大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤后胆结石形成的干预作用研究

1、大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤后胆结石形成的干预作用研究         作者：唐乾利，俞渊，黄名威，关中正，高善辉 【摘要】 目的探讨大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤家兔胆结石形成的干预作用及其作用机制。方法将46只家兔随机分为正常组、慢性肝损伤组、肝硬化组、大黄灵仙胶囊大剂量组、大黄灵仙胶囊小剂量组。采用皮下注射CCl4方法进行慢性                &#

2、160;         作者：唐乾利，俞渊，黄名威，关中正，高善辉 【摘要】  目的探讨大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤家兔胆结石形成的干预作用及其作用机制。方法将46只家兔随机分为正常组、慢性肝损伤组、肝硬化组、大黄灵仙胶囊大剂量组、大黄灵仙胶囊小剂量组。采用皮下注射CCl4方法进行慢性肝损伤造模,各组同时进行不同处理。最后观察各组胆囊成石率，肝脏功能生化指标，肝组织病理改变、超微结构改变，胆汁成分改变。结果慢性肝损伤组、肝硬化组胆石形成阳性检出率较正常对照组显著增加（P0.05或P0.01）。大黄

3、灵仙胶囊大剂量组、大黄灵仙胶囊小剂量组胆石阳性检出率较肝硬化组有显著降低(P0.01或P0.05)。各模型组中肝脏超微结构均发生不同程度异常改变，大黄灵仙胶囊大、小剂量治疗组肝脏病理改变、肝细胞超微结构改变较模型组比较均有改善，大剂量组尤为明显。大黄灵仙胶囊大、小剂量组血清AST，ALT，-GT，非结合胆红素均明显低于肝硬化组（P0.05或P<0.01）；总胆红素、间接胆红素、钙离子大黄灵仙胶囊大、小剂量组较肝硬化组明显降低（P<0.01），大剂量组较小剂量组明显降低（P<0.01）。结论大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤后胆结石形成具有明显的预防效果，其作用机制主要与抑制CCl4所致

4、肝脏损伤的作用有关，同时与大黄灵仙胶囊在多层次、多途径调节参与结石形成各因素关系密切。 【关键词】  慢性肝损伤； 肝硬化； 大黄灵仙胶囊； 胆结石； 肝脏超微结构Abstract：ObjectiveTo study the interference effect and its mechanism of Dahuanglinxian Capsules on gallstone formation after chronic liver injury of rabbits. Methods46 rabbits were randomly divided into 5 groups,

5、respectively named by group A (normal control group), group B (chronic liver injury group), group C (liver cirrhosis group), group D (group fed with large dose Dahuanglinxian capsule) and group E (group fed with large dose Dahuanglinxian capsule). The chronic liver injured rabbits were induced by su

6、bcutaneous injection with CCl4 and each group was treated by different factors at the same time. The gallstone formation rate, liver function biochemical index, pathological changes in liver tissues, ultrastructural changes, and biliary component change were observed by the methods of biochemical an

7、d pathological technology. ResultsThe gallstone formation rate of group B and C were obviously higher than group A (P0.05 or P0.01). The gallstone formation rate of D and E were obviously lower than group C (P0.05 or P0.01). There were abnormal ultrastructural changes to certain extent in models B a

8、nd C. Compared with the model groups, the D and E groups improved the ultrastructural changes and pathological changes in liver tissues, especially D group. The level of AST，ALT，r-GT and indirect bilirubin in serum of groups D and E were obviously lower than group C (P0.05 or P<0.01). At the same

9、 time, the content of total bilirubin, indirect bilirubin, Ca2+ of groups D and E were obviously lower than group C (P<0.01), the same of group D was lower than group E (P<0.01). ConclusionThe Dahuanglinxian capsules have significant effect of preventing gallstone formation due to its protecti

10、ve effect to liver injury which is induced by CCl4, and its association with regulations to many factors participating in the gallstone formation on multiple levels and ways.Key words： Chronic liver injury；  Cirrhosis of liver；  Dahuanglinxian Capsule；  Gallstones；  Ultrastructur

11、e    本实验利用CCl4皮下注射诱发家兔慢性肝损伤，在此基础上观察胆囊结石形成率，并用大黄灵仙胶囊组方煎剂进行灌胃，通过观察结石形成率，肝脏细胞超微结构的病理学改变，测定实验动物肝功能及胆汁成分并进行胆汁培养，以探讨大黄灵仙胶囊对家兔慢性肝损伤胆结石模型的干预治疗作用。1  材料与仪器1.1  材料、仪器健康家兔，体质量2.53.0 kg，雌雄不拘，普通级，广西中医学院实验动物中心提供，合格证号20060820。各生化试剂盒分别购于上海申能德赛诊断技术有限公司和伊利康生物技术有限公司。奥地利Biocell2010酶标仪、日立H-500透射电

12、镜、BX-50-32001奥林巴斯光学显微镜、HPIAS-1000P病理图文分析系统等分别由广西医科大学中心实验室、广西中医学院一附院病理实验室提供。1.2  药品造模用药：CCl4 分析纯（将CCl4与花生油以12.5比例混合，37加热使充分溶解，制成40CCl4溶液，）、胆固醇分析纯，均为上海国药集团产品。受试用药：大黄灵仙胶囊1 (生大黄150 g，威灵仙300 g，芒硝100 g，金钱草300 g，枳壳120 g，鸡内金100 g，泽兰150 g，柴胡120 g，郁金120 g，磁石120 g，黄芪300 g，甘草50 g)，以上共计1 930 g生药，由广西中医学院第一附属

13、医院制剂室提取965 ml浓缩药液，并无菌密封瓶装（生药量为2 g /ml）。2  方法2.1  动物分组及处理方法健康家兔46只，体质量2.53.0 kg，雌雄不拘，适应性喂养1周后随机分为5组，即正常对照组10只、慢性肝损伤组8只、肝硬化组8只、大黄灵仙胶囊大剂量组10只（用药量相当于成人用量的3倍）、大黄灵仙胶囊小剂量组10只（用药量相当于成人用量）。正常对照组普食喂养，每日灌服生理盐水4 ml/kg；慢性肝损伤组采用“慢性肝损伤兔动物模型”的建立2，普食喂养10周后，每日灌服生理盐水4 ml/kg；肝硬化模型组造模方法2：家兔称重后以2 ml/kg体质量，将40CC

14、l4溶液颈后皮下注射，每4天1次，以形成皮下丘状突起为宜3。造模后第10周开始每日灌服生理盐水8 ml/kg；大黄灵仙胶囊大、小剂量组第10周起每日灌服胆通胶囊提取液8 ml/kg，4 ml/kg。普食喂养。2.2  检测指标及方法2.2.1  胆囊结石成石观察结石判定标准为正常胆囊胆汁内无有形成分。肉眼观察胆汁内有无棕黑色成型颗粒或泥沙样沉淀；镜下观察有无结石微粒或结晶。2.2.2  生化指标检测天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、-谷氨酰转肽酶(-GT)采用速率法检测；血清中总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、血清总胆固醇、总胆汁酸、胆汁总胆汁酸、总胆固醇采用化学比色法检测；钙离子含量采用乙二胺四乙酸二钠法检测；磷脂含量酶显色法检测。2.3  统计学处理所有数据采用SPSS14.0统计软件进行分析，计量资料以±s表示，两组间均数比较用t检验；两组间率的比较采用卡方检验；P0.05认为有统计学意义。3  结果3.1  家兔胆囊结石发生情况结果见表1。表1  胆石发生情况（略）3.2  家兔肝脏病理改变光镜下观察，慢性肝损伤组（