油红O染色具体操作方法

1、(4(4)自来水冲洗。(5(5)水洗后，移入 70%70%酉精 5 5 秒钟。脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于 水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯 有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹m,苏丹W,苏丹黑及油红0 0 等。脂肪被染 色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏

2、丹染料着色效果最好。根据这一原理，适当提高温度(3737C-60-60C)对组织切 片染色效果是有好处的。脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。、苏丹m(Sudan(Sudanm) )染色法:操作方法:水洗后采用冰冻或石蜡切片。经蒸馏水后，浸染于 HarrisHarris 苏木素 或明矶苏木素中淡染 1-21-2 分钟。(1)固定于 10%10%甲醛的组织。投入苏丹m染液中约 3030 分钟或更长时间，置于 5656C温箱中。在 70%70%酒精中洗涤 5-105-10 秒钟。结果：脂肪呈橙红色或鲜红色或黑色，胆脂素呈淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。试剂

3、配制: 1.1.苏丹m染液配法：将 0.150.15 克苏丹m溶解于 100ml70%100ml70%酒精或纯丙酮和 70%70%酉精混合液中（各 5 5 0ml0ml），临用时过滤，所得滤液即为饱和浓度。注：浸染时，容器必须盖好，否则酒精或丙酮挥发，染料沉淀。2.2.甘油明胶配制:明胶(6(6)(8)洗于蒸馏水中，然后将切片移于载玻片上。(9(9)切片移于玻片上，将切片周围的水分小心擦掉。(10(10)甘油明胶封固。蒸馏水210ml210ml甘油250ml250ml石碳酸结晶5ml5ml40g40g先将明胶浸入蒸馏水中 2 2 小时或更长时间，然后加甘油和石碳酸，加热 1515 分钟，摇搅直

4、至混合 液均匀为止。二、苏丹W(Sudan(SudanIV) )染色法:苏丹W又名猩红，是苏丹m的衍生物，作为脂肪染剂，经各地实验证明，其结果优于苏丹m。其染色步骤与苏丹m染法完全相同，从略。试剂配制: 将 1-21-2 克猩红染剂加纯酒精 70ml70ml, 1010 凉氧化钠 20ml20ml，蒸馏水 10ml10ml，制成混合液，以微火加 热，置3737C温箱中 1 1 小时，取出冷却后过滤，1212 小时后即可使用。如此看来，浪费较大，建议配制 70%70%酒精饱和液，或纯丙酮和 70%70%酒精饱三、油红染色法:试剂配制:油红 0 0异丙醇(含量 98%98%100ml100ml此为

5、油红饱和液，可长期保存备用。染色步骤: (1)(1)冻切片注：此液 5 5 天内失效,和液，它们使用方便,且不易失效。结果：脂肪呈猩红色,比苏丹m更为清晰。油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便，染色结果肯定，并且优于苏丹W。0.5g0.5g(2)(2) 蒸馏水充分洗涤。(3)(3) 油红稀释液染 10-1510-15 分钟，避光、密封。油红稀释液的配制:(4)(4) 取油红饱和液 6 6 毫升，加蒸馏水 4 4 毫升，静置 5-105-10 分钟后过滤后使用。60%60%乙醇镜下分化至间质清晰。水洗。MarryMarry 氏苏木素复染核。(8)(8)水洗。(9)(9)甘油或甘油明胶封片。结果：脂肪呈鲜红色，细胞核呈蓝色，