组织学与胚胎学-绪论

1、组织学与胚胎学-绪论组织学组织学与胚胎学与胚胎学 Histology and Embryology第第1 1章章 绪绪 论论重点：组织学的定义重点：组织学的定义 人体的基本组织人体的基本组织 石蜡切片术石蜡切片术 HE染色染色考试模式考试模式v实验考试：实验考试：2020分分 v期中考试：期中考试：2020分分 100100分分v期末考试：期末考试：6060分分第第1 1章章 绪绪 论论一、组织学研究内容一、组织学研究内容组织学（组织学（histology）：）： -研究机体微细结构及其相关功能的科学研究机体微细结构及其相关功能的科学机体机体细胞、组织、器官、系统细胞、组织、器官、系统方法方法

2、利用利用显微镜显微镜观察观察组织切片组织切片构成人体的基本组织有四大类构成人体的基本组织有四大类 上皮组织上皮组织神经组织神经组织肌组织肌组织结缔组织结缔组织器官是由不同的组织发育分化而成器官是由不同的组织发育分化而成上皮组织上皮组织肌组织肌组织结缔组织结缔组织神经组织神经组织研究内容研究内容 细细 胞胞 （cell）细胞间质细胞间质 组组 织织(tissue)上皮组织上皮组织 (epithelial tissue)结缔组织结缔组织 (connective tissue)肌肉组织肌肉组织 (muscle tissue)神经组织神经组织 (nerve tissue)器官、系统器官、系统细细 胞胞

3、细胞膜细胞膜细胞质细胞质细胞核细胞核线粒体线粒体内质网内质网核糖体核糖体高尔基复合体高尔基复合体溶酶体溶酶体微体微体中心体中心体细胞骨架细胞骨架糖元糖元脂滴脂滴色素色素常染色质常染色质异染色质异染色质核膜核膜-核孔核孔核仁核仁核基质核基质染色质染色质细胞器细胞器细胞基质细胞基质包涵物包涵物核被膜核被膜染色质染色质核核 仁仁核基质核基质细细 胞胞 核核核外膜核外膜 核周隙核周隙核内膜核内膜核孔核孔核质侧核质侧核纤层（支架）核纤层（支架）核液核液核骨架核骨架细丝细丝颗粒颗粒相随染色质相随染色质常染色质常染色质功能活跃功能活跃异染色质异染色质功能静止功能静止遗传物质遗传物质DNA和组蛋白在细胞间期的

4、形态和组蛋白在细胞间期的形态胚胎学胚胎学（ Embryology）是研究生物个是研究生物个体发生、发育、发展及其机理的科学。体发生、发育、发展及其机理的科学。二、组织学常用研究技术（一）一般光学显微镜技术（一）一般光学显微镜技术（简称光镜简称光镜 light microscopy, LM ） 分辨率为分辨率为0.2 m 可将组织放大可将组织放大15001500倍左右。倍左右。 显微镜的构造显微镜的构造目镜目镜物镜物镜载物台载物台粗细调粗细调节螺旋节螺旋光源光源聚光器聚光器镜臂镜臂镜座镜座 显微镜镜下观察组织，必须显微镜镜下观察组织，必须制作成组织标本制作成组织标本载玻片载玻片组织标本组织标本盖

5、玻片盖玻片标签标签石蜡切片：石蜡切片：取材取材固定固定脱水透明脱水透明浸蜡包埋浸蜡包埋切片切片 染色染色 封片封片最常用的染色方法是：最常用的染色方法是：苏木精苏木精- -伊红染色（伊红染色（ HE染色染色）w 苏木精苏木精（hematoxylin)： 碱性染料，能将细胞核染成蓝紫色。碱性染料，能将细胞核染成蓝紫色。 w 伊红伊红(eosin)： 酸性染料，能将细胞质染成红色。酸性染料，能将细胞质染成红色。组织结构的嗜色性组织结构的嗜色性嗜碱性：嗜碱性：对于碱性染料亲和力强的性质。对于碱性染料亲和力强的性质。 可被苏木精染成蓝紫色。可被苏木精染成蓝紫色。嗜酸性：嗜酸性：对于酸性染料亲和力强的性

6、质。对于酸性染料亲和力强的性质。 可被伊红染成红色。可被伊红染成红色。中中 性：性：对于两种燃料亲和力对于两种燃料亲和力 都不强的性质。都不强的性质。 HE染色着色淡。染色着色淡。HE染色染色其他染色：其他染色： 硝酸银染色：硝酸银染色：组织经硝酸银处理，呈棕黑色，组织经硝酸银处理，呈棕黑色，主要用于神经组织和内分泌细胞研究主要用于神经组织和内分泌细胞研究重铬酸盐染色法重铬酸盐染色法异染性异染性 ： 肥大细胞中的颗粒经甲苯胺蓝等蓝色染料染色肥大细胞中的颗粒经甲苯胺蓝等蓝色染料染色 后，后，呈紫红色，称为异染性。呈紫红色，称为异染性。v其他常用的制片方法 冰冻切片冰冻切片涂片、铺片涂片、铺片 磨

7、片磨片v其它光学显微镜技术:荧光显微镜荧光显微镜相差显微镜相差显微镜暗视野显微镜暗视野显微镜激光扫描共聚焦显微镜激光扫描共聚焦显微镜（二（二）电镜技术）电镜技术（electron microscope EM，简称电镜简称电镜 ） 以电子束代替光源，以磁场代替透镜，进行聚集和放大，以电子束代替光源，以磁场代替透镜，进行聚集和放大，最后将物体的影象投射到荧光屏或照相底片上。最后将物体的影象投射到荧光屏或照相底片上。 分辨率为分辨率为0.2nm0.2nm 可将物体放大几千到几十万倍。可将物体放大几千到几十万倍。 分辨率人眼0.2 mm普通光镜0.2 m透射电镜0.10.2 nm扫描电镜2.5 nm

8、v透射电镜术透射电镜术 （transmission electron microscopy, TEM） 观察组织细胞的内部结构观察组织细胞的内部结构v扫描电镜术扫描电镜术 （scanning electron microscopy, SEM） 观察组织细胞表面的立体结构观察组织细胞表面的立体结构v冰冻蚀刻冰冻蚀刻 （freeze etching method） 观察细胞断裂表面的形态结构观察细胞断裂表面的形态结构v分析电镜分析电镜 X-射线显微分析术射线显微分析术（analytical electron micro-scope） 研究细胞、组织内元素种类分布和含量研究细胞、组织内元素种类分布和

9、含量TEM，浆细胞浆细胞 SEM ，纤毛，纤毛 SEM ，微绒毛，微绒毛1.电子密度高电子密度高（electron dense） 电子束投射到密度大的样品，电电子束投射到密度大的样品，电子散射多，投射到荧光屏上的电子少子散射多，投射到荧光屏上的电子少而呈暗像，电镜照片上则呈黑色，称而呈暗像，电镜照片上则呈黑色，称电子密度高。电子密度高。2.电子密度低（电子密度低（electron lucent） 反之，称电子密度低。反之，称电子密度低。透射电子显微镜（三）、组织化学和细胞化学技术（三）、组织化学和细胞化学技术 糖类显示法糖类显示法PAS反应：过碘酸反应：过碘酸Schiff反应，简称反应，简称P

10、AS反应（反应（periodic acid Schiff reaction） 检测组织活细胞中有无多糖存在。检测组织活细胞中有无多糖存在。原理：原理： 酶类显示法酶类显示法 脂类显示法脂类显示法 核酸显示法核酸显示法多糖多糖醛醛紫红色沉淀紫红色沉淀氧化氧化试剂试剂PASchiffPAS反应，小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒反应，小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒 利用抗原（利用抗原（antigen, Ag），抗体（），抗体（antibody）特异）特异 结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。辣根过氧化物酶标记荧光素标记（五）、（五）、原位杂交技术原位杂交

11、技术（in situ hybridization）v 特异性核酸组织化学术检测基因（特异性核酸组织化学术检测基因（DNA片段）的有无、及在转片段）的有无、及在转录水平检测基因的活性录水平检测基因的活性(mRNA)。v原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量的显示而获知待测核酸的有无及相对量v常用标记物有放射性核素和地高辛常用标记物有放射性核素和地高辛（六）、（六）、细胞培养细胞培养实验中的组织工程耳实验中的组织工程耳三、组织胚胎学在基础医学中的地位三、组织胚胎学在基础医学中的地位v组织学组织学= =显微解剖学显微解剖学 大体 to 微细v不同组织的功能不同组织的功能 生理学（physiology）v正常与异常正常与异常 病理学(pathology)v临床课的基础临床课的基础 For a good doctor needed in future 四、组织学的学习方法四、组织学的学习方法1.1.尽可能多地观察切片、插图、图谱、网上图尽可能多地观察切片、插图、图谱、网上图库等。注意观察角度、倍