA多重置换扩增M-MuLV小鼠肉瘤病毒MO

16、PS3-吗啉丙磺酸mRNA信使核糖核酸MW分子量NAD烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，还原型NADP烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸NADPH烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸，还原型NBT硝基蓝四氮唑NDP核苷二磷酸NMP核糖核苷单磷酸NR不推存NP-40Nonidet P-40( 去污剂)nt核苷酸NTC无模板对照NTP核苷二磷酸oligo(A)寡聚腺苷酸oligo(dT)寡聚脱氧胸苷酸OMP乳清苷（一磷）酸Pi无机磷酸PAAG聚丙烯酰胺凝胶PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳PBS磷酸盐缓冲液PCR聚合酶链式反应PEI聚乙烯亚胺PEG聚乙二醇PIPES哌嗪-1,4-二乙磺酸PNK多聚核苷激酶pNPP对

17、硝基苯磷酸poly(A)多聚腺苷酸poiy(A) +多聚腺苷酸（mRNA）poly(dA-dT)多聚（脱氧腺苷酸-脱氧胸苷酸）poiy(dT)多聚脱氧胸苷酸PR无机焦磷酸盐PVDF聚偏二氟乙烯QCA质里控制分析qPCR定量聚合酶链式反应RACE快速扩增cDNA末端RCA滚环复制RDA随机置换扩增RE限制酶RNA核糖核酸RNase核糖核酸酶R-M限制-修饰rRNA核糖体核糖核酸RT逆转录RT-PCR逆转录聚合酶链式反应SAMS-腺苷蛋氨酸SAP虾碱性磷酸酶SDA链置换扩增SDS十二烷基磺酸钠siRNA小分子干扰核糖核酸SNP单核苷酸多态性ss单链SSC氯化钠/柠檬酸钠（缓冲液）SSCP单链构象多态性SSPE氯化钠/磷酸钠/EDTA（缓冲液）STR短串联重复T胸腺嘧啶或胸苷；苏氨酸单字母代码TAETris/醋酸/EDTA（缓冲液）TBETris/硼酸/EDTA（缓冲液）TdT末端脱氧核苷转移酶TETris/EDTA（缓冲液）TEMEDN,N,N' ,N'-四甲基二乙胺TES三羟