脂质体辅料二硬脂酰磷脂酰乙醇胺的合成研究

1、脂质体辅料二硬脂酰磷脂酰乙醇胺的合成研究吴立红，张宏武，郑利刚，刘亚英（石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司，石家庄 050051）摘要：目的 研究并改进脂质体辅料磷脂酰乙醇胺的合成工艺。方法 以D-甘露醇为其始原料，经丙叉保护、氧化、还原、苄基保护、水解、酯化、氢解、磷酰化可制得本品。结果 目标化合物经质谱和核磁氢谱确证，总收率为23.2% 。结论 本路线原料成本低，操作简单，适合工业化生产。关键词：脂质体辅料；磷脂酰乙醇胺；合成中图分类号：R914 文献标识码：AStudies on Synthesis of Liposome Excipient 1,2-Stearoyl Phospha

2、tidyl EthanolamineWU Li-hong,ZHANG Hong-wu,ZHENG Li-gang,LIU Ya-ying(CSPC ZHONGQI PHARMACEUTICAL TECHNOLOGY (SJZ)CO.LTD,shijiazhuang 050051)ABSTRACT：OBJECTIVE To study and improve the synthesis of liposome excipient phosphatidyl ethanolamineMETHODS Phosphatidyl ethanolamine was prepared from D-manni

3、tol by isopropylidend and oxygenation, reduction,followed by benzylation, hydrolysis, esterification, hydrogenolysis and phosphorylationRESULTS The structure of target compound was identified by MS and 1H-NMRThe overall yield was 23.2CONCLUSION This costsaving and simplified method can be used in th

4、e industrial preparationKEY WORDS：liposome excipient；phosphatidyl ethanolamine；synthesis二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（DSPE），化学名1,2-二硬脂酰-sn-甘油醇3-磷脂酰乙醇胺，属于合成磷脂，由于磷脂具有两亲性既有亲水性又有亲脂性，分散在水中可以形成双分子层结构，利用该性质发展了一种新技术-脂质体。近年来脂质体作为靶向给药系统新剂型，在制剂新技术研究中受到广泛关注。由于天然磷脂具有易氧化、不稳定的缺点，使得合成磷脂在脂质体研究和应用中起着重要作用。合成磷脂中应用最多的是磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱，全世界只有几家

5、可以进行生产，目前国内尚未实现这些品种的产业化。文献【1-3】报道的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺的合成路线是以的D-甘露醇为起始原料，经过丙叉保护、氧化还原、苄基保护、水解、酯化、脱苄、磷酰化等多步反 基金项目名称：石家庄市科技支撑计划项目（编号08120253A）应生成目标化合物，我们在参考此文献的基础上，对工艺条件进行了优化，其中在苄基化反应中用无机碱替代了强碱，使后处理更为简单，同时生成的产物不需精馏，可直接用于下一步；在酯化反应中用毒性较小的二氯甲烷换掉了目前已经限制使用的致癌溶剂四氯化碳，比较适合工业化生产；在氢化反应中，我们通过控制温度、时间及压力，避免了异构体的生成；在磷酰化反应中，我们

6、通过优化影响因素将文献【4】中三、四步反应缩短为两步，简化了步骤，降低了成本。改进后的路线工艺稳定，原材料及试剂廉价易得，适合产业化生产。具体合成路线见图1。图1 目标化合物的合成路线Fig.1 synthesis route of title compound1 仪器与材料 X-4型数字显微熔点测定仪，WZZ-2A型自动旋光仪，AC300型核磁共振仪（内标TMS，溶剂CDCI3），所用试剂均为工业级2 合成路线2.1 1,2,5,6-异亚丙基-D-甘露醇（3）的合成500ml丙酮中加入氯化锌（100g，0.73mol），回流30min，加入D-甘露醇（50g，0.27mol）反应2h，然后加

7、200ml饱和氯化钠溶液，200ml氯仿萃取2次，合并后加入5%的氨水400ml洗涤，加无水硫酸镁干燥，过滤、浓缩后得白色固体（49g，68.1%。），mp115-1170C（文献值117-1190C）。2.2 异亚丙基甘油醇（4）的合成在2700ml水中加入高碘酸钠（89.9g，0.42mol），溶清后加氢氧化锂调PH值到6，将3（36g，0.14mol)溶于160ml甲醇，将甲醇溶液滴加至上述水溶液中，温度控制在00C，反应2h，再加入8100ml甲醇，过滤，滤液中加硼氢化钠(42.3g，1.12mol)， 00C反应50min，1500ml氯仿萃取3次，无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸馏浓缩

8、后得到无色液体（28.9g，80.3%），bp10mm 77-790C（文献值77-780C）。2.3 3-苄基甘油醇（5）的合成在400ml甲基乙基亚砜溶液中加入4(16g，0.12mol)、氢氧化钾(13.4g，0.24mol)、氯化苄（38g，0.3mol），室温反应4.5，加160ml纯净水，加160ml甲基叔丁基醚萃取，浓缩后得到的液体加200ml甲醇，3N的盐酸100ml加热回流0.5h，65ml石油醚萃取1次，65ml乙酸乙酯萃取2次，无水硫酸镁干燥，浓缩得到无色液体4（17.8g，80.9）,bp1mm 145-1470C（文献值145-1460C）。2.4 3苄基-1,2二硬

9、脂酰甘油（6）的合成将5（12g，0.06mol）、硬脂酸（45.4g，0.16mol)、二环己基碳二亚胺（15.2g，0.12mol)、4-二甲胺基吡啶（0.32g，0.002mol)溶于360ml二氯甲烷中，控温300C搅拌1.5h，过滤，滤液浓缩得白色固体，乙醇重结晶后得白色粉末5（31.2g，66.4），mp50-50.50C（文献：50-510C）。2.5 1,2-二硬脂酰甘油（7）的合成800ml四氢呋喃中加入6（20g，0.03mol)， 10%钯碳（2g），压力为2.5MPa,控温600C反应时间8 h，置换后，过滤钯碳，滤液浓缩得到白色粉末6，（16.8g，96）。mp74-

10、74.50C（文献：74.5-750C）。2.6 1,2-二硬脂酰甘油磷脂酰乙醇胺（1）的合成150ml四氢呋喃中加入7（10g，0.02mol)、三氯氧磷(5.3g，0.03mol)、13ml三乙胺，控温350C搅拌2h，过滤，滤液浓缩后再加入80ml四氢呋喃，乙醇胺(2.45g，0.04mol)和10ml三乙胺，控温度200C，反应15min，过滤，滤液浓缩得白色固体。正己烷重结晶得到白色粉末1（9.85g，82.3%），M+H+748.1，1H-NMR (CDCI3)：0.87(t，6H，J= 6.7HZ，CH3)，1.26(m，56H，CH3-(CH2)14)，1.57(m，4H，CH

11、3(CH2)14-CH2,)，2.28(m，4H，CO-CH2)，3.36(m，2H，CH2NH)，3.94(m，2H，CH2O-P)，4.17(m，2H，glycerol 3-CH2)，4.39(m，2H，glycerol 1-CH2)，5.20(m，1H，glycerol 2-CH)，7.60（t，1H，NH）REFERENCES1 Eibl H,An improved method for the preparaction of 1,2- isopropylidene-sn-glycerol J. Chem Phys Lipids,1981,28（1）:1-5.2 Eibl H,Woolley P,Synthesis of enantiomerically pure glyceryl esters and ethers.i.methods employing the precursor1,2-isopropylidene-sn-glycerol J. Chem Phys Lipids,1986,41（1）:53-63.3 Eibl H,Mcintyre J O,Fleer E A M,Synthesis of labeled phospholipids