细胞保护 反相高效液相色谱 多肽的固相合成 动物实验论文_第1页
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文档简介

1、 细胞保护论文:修复多肽中试生产工艺及初步动物试验研究【中文摘要】修复多肽是由十五个氨基酸残基组成的小分子多肽,具有细胞保护功能。本课题拟通过修复多肽实验室合成纯化工艺的研究,建立中试规模的修复多肽合成纯化生产工艺,为此类新药的创制研发提供技术基础。方法:运用Fmoc-固相多肽合成原理对修复多肽进行实验室小样合成,进行粗品的纯化与程序放大研究,运用高效液相色谱法与质谱法对结果进行分析;依据实验室研究结果,对修复多肽的合成纯化生产工艺程序扩大化,通过对三批中试产品的分析,确立中试规摸修复多肽的合成纯化生产工艺;通过建立大鼠皮肤烫伤模型,观察修复多肽的细胞保护功能。结果:确立了实验室合成修复多肽的

2、条件:固相载体采取王氏树脂;催化剂采用DMAP/HOBT,溶剂和清洗剂采用DMF,切割剂采用TFA/H2O。合成结果显示修复多肽粗品纯度可达78%。确定修复多肽实验室研究纯化分析方法为高效液相色谱法,二元梯度洗脱流动相采用水-乙腈,离子对为0.1%三氟乙酸。色谱条件具体如下:采用C18反相色谱柱,20*250mm,紫外检测波长为215nm,以0.1%三氟乙酸的水溶液作为流动相A,以0.1%三氟乙酸的乙腈溶液作为流动相B,流速为10ml/min;通过中试工艺获得的三.【英文摘要】Aims:Repair polypeptide (RP) is a micro molecule peptide co

3、mposed of 15 amino acid residues, and has the ability of cytoprotection. In this paper, we groped the technique for synthesis and purification of repair polypeptide in laboratory and the optimized technique laid a foundation for immunization research and application as new drugs.Methods:Repair pepti

4、de was synthesized in samll-scale by Fmoc-solid phase peptide synthesis method and the crude products were purified and identified by high-performanc.【关键词】细胞保护 反相高效液相色谱 多肽的固相合成 动物实验【英文关键词】cytoprotection RP-HPLC Solid-Phase Synthesis animal experiment【目录】修复多肽中试生产工艺及初步动物试验研究摘要3-4Abstract4第一章 文献综述8-201

5、.1 细胞保护概述8-10 细胞保护的概念及种类8 细胞保护的分类8-9 细胞保护与多肽的研究9-101.2 多肽类药物10-14 多肽类药物种类及特点10-12 多肽类药物研究现状及进展12-141.3 多肽的固相合成14-161.4 高效液相色谱161.5 质谱分析16-171.6 冷冻干燥技术17-181.7 动物实验相关问题18-19 创伤愈合研究的动物模型18 动物实验的检测指标18-191.8 研究意义和内容19-20 研究意义19 研究内容19-20第二章 修复多肽的实验室研究20-382.1 仪器与试剂20-21 仪器20 试剂20-212.2 试验方法21-23 修复多肽的实

6、验室小样合成21 修复多肽粗品的纯化研究21-22 修复多肽实验室放大研究22-232.3 结果与讨论23-36 实验室合成多肽粗品小样的分析23-26 实验室合成多肽粗品分离纯化分析26-33 修复多肽实验室放大合成样品分析33-362.4 小结36-38第三章 修复多肽的中试研究38-463.1 试验仪器与试验试剂38-39 试验仪器38 试验试剂38-393.2 试验内容及方法39-40 多肽中试合成工艺流程39 多肽中试纯化工艺流程39-40 修复多肽中试研究的试验操作403.3 试验结果及讨论40-45 批次2010060140-42 批次2010070142-43 批次2010080143-45 三批中试试验结果统计分析453.4 小结45-46第四章 动物实验46-534.1 材料和方法46 试验药品46 试验动物46 试验仪器464.2 试验方法及操作46-48 动物模型的制备46 动物分组46-484.3 试验结果及讨论48-52 对创面愈合速度的影响48-51 对残留创面直径和创面表层肉芽

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