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文档简介

1、开题报告生物技术大黄鱼a -肌动蛋白基因克隆与序列分析参考文献:1贺淹才.肌动蛋白和肌动蛋白基因的研究进展J生命的化学.2002. 22(3): 248-250, (2胡文革,陈创夫,王远忠等.准喝尔雅罗鱼A肌动蛋白因启动子克隆及序列分析几动物学杂志,2010.45(1): 18-26.3 Monserral L. Hcrmida-Prieto M. Fernandez X. et al. Mutation in the alpha-cardiac actin gene associatedwith apical hypertrophic cardiomyopathy. left ventri

2、cular non-compaciion. and scplal dcfcclsJ EurHeart J 2007. 28(16): 1953-196L(4 Gerald K Cell Biology, 2nd edition M McGraw-Hill Book Company. 1984.李明云,张海琪,钟爱华.大黄鱼基因组DNA的提取及JtRAPD分析条件的探索卩科技通报,2002. 18 (5): 368- 373.峦明云,陈炯,张祖兴等.大黄鱼Psendoseiaena转铁蛋白(Tf)基因克隆及序列分析J.海洋与沼泽,2007, 38(6): 563-568.78唐伟,谭海东,张素芳

3、等.斯达氏汕脂酵母肌动蛋白基因克隆及序列分析J生物技术通报.2009. 280-283.李兴平,唐国勇等.运动对卄骼肌肌动蛋白的影响研究评述卩吉首人学学报2007. 28(6):113-115.纪玲,杨林.武延格等.应用免疫组织化学SJOO和a肌动蛋白抗原鉴定组织工程软thJ.中国组织工程研究与临床康复,2007.28(6): 113-115,10 Bookwaiter CS, Trybus KM. Functional consequences of a mutation in an expressed humanalpha-cardiac actin at a site implicate

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6、ionsJ Basic Res Cardiol, 2000.96: 106-113.(15姜红塑.心脏肌动蛋白基因与心脏疾病的相关研究进展J中国实用儿科杂志,2010. 25(4):309-3 JL16 Olson TM. Doan TP. Kishimoto NY. et aL Inherited and denovo mutations in the cardiac actin genecause hypertrophic cardiomyopathyJ. J Mol Cell Cardioh 2000. 32(9): 1687-1694.(17 Matsson H. Eason J. B

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8、选题的背景与意义大黄鱼(Lxtrimichtbys croeea)属石首鱼科,黄鱼属,也称黄鱼、大鲜、大黄花等,为暖温性近海中下层群体性泪游鱼类。其肉质细腻,味道鲜美9营养丰富,肌肉蛋口质中a含多种氨基酸,是当今人类较为理想的动物蛋0源。此外,大黄鱼还有很高的药用价值,其耳石有清热去瘀、通淋利尿的作用,膘有润肺健脾、补气止血作用,胆有清热解 毒功能。但是近年来山于捕捞强度过大,野生大黄鱼已经很难捕获。随着大黄鱼人工育 苗技术的成熟和完善,海水网箱养殖大黄鱼技术迅速发展。山于多年的全人工累代繁育 与养殖,造成了大黄鱼种质严重退化。一些问题例如性早熟、品质退化、生长速率变慢 等制约了大黄鱼养殖的健

9、康发展,因此加强大黄鱼基础生物学方面的研究已迫在眉睫。肌动蛋口(Mtin)是细胞骨架的重要组成部分,肌肉细胞的一个重要的收缩蛋口,参 与细胞发育进程的多个方面,包括细胞运动、新陈代谢、有丝分裂、肌肉收缩等,家 族根据氨基酸序列的不同可分为6种类型,包括2种细胞质actin (卩型和丫型),2种横纹 肌型a-actin»即骨骼肌a-actin心脏a-actin和2种平滑肌actin*即ct-血管平滑肌型、y- 型内脏平滑肌型。而大黄鱼肌肉中的是属于横纹肌一肌动蛋0,也称骨骼肌*肌动蛋白, *肌动蛋白普遍存在于真核生物中,*肌动蛋白是一种具有2个亚基的蛋口质,是其主要 作用是将肌动蛋白微

10、丝锚定在肌节Z线上,所以表达的增加无疑能提高运动的强度,该 基因是一种在进化中高度保疗的蛋白质,所以g肌动蛋白基因可以很好的被克隆。自Satraud于1942年就从家兔中分离到了骨骼肌的肌动蛋口以来,目前对a肌动蛋口基因研究很多。本实验是以宇波水产大世界大黄鱼的肌肉为材料,并对其*肌动蛋口基因进行克隆 并对其基因序列进行生物信息学方面的分析可得到a肌动蛋白基因相关的一些功能结 构,近年来,人们发现肌动蛋白在鱼类肌肉中有重要的作用。因此,研究大黄鱼的肌动 蛋白基因,有可能为大黄鱼的育种开辟一条新的途径9并利用大黄鱼作为模型动物研究 人类的疾病和其他领域的应用提供了一定的理论基础。二. 研究的基本内容与拟解决的主要问题: 研究的基本内容;1、cDNA文库构建;2、EST测序;3、获得a肌动蛋0基因全长: 4、*肌动蛋口基因序列与其他鱼类同源性比较;5、氨基酸结构:6、利用Clustal X及MEGA软件构建系统进化树;拟解决的主

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