四君子汤对脾虚鼠脾细胞DNA合成的影响

1、    四君子汤对脾虚鼠脾细胞DNA合成的影响        关键词:四君子汤脾虚鼠脾细胞DNA四君子汤出自宋太平惠民和剂局方，由人参、白术、茯苓、甘草等组成，现代药理研究证实它具有多方面的作用。本文旨在研究四君子汤对脾虚鼠脾细胞DNA合成的影响。1材料和方法1.1动物模型建立，将36只BALB/C小鼠随机分为3组，每组12只，正常组(Controls)皮下注射生理盐水0.2ml/只/日，同时灌服蒸馏水0?25ml/只/日；脾虚组(MMSA)皮下注射利血平0.3mg/kg/日

2、，并灌服蒸馏水0.25ml/只/日；四君子汤治疗组(MTS)：皮下注射利血平0.3mg/kg/日，并灌服四君子汤煎液0.25mg/只/日，含生药1g。于第6日始，脾虚组小鼠出现稀便、食量减少、少动、毛色无光等症状。于第12日，脾虚小鼠稀便、少动、体重减轻等脾虚诸症加重，而治疗组和正常组均无此表现。1.2H3TdR掺入小鼠脾细胞DNA试验分别于给药第7日和第13日处死小鼠，无菌取脾，按常规取脾细胞，计数后按2×106/ml培养基、H3TdR的培养液中37培养6h，取出后置4冰箱终止反应。采取多头细胞器收集细胞，于液闪仪测放射性计数cpm值。1.3四君子汤对小鼠脾细胞DNA合成作用的体外

3、实验按上法常规制备脾虚鼠淋巴细胞悬液，计数活细胞数>95，调细胞浓度为2×106/ml，取100l悬于完全培养液中淋巴细胞悬液加入96孔培养板各孔中，并分别加入四君子汤煎液(经煎煮后离心3000r/min×20min，过滤除菌)，终浓度分别为25mg/ml,50mg/ml,100mg/ml,200mg/ml，并设不加药液的阴性对照孔，于48h后，对各浓度培养孔淋巴细胞进行活力检测，计数活细胞大于95，表明药物无细胞毒作用，于各孔中加入浓度为100ci/mlH3TdR50ml，再培养6h后收集细胞，于液闪仪测放射性计数CPM值。2结果Tab1 Effect of SiJ

4、unZi decotum on the spleen DNA in MMSA(X± SD) GroupnCPM7d13dNormals12920±1681068±131MMSA12673±212354±126MISD12889±1571324±208P<0.05p<0.01 compared with the normals P<0.01 compred with the MTSDTab2 Effect of sijunzi decoctum on the spleen DNA in MMSA in vit

5、ro(X±SD) SiJunZi decoctum(mg/ml)nExperimented group(cpm)081708±4762582346±5215083062±48310084537±67920084628±712 P<0.01 Compared with the blank control group3讨论3.1本实验结果表明，四君子汤对小鼠体内脾细胞DNA合成具有促进作用。第7天时，脾虚组脾细胞DNA合成少于正常组和四君子汤治疗组P<0.05，四君子汤治疗组虽cpm数值小于正常组，但P>0.05，无显著

6、差别。第13天时，脾虚组脾细胞DNA合成明显低于正常组和四君子汤治疗组，P<0.01，而四君子汤通过其益气健脾作用，不仅可改善脾细胞DNA合成的减少，还可极大地提高其脾细胞合成DNA的能力，表现为极其活跃的功能态。3.2四君子汤对脾虚模型脾细胞DNA合成的体外作用表明，表中各浓度组(25mg/ml、50mg/ml、100mg/ml、200mg/ml)对脾细胞DNA合成有明显的增强作用，随着浓度的增加，其作用越大，当浓度为100mg/ml时，作用强度最大，100mg/ml和200mg/ml两浓度的作用强度间无明显差异。表明在体外四君子汤可促进脾细胞DNA的合成。3.3中医重视整体观念，人体是有机的整体，结构上不可分割功能上互相协调，病理上互相影响。四君子汤以人参为主药，健脾益气，白术、茯苓为辅药，有健脾利湿之功，甘草为使，健脾兼调和诸药。脾虚时存在脾细胞合成DNA减少，促进脾细胞合成DNA是四君子汤健脾益气的机制之一。无论在体内或体外皆可促进脾细胞DNA的合成，从而发挥其健脾益气作用，改善小鼠的脾虚状态为正常状态。国家自然科学基金资助项目No:39270864章梅（第四军医大学西京医院陕西西安710032）夏天（第四军医大学西京医院陕西西安710032）吴少华（第四军医大学西京医院陕西西安710032）张仲海