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文档简介

1、第十章第十章 临床微生物检测仪器临床微生物检测仪器 重点难点熟习了解传统的微生物学鉴定方法过程烦琐费时费力易发生客观片面错误质量控制难微生物学技术方法快速、准确、简易和自动化微生物学技术方法快速、准确、简易和自动化? ?浸透交叉自动微生物鉴定及药敏分析系统自动微生物鉴定及药敏分析系统自动血培育系统自动血培育系统主要功能主要功能 检测标本中能否有检测标本中能否有微生物存在,计算机自动扫微生物存在,计算机自动扫描进展延续监测,当微生物描进展延续监测,当微生物生长代谢导致某些生长指数生长代谢导致某些生长指数超标时,仪器自动报警提示超标时,仪器自动报警提示有细菌生长。有细菌生长。自动血培育系统自动血培

2、育系统主要功能主要功能 将培育基上分将培育基上分别的可疑致病菌配制成别的可疑致病菌配制成纯菌液,放入自动微生纯菌液,放入自动微生物鉴定及药敏分析系统物鉴定及药敏分析系统中,经过计算机自动扫中,经过计算机自动扫描、读数、分析、最后描、读数、分析、最后报告鉴定及药敏结果。报告鉴定及药敏结果。 自动微生物鉴定及药敏分析系统自动微生物鉴定及药敏分析系统第一节第一节 自动血培育系统自动血培育系统第二节第二节 自动微生物鉴定自动微生物鉴定 及药敏分析系统及药敏分析系统本章小结本章小结任务原理及分类根本构造与功能性能特点常见缺点及维护血培育仪的进展 经过自动监测培育基液中的混浊度、pH值、代谢终产物CO2的

3、浓度、荧光标志底物或代谢产物等的变化,定性地检测微生物的存在。 自动血培育仪的任务原理混浊度混浊度CO2pH荧光标荧光标志底物志底物代谢代谢产物产物检测培育基导的血培育系统 电性和电压的血培育系统运用测压原理采用光电原理监测的血培育系统根据检测原理分类根据检测原理分类 血培育基中因含有不同电解质而具有一定导电性。微生物在生长代谢的过程中可产生质子、电子和各种带电荷的原子团例如在液体培育基内CO2转变成CO3,经过电极检测培育基的导电性或电压可判别有无微生物生长。 许多细菌生长过程中,常伴有吸收或产生气表达象,如很多需氧菌在胰酶消化大豆肉汤中生长时,由于耗费培育瓶中的氧气,故首先表现为吸收气体。

4、而厌氧菌生长时最初均无吸收气表达象,仅表现为产生气体主要为CO2,因此可利用培育瓶内压力的改动检测微生物的生长情况。 必然会产生终代谢产物必然会产生终代谢产物 CO2 CO2,引起培育基引起培育基 pH pH 及氧化复原电及氧化复原电位改动。利用光电比色检测血位改动。利用光电比色检测血培育瓶中某些代谢产物量的改培育瓶中某些代谢产物量的改动,可判动,可判 微生物在代谢过程中断有无微生物生长。断有无微生物生长。BioArgos系统系统 Vital系统系统 根据检测手段不同分成四类Bactec9000系列系列 点击 进入BacT/Alert系统系统 点击 进入目前临床最常见的血培育系统目前临床最常见

5、的血培育系统BacT/Alert系统系统任务原理任务原理点击图片进入视频点击图片进入视频co2co2co2培育基光电感应器荧光感应物质光源中央处置器报告报告Bactec9000系列任务原理系列任务原理自动血培育仪的根本构造与功能培育瓶培育仪数据管理系统点击图片进入培育瓶培育瓶培育瓶 需需 氧氧培育瓶培育瓶 厌厌 氧氧培育瓶培育瓶 小小 儿儿 培培 养养 瓶瓶分支杆菌分支杆菌 培培 养养 瓶瓶 其其 他他临床常见的血培育瓶 1 为一次性无菌培育瓶,瓶内为负压,便于标本采集时依托负压作用将血液直接引人培育瓶。每个培育瓶底部都包含一个检测CO2的传感器,经过检测作为微生物生长情况的指示器。 BacT

6、/Alert系统系统 Bactec9000系列系列 临床常见的血培育瓶 2 针对微生物对营养和气体环境的要求悬殊,患者的年龄和体质差别大以及培育前能否服用抗菌素等要素,BACTEC9000系统提供多种公用封锁式培育瓶,不仅提供不同细菌繁衍所必需的增菌液体培育基,还包含适宜的气体成分,最大限制检出一切阳性标本,防止假阴性。 培育仪的组成恒温安装振荡培育安装监测安装临床常见的血培育仪BacT/Alert系统系统Bactec9000系列系列数据管理系统主机监视器键盘打印机条形码阅读器自动血培育仪的性能特点培育基营养丰富培育基营养丰富以延续、恒温、振荡方式培育以延续、恒温、振荡方式培育培育瓶多采用不易

7、碎资料制成培育瓶多采用不易碎资料制成采用封锁式非侵入性的瓶外监测方式采用封锁式非侵入性的瓶外监测方式自动延续监测自动延续监测数据处置功能较强数据处置功能较强设有内部质控系统设有内部质控系统培育瓶可随时放入,并进展追踪检测培育瓶可随时放入,并进展追踪检测培育瓶多采用双条形码技术培育瓶多采用双条形码技术用途广泛用途广泛阳性结果报告及时,并打印显示或报警提示阳性结果报告及时,并打印显示或报警提示 自动血培育仪常见缺点及维护自动血培育仪常见缺点及维护 温度异常过高或过低温度异常过高或过低瓶孔被污染瓶孔被污染数据管理系统与培育仪失去信息联络或不任务数据管理系统与培育仪失去信息联络或不任务仪器对测试中的培

8、育瓶出现异常反响仪器对测试中的培育瓶出现异常反响温度异常过高或过低温度异常过高或过低 多数情况下是由于仪器门翻开的次数太多多数情况下是由于仪器门翻开的次数太多引起,需留意尽量减少仪器门开关次数,并确引起,需留意尽量减少仪器门开关次数,并确保培育过程中仪器门是紧闭的。通常培育仪的保培育过程中仪器门是紧闭的。通常培育仪的门要封锁门要封锁30min后才干坚持温度平衡。后才干坚持温度平衡。瓶孔被污染瓶孔被污染 假设培育仪瓶孔内的培育瓶破裂或走漏,假设培育仪瓶孔内的培育瓶破裂或走漏,需按各仪器要求及时进展清洁和消毒处置。需按各仪器要求及时进展清洁和消毒处置。数据管理系统与培育仪失去信息联络或不任务数据管

9、理系统与培育仪失去信息联络或不任务 此类缺点只能够在微机与培育仪仪器相对独此类缺点只能够在微机与培育仪仪器相对独立的系统中出现。此时培育仪仍可监测标本,但立的系统中出现。此时培育仪仍可监测标本,但它只能保管最后它只能保管最后72小时的数据,检测时也只能打小时的数据,检测时也只能打印阳性或阴性标本的位置。因此必需留意放置培印阳性或阴性标本的位置。因此必需留意放置培育瓶时,需先扫描条形码,再将它放入启用的瓶育瓶时,需先扫描条形码,再将它放入启用的瓶孔内,患者、检验号、培育瓶的信息要等到微机孔内,患者、检验号、培育瓶的信息要等到微机系统任务之后才干输入。系统任务之后才干输入。 仪器对测试中的培育瓶出

10、现异常反响仪器对测试中的培育瓶出现异常反响 在在BACTEC9050培育仪中,出现此类缺点的缘由大培育仪中,出现此类缺点的缘由大多是由于培育瓶未经扫描条形码就放入仪器内,或虽已多是由于培育瓶未经扫描条形码就放入仪器内,或虽已扫描,但未放入规定的瓶孔中,系统将这些培育瓶归为扫描,但未放入规定的瓶孔中,系统将这些培育瓶归为“匿名瓶,在显示屏上会出现提示信息。此时应将匿名瓶,在显示屏上会出现提示信息。此时应将“匿匿名瓶取出,重新扫描后放入。名瓶取出,重新扫描后放入。 BacT/Alert 培育仪运转中,有时仪器测定系统以为某一瓶孔目前是空的,但是实践上孔内还有一被测的培育瓶无论是阳性或阴性的, 此时

11、应经过打印或 “Problem Log 命令读出存在问题的瓶孔号。假设整个区块中的一切瓶号都被显示出来,那能够是区块有问题;假设只列出一个瓶孔号,那就只是这个瓶孔有问题。缺点排除方法:假设这一孔内的培育瓶曾经被非法卸出,那么可以不论这一信息;假设孔内还有培育瓶,那么卸出此瓶,装入到另一孔内,然后对前孔作质控。 血培育仪的进展血培育仪的进展检出的范围更广,阳性率更高检出的范围更广,阳性率更高灵敏度更高,污染率、假阳性率和假阴性率应降至最低灵敏度更高,污染率、假阳性率和假阴性率应降至最低自动化和计算机的智能化程度更强自动化和计算机的智能化程度更强体积更小,仅需极微量的血液样品即可检出一切的微生体积

12、更小,仅需极微量的血液样品即可检出一切的微生物物检验周期更短,任务效率更高检验周期更短,任务效率更高本钱更低,结果报告更快本钱更低,结果报告更快使血培育检查更容易被患者接受使血培育检查更容易被患者接受 微生物自动鉴定及药敏分析系统微生物自动鉴定及药敏分析系统目录目录 微生物自动鉴定系统任务原理微生物自动鉴定系统任务原理 采用微生物数码鉴定原理采用微生物数码鉴定原理 数码鉴定是指经过数学的数码鉴定是指经过数学的编码技术将细菌的生化反响方式转换成数学方式,给编码技术将细菌的生化反响方式转换成数学方式,给每种细菌的反响方式赋予一组数码,建立数据库或编每种细菌的反响方式赋予一组数码,建立数据库或编成检

13、索本。经过对未知菌进展有关生化实验并将生化成检索本。经过对未知菌进展有关生化实验并将生化反响结果转换成数字编码,查阅检索本或数据库,反响结果转换成数字编码,查阅检索本或数据库,得到细菌称号。其根本原理是计算并比较数据库内每得到细菌称号。其根本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反响出现的频率总和。个细菌条目对系统中每个生化反响出现的频率总和。 抗菌药物敏感性实验的检测原理抗菌药物敏感性实验的检测原理 其本质是微型化的肉汤稀释实验其本质是微型化的肉汤稀释实验 将抗生素微量稀释在条将抗生素微量稀释在条孔或条板中,参与菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵孔或条板中,参与菌悬液孵育后放

14、入仪器或在仪器中直接孵育,仪器每隔一定时间自动测定细菌生长的浊度,或测定培育,仪器每隔一定时间自动测定细菌生长的浊度,或测定培育基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解,察看细菌育基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解,察看细菌的生长情况。得出待检菌在各药物浓度的生长斜率,经回归的生长情况。得出待检菌在各药物浓度的生长斜率,经回归分析得到最低抑菌浓度分析得到最低抑菌浓度MIC值,并根据值,并根据CLSI规范得到相应规范得到相应敏感度:敏感敏感度:敏感“S、中度敏感、中度敏感“MS和耐药和耐药“R。 Clinical and Laboratory Standards Institute:临床与

15、实验室规范委员会。以前称NCCLS根本构造与功能根本构造与功能 菌液接种器菌液接种器培育和监测系统培育和监测系统测试卡板测试卡板数据管理系统数据管理系统 是系统的任务根底,各种不同的测试卡板具有不同的功能。最根本的测试卡板包括革兰氏阳性菌鉴定卡板、革兰氏阴性菌鉴定卡板、革兰氏阳性菌药敏实验卡板和革兰氏阴性菌药敏实验卡板。 测试卡板测试卡板微生物自动鉴定系统的鉴定卡 微生物药敏测试卡 绝大多数自动微生物鉴定及药敏分析系统都配有自动接种器,大致可分为真空接种器和活塞接种器,以真空接种器较为常用。仪器普通都配有规范麦氏浓度比浊仪,操作时只需稀释好的菌液放入比浊仪中确定浓度即可。菌液接种器菌液接种器

16、监测系统每隔一定时间对每孔的透光度或荧光物质的变化进展检测。快速荧光测定系统可直接对荧光测试板各孔中产生的荧光进展测定,并将荧光信号转换成电信号常规测试板那么直接检测电信号,从干涉滤光片过滤的光经过光导纤维导入测试板上的各个测试孔,光感受二极管测定经过每个测试孔的光量,产生相应的电信号,从而推断出菌种的类型及药敏结果。培育和监测系统培育和监测系统 系统的神经中枢,一直坚持与孵箱/读数器、打印机的联络,控制孵箱温度,自动定时读数,担任数据的转换及分析处置。数据管理系统数据管理系统自动化程度较高自动化程度较高功能范围大功能范围大检测速度快检测速度快 系统具有较大的细菌资料库系统具有较大的细菌资料库

17、性能特点数据处置软件功能强大数据处置软件功能强大软件和测试卡板大多可不软件和测试卡板大多可不断晋级更新断晋级更新设有内部质控系统设有内部质控系统运用一次性测试卡或测试板运用一次性测试卡或测试板维护和保养 严厉按手册规定进展开、关机及各种操作,防止因程序错误呵斥设备损伤和信息丧失。 定期清洁比浊仪、真空接种器、封口器、读数器及各种传感器,防止由于灰尘而影响判别的正确性。 定期用规范比浊管对比浊仪进展校正,用ATCC规范菌株测试各种试卡,并作好质控记录。 建立仪器运用以及缺点和维修记录,详细记录每次运用情况和缺点的时间、内容、性质、缘由和处理方法。 定期由工程师作全面保养,并排除缺点隐患。微生物自

18、动鉴定及药敏分析系统的进展 基于质谱分析技术的自动化微生物鉴定系统的出现,使微生物鉴定可在数分钟内完成,这将会给临床微生物检测带来革命性的变化。 未来的微生物鉴定和药敏分析系统将会检测速度更快; 检测的准确率和分辨率更高;自动化和电脑的智能化程度更强; 检测本钱更低。 自动血培育检测、分析系统自动微生物鉴定及药敏分析系统经过自动监测培育基液中的混浊度、经过自动监测培育基液中的混浊度、pH值、代谢终产物值、代谢终产物CO2的浓的浓度、荧光标志底物或代谢产物等的变化,定性地检测微生物的存在。度、荧光标志底物或代谢产物等的变化,定性地检测微生物的存在。检测培育基导电性和电压为根底的血培育系统检测培育基导电性和电压为根底的血培育系统运用测压原理的血培育系统运用测压原理的血培育系统 采用光电原理监测的血培育系统采用光电原理监测的血培育系统具有检测灵敏度高,检出的时间短,检出病原菌的种类多,抗干扰才具有检测灵敏度高,检出的时间短,检出病原菌的种类多,抗干扰才干强、实施延续、无损伤瓶外监测等特点。干强、实施延续、无损伤瓶外监测

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