检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质课件

1、检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质脂肪和蛋白质检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定原理鉴定原理 本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。原糖存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。还原糖还原糖+斐林试剂斐林试剂（0.01g/ml NaOH+0.05g/ml GuSO4）砖红色沉淀砖红色沉淀选材：梨汁、西瓜汁、冰糖选材：梨汁、西瓜汁、冰糖水浴加热水浴加热检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质1. 1.另取另取1 1支洁净的试管编号（支洁净的试管编号（C C

2、、D D和和E E）备用。）备用。2.2.用量筒量取用量筒量取样品样品3mL3mL，分别注入试管中，分别注入试管中，再滴加再滴加1mL1mL清水。清水。3.3.向试管中加入向试管中加入样品样品4.4.向试管中分别加入向试管中分别加入2mL2mL斐林试剂，隔水加斐林试剂，隔水加热热2min2min，观察并记录溶液颜色的变化情况。，观察并记录溶液颜色的变化情况。实验步骤检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质实验记录实验记录检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质1 1. .利用斐林试剂鉴定麦芽糖等还原性糖利用斐林试剂鉴定麦芽糖等还原性糖时，会产生砖红色的沉淀。利用这一时，会产生砖红色的沉淀。利用这一原理，如何鉴别果

3、实中是否含有还原原理，如何鉴别果实中是否含有还原性糖？性糖？检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定原理鉴定原理 鉴定生物组织中是否含有脂肪，常用鉴定生物组织中是否含有脂肪，常用苏丹苏丹IIIIII染液染液( (或苏丹或苏丹IVIV染液染液). ). 脂肪可被苏丹脂肪可被苏丹IIIIII染液染成橘黄色染液染成橘黄色( (或被或被苏丹苏丹IVIV染液染成红色染液染成红色), ),镜检时可观察到相镜检时可观察到相应颜色的脂肪颗粒应颜色的脂肪颗粒. .检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质实验用具实验用具推荐器材推荐器材 刀片，载玻片刀片，载玻片, ,盖玻片，毛笔盖玻片，毛笔, ,吸

4、水纸吸水纸, ,显微镜显微镜, ,等。等。实验材料实验材料 花生种子、花生种子匀浆等富含蛋花生种子、花生种子匀浆等富含蛋脂肪的材料。脂肪的材料。检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质方法步骤方法步骤1. 1.取材：取取材：取1 1粒浸泡过的花生种子，去掉种皮。粒浸泡过的花生种子，去掉种皮。2.2.切片：用刀片在花生种子子叶的横断面上切片：用刀片在花生种子子叶的横断面上平行切下薄片，放入盛有清水的培养皿中平行切下薄片，放入盛有清水的培养皿中备用。备用。（注意安全！）（注意安全！）检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质方法步骤方法步骤3.3.制片：制片：（1 1）选取最薄的绿片置于载玻片中央；）选取最薄的绿片置于

5、载玻片中央；（2 2）在薄片上滴）在薄片上滴2-32-3滴滴苏丹苏丹IIIIII染液，染色染液，染色3 3分钟分钟；（3 3）用吸水纸吸去染液，再滴加）用吸水纸吸去染液，再滴加1-21-2滴滴50%50%的酒精的酒精（作用？）。（作用？）。（4 4）吸去周围酒精，滴）吸去周围酒精，滴1 1滴蒸馏水，盖上盖滴蒸馏水，盖上盖玻片。玻片。检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质方法步骤方法步骤4.4.观察：观察：（1 1）低倍镜观察：找到花生子叶最薄处，）低倍镜观察：找到花生子叶最薄处，移至视野中央；移至视野中央；（2 2）高倍镜观察：查看是否有橘黄色颗粒。）高倍镜观察：查看是否有橘黄色颗粒。检测生物组织中糖

6、类脂肪和蛋白质检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定原理鉴定原理 鉴定生物组织中是否含有蛋白质，常鉴定生物组织中是否含有蛋白质，常用双缩脲法，使用的是用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂双缩脲试剂。 在碱性溶液在碱性溶液NaOHNaOH中，双缩脲中，双缩脲（H H2 2NOC-NH-CONHNOC-NH-CONH2 2）能与）能与CuCu2+2+ 作用，作用，形成紫色或紫色的络合物，这个反应叫形成紫色或紫色的络合物，这个反应叫双双缩脲反应缩脲反应。 由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反

7、应，从而用来鉴定蛋白脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。质的存在。检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质实验用具实验用具推荐器材推荐器材 刀片，试管，试管架，试管夹，大刀片，试管，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，等。等。实验材料实验材料 鸡卵清蛋白，牛奶，豆浆等富含蛋鸡卵清蛋白，牛奶，豆浆等富含蛋白质的材料。白质的材料。检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质方法步骤方法步骤1. 1.取取2 2支洁净的试管，编号备用。支洁净的试管，编号备用。2.2.分别配制分别配制0.1g/mL0.1g/mL的的NaOHNaOH溶液和溶液和0.01g/mL0.01g/

8、mL的的CuSOCuSO4 4溶液，在试剂瓶上标明溶液，在试剂瓶上标明试剂名称备用。双缩脲试剂由这两种溶液试剂名称备用。双缩脲试剂由这两种溶液配制而成。配制而成。3.3.将实验材料和生物组织研磨液等稀释后，将实验材料和生物组织研磨液等稀释后，各取各取2mL 2mL 加入编号的试管中。加入编号的试管中。检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质方法步骤方法步骤4.4.向各试管中加入向各试管中加入 NaOHNaOH溶液，轻轻振荡试溶液，轻轻振荡试管，摇匀。观察试管中物质的颜色变化。管，摇匀。观察试管中物质的颜色变化。5.5.再向各试管中加入再向各试管中加入3 34 4滴滴CuSOCuSO4 4溶液，轻溶液，轻轻振荡，摇匀。观察试管中物质的颜色变