缺血预处理对犬肺移植供肺的保护作用

1、    缺血预处理对犬肺移植供肺的保护作用        摘要采用犬异体肺移植模型，评价缺血预处理(供体肺门阻断10分钟，开放15分钟)对肺缺血再灌注损伤的保护作用。结果预处理组在移植后肺静脉血和肺组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、氧自由基最终产物丙二醛(MDA)的含量改变与对照组比较，差异有显著性。提示肺缺血预处理抑制了肺缺血再灌注后氧自由基的产生，增强肺组织细胞抗氧化能力。结果还显示预处理组移植肺有较好的氧合能力。表明肺缺血预处理结合低温Euro-Collins液灌洗对供

2、肺有较好的保护效果。关键词狗肺/移植血液灌注创伤和损伤 Protective effects of ischemic precondition on graft lung in canineJiang Haihe, Chen Shengxi, Luo Wanjun, et al. Department of Thoracic and Cardiac Surgery, Xiangya Hospital, Hu' nan Medical University, Changsha 410008AbstractUsing canine lung transplantation model, t

3、he protective effects of ischemic precondition on ischemic reperfusion lung injury were investigated. Twelve adult donor canines were randomly divided into control group (n=6) and ischemic precondition group (n=6). The donor left lung hilum in ischemic precondition group was subsequently clamped for

4、 10 min, and then released for 15 min, but not in control group. After being preserved in 4 modified Euro-Collins solution, the donor lung was transplanted into the left chest of allograft recipients. The results showed that, as compared with control group, the content changes in superoxide dismutas

5、e (SOD) and malondialdehyde (MDA) were significant in statistics 2 h after transplantation. It was suggested that lung ischemic precondition might increase endogenous anti-oxidative ability, and inhibit the production of oxygen free radical following ischemic reperfusion. It was also demonstrated th

6、at ischemic precondition combined with cold Euro-Collins solution exerted an evidently protective effect on graft lung from canine donor. Key wordsDogs Lung/transplantation Hemoperfusion Wounds and injuries近年来认为缺血预处理对心肌等器官有明显的保护作用。本研究采用缺血预处理的方法结合低温灌洗来评价其在犬肺移植中对供肺的保护效果。材料与方法一、材料： 1. 动物：健康成年雌性杂种犬24只(本

7、院动物实验室提供)，体重912kg。随机分为对照组和实验组，每组12只，其中6只为供体犬，另6只为受体犬。供体与受体按体重大小配对。2. 试剂及仪器：超氧化物歧化酶购自中国科学院上海试剂厂，黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶购自Sigma公司，美国LOVA3型血气分析仪、麻醉机等。二、实验步骤：1. 供体肺采取：戊巴比妥肌肉注射麻醉(30mg/kg)，气管内插管接呼吸机控制呼吸。正中切口进胸，经右心房注射肝素(3mg/kg)，左肺门过带，实验组阻断左肺门10分钟(即缺血预处理)，开放15分钟(再灌注)，对照组仅阻断30秒(假缺血)，开放后观察25分钟以保持与实验组时间上和操作上的一致。经主肺动脉插管，以46

8、 Euro-Collins液灌洗，总量为100ml/kg，灌洗压力为3.334.00kPa。双肺灌洗后，用纯氧膨肺后夹闭气管，将心肺完整切取。4灌洗液中修整出左肺，待移植。2. 受体手术：麻醉同供体，维持用芬太尼。手术失血由从供体犬采集的血补充，体温用热水袋保持在3436。左侧开胸，受体左肺切除后将供肺从保存液中取出，依次吻合肺静脉、左主支气管和左肺动脉，开放阻断钳排气，恢复供肺的血流和通气。待供肺完全膨胀后， 维持与移植相同的通气条件，将左胸切口关闭，观察2小时。三、观察指标：(1)血气分析：在供体肺切除前、移植后1小时和2小时抽左下肺静脉血做血气分析；(2)供体肺阻断肺门前(正常值)及移植

9、后2小时取左下肺静脉血测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)；(3)移植后2小时即切下移植肺，取小块肺组织制成组织匀浆作SOD和MDA测定。±s表示，组间比较采用t检验，组内前后比较用方差分析。结果一、一般结果：两组动物均维持至实验结束，血流动力学维持稳定。在体重、手术时间、供肺缺血时间上两组的差异均无显著性。二、血气分析：两组左肺静脉血氧分压的基础值无差异(见附表)。实验组供肺再灌注后1小时和2小时，肺静脉血氧分压值均无显著降低，维持与基础值相当的水平，而对照组下降显著(P0.05)，提示实验组供肺氧合功能优于对照组。附表两组移植后左肺静脉血氧分压(kPa)组别n左肺静脉血氧

10、分压移植前移植后1小时移植后2小时对照组662.24±3.8742.69±12.9032.72±8.78预处理组661.18±5.4755.20±9.8454.93±17.29P值0.050.050.05     三、肺静脉血中SOD、MDA值：两个组肺移植后与移植前相比，SOD和MDA均升高(P0.05)。移植后2小时，对照组和实验组的SOD分别为121.5±14.9U/L和142.7±17.3U/L(P0.01)，MDA分别为4.35±0.34mol/L和3.8

11、1±0.46mol/L(P0.05)。 四、肺组织中SOD、MDA的测定：移植后实验组肺组织中SOD含量较对照组明显升高(61.4±5.6U/L，31.6±2.7U/L，P0.01)，而MDA含量较对照组有明显下降(4.77±0.63mol/L，6.01±0.92mol/L，P0.05)。讨论近几年来，利用机体组织细胞本身的抗损伤能力和耐受性以提高抗损伤能力和治疗疾病的这一观点，日益受到人们的关注。1986年Murry首次提出预处理概念，开辟了内源性心肌保护的新途径，其保护效果得到了大量动物实验和少数临床研究的验证1，2。早先，我们对缺血预处理

12、对在体兔肺低温缺血再灌注损伤的作用进行了探讨，发现肺缺血预处理能改善缺血后的肺氧合功能，减轻缺血再灌注损伤所致的毛细血管通透性增加3。大量实验证明，肺缺血再灌注产生了氧自由基，损伤肺组织细胞3。本实验亦证实供肺移植后，肺静脉血的SOD和MDA含量升高，通过缺血预处理后，其SOD含量的升高更明显，MDA的升高较对照组低些，肺组织中二者的变化亦类似，说明缺血预处理抑制了肺缺血再灌注后氧自由基的产生和降低了脂质过氧化，可能与减少肺组织和肺泡中的细胞渗出及增强肺组织细胞抗氧化能力有关。作者单位： 410008长沙， 湖南医科大学附属湘雅医院心胸外科参考文献1Murry CE, Jenings RB, Reimer KA, et al. Preconditioning with ischemia: a delay of lethal cell injury in ischemic myocardium. Circulation, 1986, 74:1124-1126.2Hoshida S, Kuzuya T, Fuji H, et al. Ischemic preconditioning af