菘蓝的药理研究及临床应用

1、菘蓝的药理研究及临床应用          菘蓝(Isatis tinctoria L.)为十字花科植物，其根和叶均可入药，干燥根入药称板蓝根，干燥叶入药称为大青叶，板蓝根和大青叶的药性基本相同，有泄火，解毒，凉血等功效，主要分布在华东各省，河南，山西等地1。临床病例研究证明菘蓝可治疗流行性腮腺炎、病毒性肠炎、尖锐湿疣、乙型肝炎、甲型流感病毒、扁平疣等病毒性疾病2。还有报道菘蓝有调节免疫细胞分泌IL-2、TNF- 及提高细胞免疫功能的作用3，还有抗活性氧、抗炎及抗菌作用4,5。因其应用广泛，故有很高的研究

2、价值。现就其化学成分及药理作用，作一简单的概述。   1 化学成分   菘蓝的主要化学成分有：生物碱类物质如靛蓝、靛玉红、靛苷、靛红、腺苷、芥甙、新芥甙、色胺酮、1硫氰酸2羟基3丁烯、黑芥子苷、4，3(H)-喹唑酮。甾醇类物质如谷甾醇、谷甾醇。多种氨基酸如精氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、-氨基丁酸。此外，还有文献报道指出喹唑酮也为菘蓝的有效成分6。   2 药理作用   菘蓝作为传统的清热解毒中药，对它药理的研究发现，它具有抗菌，抗病毒，解热，抗炎，抗肿瘤，增强免疫力等多种作用，是一种有着开发前景的中药。 

3、;  2.1 抗菌作用 菘蓝的水浸液对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草杆菌、八联球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、甲型链球菌、肺炎双球菌、流感杆菌、脑膜炎双球菌均有抑制作用。郑剑玲用不同的方法提取了菘蓝的总浸液、乙醇提取液和正丁醇萃取液，通过对金黄色葡萄球菌、肠炎杆菌和大肠埃希菌的药物敏感试验，试验证实，菘蓝的各级提取物均对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用，对肠炎杆菌和大肠埃希菌的抑菌作用随逐级提取而增强7。   2.2 抗病毒作用 菘蓝作为传统的清热解毒的中药，其抗病毒的作用一直以来作为其主要的功效进行研究。（1）流感病毒：刘盛8用12天胚龄的雏鸡，采用血凝滴法做抗流感

4、病毒的实验，证明菘蓝根部的水提醇沉液对流感病毒在直接作用、治疗作用、预防作用的有效率分别为100、60、70；而菘蓝叶子的水提醇沉液对流感病毒在直接作用、治疗作用、预防作用的有效率分别为87、87、40。胡兴昌9将菘蓝的根部以丙酮脱脂用Tris-HCL缓冲液提取，用兔红细胞做凝集实验，将具有血凝活性的凝集数样品用鸡胚培养法测定抗流感病毒的效果。结果表明，凝集素的血凝效价与其抗流感病毒的作用成正比，即血凝效价愈高，抗流感病毒能力愈强。（2）巨细胞病毒：何超蔓10用菘蓝根部和叶子提取物制成的注射液，稀释后采用细胞病变抑制法和MTT法观察其对巨细胞病毒AD169毒株的抑制作用。实验结果表明都对巨细胞

5、病毒有较强的抑制作用，且随着药物浓度的增高抑制作用增强。（3）柯萨奇病毒：张寰毫11发现用菘蓝根部的水煎剂有直接灭活柯萨奇B组4型病毒的作用；但对阻止病毒吸附作用不明显；对已感染了柯萨奇病毒的细胞也有明显的抑制作用。即菘蓝的水煎剂在细胞水平有明显抑制CB4V的作用。近来研究发现，CVB4是1型胰岛素依赖性糖尿病发病的重要环境诱因，故菘蓝抗CVB4的作用可能有助于进一步研究对1型胰岛素依赖性糖尿病的治疗。李小青12通过小鼠的动物实验发现菘蓝的叶子水煎剂在CVB3感染的早期对小鼠病毒性心肌炎（VMC）的病理改变有显着影响，可能是通过抑制病毒合成，增强白细胞的吞噬作用，降低毛细血管的通透性等作用改善

6、和保护心肌细胞。（4）肾综合征出血热病毒：李闻文13用间接免疫荧光法研究用菘蓝根部提取物制作的针剂对肾综合征出血热病毒（HFRSV）的作用。结果表明，对HFRSV是杀灭作用而非抑制作用，1:100有效，1:1000以上浓度的无效。并进一步用酶免疫组化技术研究菘蓝在体外对HFRSV有杀灭作用。   2.3 对内毒素作用 菘蓝抗内毒素的作用是近来研究的一个热点。刘云海14用被菘蓝作用过的类毒素做家兔热原实验，在电子显微镜下观察结构形态变化，证实确有抗大肠杆菌O111B4内毒素作用。并在进一步的实验15中发现，药物与内毒素之间的凝集反应具有高度的特异性、灵敏性，通常试样中的微量内

7、毒素的存在就可以激活鳌试剂中凝固酶使凝固蛋白原转变为凝固蛋白产生凝集反应，实验说明了菘蓝中确有抗内毒素活性的物质存在。他还在实验中16发现抑制内毒素作用是通过对内毒素刺激机体防御系统释放炎症因子即肿瘤坏死因子（TNF-）及一氧化氮（NO）的抑制，且有剂量的依赖性。汤杰17通过对菘蓝根部用乙醇渗漉提取后依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇加热浸提后得到的提取物，实验发现，可显着降低内毒素性DIC家兔血清的血清脂质过氧化物（LPO）水平，提高超氧化物歧化酶(SOD)活力，提示提取物具有抗脂质过氧化，清除氧自由基的作用，能够拮抗内毒素的生物效应，是发挥抗内毒素活性的物质基础。方建国18通过提取菘蓝叶

8、子的有效部位，发现有能直接中和和降解内毒素，显着降低内毒素的致死性和致热性，具有显着的体外抗内毒素活性的作用。   2.4 对免疫系统的作用 赵红19通过研究菘蓝叶的水煎剂体外对C57小鼠免疫细胞分泌IL-2、TNF-水平的影响，用3H-TdR掺入法测定不同浓度的水煎剂对小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的毒性作用，MTT方法分别检测IL-2、TNF-的生物学活性。结果表明，在0.41.6mg/ml浓度时能促进正常小鼠被ConA诱导的脾淋巴细胞分泌IL-2，未见到对小鼠腹腔分泌TNF-有明显作用。认为菘蓝的水煎剂通过促进淋巴细胞IL-2的分泌，可以在细胞免疫和体液免疫两个方面上调

9、小鼠的免疫功能，同时对巨噬细胞分泌TNF致炎效应和免疫病理损伤无明显影响，故提示在免疫增强的同时没有更多影响白细胞的活动，不造成更严重的病理损伤及功能失调。秦箐20用快速低压干柱柱层析从菘蓝根部中分离出一个低极性流分及一组亚流分，用化学发光法检测对人多形核细胞化学发光的影响。结果表明，菘蓝低极性流分具有双向免疫活性，在低浓度时有激活作用，在高浓度时具有抑制作用；而亚流分的免疫活性并未因为其纯度的提高而相应提高。故说明了菘蓝低极性流分及亚流分含有抗炎成分。   2.5 抗癌作用 菘蓝的提取物具有抗癌作用，在许多学者的研究中被报道。菘蓝中的有效成分靛玉红是抗肿瘤的主要活性物质。

10、采用靛玉红-脂质体，通过对大鼠的体内实验发现，它能降低大鼠细胞膜流动性，DNA聚合酶I的活性比治疗前降低74。侯华新21从菘蓝的根部分离出高级不饱和脂肪组酸，用MTT法测定细胞毒作用，集落形成实验观察对肝癌细胞增殖的抑制作用，PCR-ELISA试剂盒测定细胞的端粒酶活性等方法研究体外抗人肝癌BEL-7402细胞活性。实验结果表明，分离出的高级不饱和脂肪组酸能抑制BEL-7402细胞的增殖，其IC50为0.6mg/ml，有促使肿瘤细胞向正常细胞逆转的趋势，可降低端粒酶活性的表达，具有体外抗肿瘤的活性。韦长元22从菘蓝的根部分离的板蓝根组酸对人耐药肝癌细胞BEL-7404/ADM进行了体外逆转实验

11、，发现无毒剂量的板蓝根组酸活性单体-5b能明显增强化疗药对BEL-7404/ADM细胞的毒作用，且对ADM的耐药逆转倍数可达4.82倍，是一种较好的BEL-7404/ADM细胞的多重耐药的调节剂，并推测它的耐药逆转作用主要是阻滞肿瘤细胞钙离子通道，减少细胞内药物外流，从而增加了耐药细胞对化疗药物的敏感性。梁永红23发现从菘蓝的根部提取脂溶性的提取物板蓝根二酮B有体外抑制肝癌BEL-7402细胞和卵巢癌A2780细胞的能力，抑制作用均与浓度呈梯度关系，且抑制卵巢癌A2780细胞的能力比肝癌BEL-7402细胞强。       

12、     2.6 对单胺氧化酶抑制作用 日本学者Hamaue24提出在欧洲菘蓝中存在的靛红为单胺氧化酶（MAO）的抑制剂，可增加小鼠尿及脑中的去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺（5-HT）的浓度，喂食靛红2h后的小鼠纹状体的乙酰胆碱和多巴胺的水平也显着增高。靛红显着增加Parkinsons病的小鼠纹状体多巴胺水平。认为靛红具有广谱生物活性：抗抑郁，多种酶抑制剂，抗癫痫，苯二氮类受体和ANP受体的抑制剂。   2.7 抗炎作用 卫宗玲25首次报道菘蓝的醇提取物具有抗炎作用。实验发现，菘蓝根部70乙醇提取液对二甲苯所致小鼠耳肿胀和角叉菜胶所致的大鼠足

13、部肿胀有明显的抑制作用，且可抑制大鼠棉球肉芽肿及降低醋酸引起的毛细血管通透性增加。认为菘蓝的提取液急慢性非特异性炎症模型及肉芽肿组织增生的抑制而发挥抗炎作用。   2.8 抗活性氧作用 龙盛京26采用化学发光分析法，利用H2O2-CTMAB鲁米诺发光体系，研究菘蓝干燥叶的水煎剂体外抗活性氧的作用。结果表明，提取物对H2O2有一定的清除作用，且呈量效关系，揭示它有抗氧化的性能。   菘蓝的制剂中靛蓝、靛玉红及多糖的含量极低，因而以它们作为主要活性指标建立质控方法显然不可取；结合型氨基酸或结合型糖蛋白有显着的抗病毒活性，但其组成、类型、结构特点还不清楚；有机

14、酸成分具有抗内毒素作用，但其作用是否为菘蓝抗病毒作用的关键所在还要进一步探讨。故对菘蓝及制剂活性指标依然值得进行深入研究，其质控方法还需要进一步完善和提高。   综上所述，目前对菘蓝的研究主要是对其药理活性的研究，为其临床应用奠定了一定的化学基础。但对其在临床上治疗机制的研究还不够深入，对其工艺的提取和质量的控制还存在较大的争议。因此，结合其有效成分的药理活性深入临床研究菘蓝对疾病治疗的作用，建立更完善的制剂工艺并制定合理的质量标准，有着现实和积极的意义。   【参考文献】   1 国家药典委员会.中国药典（一部）.北京：化学工业出版

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