综合项目一不同蔬菜水果中基本营养成分分析

1、综合项目一 不同蔬菜水果中基本营养成分分析实验一 总糖含量的测定（3,5-二硝基水杨酸法）一、实验目的1、掌握总糖的测定原理。2、学习用比色法测定还原糖的方法。二、实验原理三、实验试剂1、2mol/L氢氧化钠溶液：称取4g氢氧化钠，加少量的蒸馏水溶解后，定容至50mL。2、3,5-二硝基水杨酸试剂：称取0.325g 3,5-二硝基水杨酸溶于15mL热蒸馏水中，溶解后移入50ml容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液16.25mL，再加入2.25ml丙三醇，摇匀，冷却后定容至50mL。3、2mg/mL葡萄糖标准溶液：称取0.04g葡萄糖，加少量的蒸馏水溶解后，定容至20mL。4、6mol/L盐酸

2、：取25mL浓盐酸用蒸馏水稀释至50mL。5、6mol/L氢氧化钠：称取12g氢氧化钠，加少量的蒸馏水溶解后，定容至50mL。四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的制作取6支试管，按下表加入2mg/mL葡萄糖标准溶液和蒸馏水：管号2mg/mL葡萄糖标准溶液/mL蒸馏水/mL葡萄糖浓度mg/mLOD540101020.20.80.430.40.60.840.60.41.250.80.21.66102在上述试管中分别加入3,5-二硝基水杨酸试剂2mL，摇匀后于沸水浴中加入2min进行显色，取出后用流动水迅速冷却，各加入蒸馏水9mL，摇匀，在540nm波长处测定光吸收值。以葡萄糖含量（mg/mL）为横坐标

3、，光吸收值为纵坐标，绘制葡萄糖标准曲线，得出回归方程。2、总糖的提取称取1g实验材料（如新鲜果蔬），充分研磨后，放在锥形瓶中，加入6mol/L盐酸10mL，蒸馏水15mL，在沸水浴中加热30min。水解完毕后，冷却至室温后，加入8mL 6mol/L氢氧化钠，最终用蒸馏水定容至50mL，此为总糖水解液，用于总糖测定。3、总糖含量的测定取4支试管，按下表加入不同溶液：管号蒸馏水/mL总糖水解液/mL3,5-二硝基水杨酸试剂/mLOD5401102201230124012加完试剂后，摇匀后于沸水浴中加入2min进行显色，取出后用流动水迅速冷却，各加入蒸馏水9mL，摇匀，在540nm波长处测定光吸收值

4、。测定后，取样品的光吸收值平均值在标准曲线上查出相应的糖含量（mg/mL）。4、计算总糖的百分含量总糖=（C×V / m×1000）×稀释倍数×0.9×100%式中,C为总糖提取液的浓度mg/mL；V为总糖提取液的总体积mL；m为样品质量g五、实验结果1、葡萄糖标准曲线的绘制（1）光吸收值测得结果管号2mg/mL葡萄糖标准溶液/mL蒸馏水/mL葡萄糖浓度mg/mLOD540101020.20.80.430.40.60.840.60.41.250.80.21.66102（2）葡萄糖标准曲线图：（3）回归方程为：2、样品总糖含量的测定（1）材料_总

5、糖含量的测定管号蒸馏水/mL总糖水解液/mL3,5-二硝基水杨酸试剂/mLOD5401102201230124012样品的光吸收值平均值为_。根据标准曲线的回归方程计算得出总糖浓度为_。请说明具体计算过程：从而得出样品_总糖的百分含量为_。请说明具体计算过程：（2）材料_总糖含量的测定管号蒸馏水/mL总糖水解液/mL3,5-二硝基水杨酸试剂/mLOD5401102201230124012样品的光吸收值平均值为_。根据标准曲线的回归方程计算得出总糖浓度为_。请说明具体计算过程：从而得出样品_总糖的百分含量为_。请说明具体计算过程：（3）材料_总糖含量的测定管号蒸馏水/mL总糖水解液/mL3,5-

6、二硝基水杨酸试剂/mLOD5401102201230124012样品的光吸收值平均值为_。根据标准曲线的回归方程计算得出总糖浓度为_。请说明具体计算过程：从而得出样品_总糖的百分含量为_。请说明具体计算过程：3、对比分析不同样品总糖含量。实验二 蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝法）一、实验目的1、学习用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的基本原理与方法。2、了解考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的优缺点。二、实验原理三、实验试剂1、0.15mol/L氯化钠溶液：称取0.2633g氯化钠，加少量的蒸馏水溶解后，定容至30mL。2、0.1mg/mL牛血清白蛋白标准溶液：（1）母液：称取0.01g牛血清白蛋白溶于10m

7、L 0.15mol/L氯化钠溶液中，配成浓度为1mg/mL的溶液。（2）标准液：取母液1mL，用0.15mol/L氯化钠溶液定容至10mL，配成0.1mg/mL的牛血清白蛋白标准溶液。3、考马斯亮蓝G-250试剂：称取0.005g考马斯亮蓝G-250溶于2.5mL 95%乙醇，加蒸馏水40mL，加5mL 85%磷酸，最后加蒸馏水定容至50mL。四、实验步骤1、绘制标准曲线取6支试管，按下表加入各种试剂。试剂加完后混匀，室温静置3min，以1号管为空白调零，在595nm处测定其吸光值。以蛋白质含量（mg/mL）为横坐标，对应的吸光值为纵坐标，绘制蛋白质含量标准曲线，得出回归方程。试剂/mL管号1

8、234560.1mg/mL牛血清白蛋白标准溶液00.20.40.60.81.00.15mol/L氯化钠溶液1.00.80.60.40.20考马斯亮蓝G-250试剂555555蛋白质浓度（ug/mL）020406080100OD5952、总蛋白的提取称取1g实验材料（如新鲜果蔬），加5mL蒸馏水研磨，过滤后将滤液用蒸馏水定容至10mL。3、总蛋白测定取3支试管，分别加0.1mL未知浓度的蛋白质样品液，加0.9mL 0.15mol/L氯化钠溶液，再加入5mL考马斯亮蓝G-250试剂，摇匀，室温静置3min，以1号管为空白管调零，在595nm处测其吸光值。测定后，取样品的光吸收值平均值在标准曲线上查

9、出相应的蛋白浓度（ug/mL）。4、蛋白质含量（mg/g）蛋白质含量（mg/g）=（C×VT）/（1000×VS×WF）式中，C为蛋白质提取液的浓度ug/mL；VT为提取液总体积mL；VS为测定时加样量mL；WF为样品鲜重g。五、实验结果1、牛血清白蛋白标准曲线的绘制（1）光吸收值测得结果试剂/mL管号1234560.1mg/mL牛血清白蛋白标准溶液00.20.40.60.81.00.15mol/L氯化钠溶液1.00.80.60.40.20考马斯亮蓝G-250试剂555555蛋白质浓度（ug/mL）020406080100OD595（2）标准曲线图：（3）回归方程

10、为：2、样品蛋白质含量的测定（1）样品_的光吸收值分别为_、_、_，其平均值为_。根据标准曲线的回归方程计算得出蛋白质浓度为_。请说明具体计算过程：从而得出样品_蛋白质的含量为_。请说明具体计算过程：（2）样品_的光吸收值分别为_、_、_，其平均值为_。根据标准曲线的回归方程计算得出蛋白质浓度为_。请说明具体计算过程：从而得出样品_蛋白质的含量为_。请说明具体计算过程：（3）样品_的光吸收值分别为_、_、_，其平均值为_。根据标准曲线的回归方程计算得出蛋白质浓度为_。请说明具体计算过程：从而得出样品_蛋白质的含量为_。请说明具体计算过程：3、对比分析不同样品蛋白质含量。实验三 维生素C含量的测

11、定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）一、实验目的1、学习并掌握2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的原理与方法。2、了解水果与蔬菜中维生素C的含量情况。二、实验原理 三、实验试剂1、2%草酸：称取1g草酸，加少量的蒸馏水溶解后，定容至50mL。2、1%草酸：称取0.5g草酸，加少量的蒸馏水溶解后，定容至50mL。3、0.1mg/mL标准抗坏血酸溶液：称取0.0025g抗坏血酸溶于少量1%草酸溶液中，最终加1%草酸定容至25mL。用棕色试剂瓶保存于4。最好临用前配制。4、0.05% 2,6-二氯酚靛酚溶液：称取0.025g 2,6-二氯酚靛酚溶于15mL含有0.0052g碳酸氢钠的热水中，冷却后加水定

12、容至50mL。滤去不溶物，用棕色试剂瓶保存于4。约可保存1周。四、实验步骤1、样品的制备称取10g实验材料（如新鲜果蔬），加入5-10mL 2%草酸，研磨成浆状，过滤后，将滤液定容至25mL。2、标准液滴定准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置于50mL锥形瓶中，加9mL 1%草酸，以0.05% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡粉色，并保持15s不褪色，即达到终点；取10mL 1%草酸作空白对照，按以上方法滴定。记录所用染料溶液的体积（mL），计算出1mL染料溶液所能氧化抗坏血酸的量（mg）。3、样品滴定准备吸取样品滤液2份，每份为10mL，分别放入2个锥形瓶内，另取10mL 1%草酸作空白对照滴定；

13、按上面的操作滴定并记录所用染料溶液的体积（mL）。4、维生素C含量的计算取2份样品滴定所用染料体积平均值，代入下列公式中计算100g样品还原型抗坏血酸含量。维生素C含量（mg/100g样品）=（VA-VB）×C×T×100/（ D×W）式中，VA为滴定样品所好用的染料的平均用量mL；VB为滴定空白对照所用的染料的平均用量mL；C为样品提取液的总体积mL；D为滴定时所取的样品提取液体积mL；T为1mL染料能氧化抗坏血酸质量mg（由操作2计算出）；W为待测样品的质量g。五、实验结果1、标准抗坏血酸溶液滴定时，所用染料溶液的体积为_，从而计算出1mL染料溶液所

14、能氧化抗坏血酸的量为_。2、样品维生素C含量的测定（1）样品_滴定时所用染料溶液的体积分别为_和_。其平均用量为_。则样品维生素C含量为_。请说明具体计算过程。（2）样品_滴定时所用染料溶液的体积分别为_和_。其平均用量为_。则样品维生素C含量为_。请说明具体计算过程。（3）样品_滴定时所用染料溶液的体积分别为_和_。其平均用量为_。则样品维生素C含量为_。请说明具体计算过程。3、对比分析不同样品维生素C含量。实验四 纤维素含量的测定（比色法）一、实验目的1、学习并掌握比色法测定纤维素的原理与方法。2、了解水果与蔬菜中纤维素的含量情况。二、实验原理三、实验试剂1、60%硫酸：量取30mL浓硫酸

15、，缓慢倒入15mL蒸馏水中，最终加水定容至50mL。2、浓硫酸3、2%蒽酮试剂：将1g蒽酮溶解于50mL乙酸乙酯中，存放在棕色试剂瓶中。4、100ug/mL纤维素标准液：（1）母液：称取25mg纤维素，放入烧杯中，将烧杯放入冰浴中，然后加冷的60%硫酸15-17mL，在冷的条件下消化处理20-30min，用60%硫酸定容至25mL。（2）吸取母液5mL放入另一个容量瓶中，将容量瓶放入冰浴中，加蒸馏水定容至50mL。四、实验步骤1、纤维素标准曲线的绘制取6支试管，按下表加入不同试剂：试剂/mL管号123456100ug/mL纤维素标准液00.40.81.21.62蒸馏水21.61.20.80.4

16、0纤维素含量ug/mL020406080100OD620将各管摇匀后，向每管加入0.5mL 2%蒽酮，再沿管壁加入5mL浓硫酸，缓慢摇匀后，静置1min。然后在620nm下，测得不同含量纤维素溶液的吸光值。以测得的吸光值为Y值，以对应的纤维素含量为x值，绘制标准曲线，得出回归方程。2、样品纤维素含量的测定（1）称取1g实验材料（如新鲜果蔬）置于烧杯中，将烧杯置于冷水浴中，加入60%硫酸15mL，并消化30min，然后将消化好的纤维素溶液转入25mL容量瓶中，并用60%硫酸定容至25mL。然后用布氏漏斗过滤于另一个烧杯中。（2）取上述溶液2mL于试管中，加入0.5mL 2%蒽酮试剂，并沿管壁加5mL浓硫酸，缓慢摇匀后，静置12min，然后在620nm波长下测定光吸收值。3、纤维素百分含量纤维素百分含量=（X×10-6×a / W）×100%式中，X为按按回归方程计算出的纤维素含量ug；W为样品重量g；10-6为微克换算成克的系数；a为样品稀释倍数。五、实验结果1、纤维素标准曲线的绘制（1）光吸收值测得结果试剂/mL管号123456100ug/mL纤维素标准液00.40.81.21.62蒸馏水21.61.20.80.40纤维素含量ug/mL02040608