弃G因子鲎试剂进行替硝唑葡萄糖注射液中的细菌内毒素检测

1、    弃G因子鲎试剂进行替硝唑葡萄糖注射液中的细菌内毒素检测        摘要目的:用弃G因子鲎试剂检测替硝唑葡萄糖注射液中的细菌内毒素。方法:以0.4%的替硝唑葡萄糖注射液及其11的稀释液将细菌内毒素工作标准品稀释成1，0.5，0.25，0.125 Eu.ml-1，检测弃G因子鲎试剂的灵敏度。结果：替硝唑葡萄糖注射液及其11的稀释液稀释内毒素后测得鲎试剂的灵敏度分别为1=0.125，S1=0;2=0.25,S2=0。结论:0.4%的替硝唑葡萄糖注射液对弃G因子鲎试剂的灵

2、敏度无干扰，故可用鲎试剂法检测其热原。关键词弃G因子鲎试剂，检测，替硝唑葡萄糖注射液，细菌内毒素Testing the bacterial endotoxin in tinidazole glucose injection with TAL of discard G factorBai Zaixian,Diao Jingji,Zhang xiaowen,et al(Huhhot Railway Centre Hospital,Huhhot 010010)ABSTRACTOBJECTIVE:To test the bacterial endotoxin in tinidazole glucose

3、 injection by tachypleas amebocyte lysate (TAL) of discard G factor.METHODS:Dilute the bacterial endotoxin to 1,0.5,0.25,0.125 EU.ml-1 with 0.4% tinidazole injection in glucose and it's 11 dilution,test the sensitivity of the TAL.RESULTS:The sensitivity was 1=0.125,S1=0,2=0.25,S2=0.CONCLUSIONS:T

4、he tinidazole glucose injection has no affection on the sensitivity of the TAL of discard G factor.KEY WORDSTAL of discard G factor,test,tinidazole injection in glucose,endotoxin of bacterial替硝唑葡萄糖注射液中国药典用家兔法检测其热原。本文用弃G因子鲎试剂对替硝唑葡萄糖注射液中细菌内毒素检测的可行性进行探讨。鲎试剂法检测热原已被各国广泛使用，但在使用过程中有时发现假阳性反应，即非内毒素引起的凝胶反应。此反

5、应是由于某些药物能激活鲎试剂中的G因子活化G因子凝固酶原凝固酶凝固蛋白原凝固蛋白凝胶。弃G因子鲎试剂排除了某些药物激活G因子这一旁路的干扰，使鲎试剂对内毒素发生反应具有专一性。1材料1.1药品与试剂细菌内毒素工作标准品(10 EU/支，厦门鲎试剂厂生产，批号970901)；弃G因子鲎试剂(灵敏度标示值为0.5 EU.ml-1，厦门鲎试剂厂生产，批号970925)；鲎试剂溶解水即超纯水，内毒素含量0.03 EU.ml-1；0.4%替硝唑葡萄糖注射液(由本安天元制药公司生产，批号970926-1)。1.2仪器层流净化台，电热恒温水温箱，型号S 648，经180干热灭菌2 h的10 ml及1 ml注

6、射器。2弃G因子鲎试剂灵敏度复核试验弃G因子鲎试剂灵敏度的标示值b为0.5 EU.ml-1。将细菌内毒素工作标准品用超纯水溶解稀释成浓度为1，0.5，0.25，0.125 EU.ml-1备用。取每一浓度稀释液0.1 ml，加入弃G因子鲎试剂0.1 ml中，每一稀释液平行做4管，置37恒温水浴箱中，保温60 min。实验结果，该批弃G因子鲎试剂的灵敏度c=0.25 EU.ml-1，S=0。c在(0.52)b之间，符合规定1。3样品对弃G因子鲎试剂灵敏度的干扰实验分别用0.4%的替硝唑葡萄糖注射液(取3批)及其11的稀释液；将细菌内毒素工作标准品稀释成浓度为1，0.5，0.25，0.125 EU.

7、ml-1。取每一浓度样品0.1 ml，加入0.1 ml弃G因子鲎试剂中，置37水浴保温箱，保温60 min，每一浓度平行做4管。实验结果表明，样品及样品11的稀释液测得鲎试剂的灵敏度分别为1=0.125，S1=0;2=0.25,S2=0。1和2均在0.5b-2b之间，因此，0.4%的替硝唑葡萄糖注射液对弃G因子鲎试剂的灵敏度没有干扰，故可用鲎试剂法检测其热原。4供试品热原检查取0.4%替硝唑葡萄糖注射液3批，每批取2瓶，每瓶做2管，每管加0.1 ml的供试品和0.1 ml的鲎试剂，然后各做一阳性对照管和阴性对照，置37的恒温水浴箱中，保温60 min。结果表明，3批供试品的热原均符合规定，这与

8、家兔法所得的结果一致。5弃G因子鲎试剂与普通鲎试剂检测替硝唑葡萄糖注射液中细菌内毒素的比较实验取经家兔法检测热原均符合规定的替硝唑葡萄糖注射液5批，分别用弃G因子鲎试剂及普通鲎试剂检测其热原。实验结果，弃G因子鲎试剂组，5批细菌内毒素均显阴性反应，热原符合规定。普通鲎试剂组，4批结果显阴性反应，1批显阳性反应。将此批药再用弃G因子鲎试剂做复核实验，结果细菌内毒素仍显阴性反应，热原符合规定。可见弃G因子鲎试剂较普通鲎试剂检测结果更准确。6讨论供试品的内毒素最大限量L=K.M-1最大稀释倍数D=L.-1(K=5 EU.ml，M=10 ml.kg-1按兔剂量计)。当所用鲎试剂的灵敏度为0.25 EU.ml-1时，D=2，供试品可