亚硝酸根重氮化.

1、亚硝酸根重氮化 - 偶联反应共振散射光谱测定作者：武秀红，董存智时间： 2007-11-22 11:40:00关键词】重氮化摘要： 测定。方法 通过共振散射光谱法测定痕量亚硝酸根。结果 12X 10-3g/L，检出限为 80X 10-5g/L。结论 性好，用于蔬菜中亚硝酸根含量的测定，回收率为目的 研究重氮化偶联反应的共振散射光谱并应用于亚硝酸根的 利用磺胺 N，N 二甲基苯胺亚硝酸根间发生的重氮化偶联反应， 方法的线性范围为 0 该方法简单、灵敏度高、选择 928%985%。关键词： 重氮化偶联反应；共振散射光谱；亚硝酸根；磺胺； N， N 二甲 基苯胺Application and stu

2、dy on resonance scattering spectra of diazotization-coupling reactionAbstract ： Objective To study resonance light scattering(RLS) spectra of diazotization-coupling reaction and establish a new method for the determination of trace nitrite.MethodsRLS spectra was usedto determine trace nitrite by the

3、 diazotization-coupling reaction between sulfanilic amideN,Ndimethyl anilinenitrite.ResultsThe%98.5 %.linear ra nge of this method was on 12 X 10-3g/L and the detection limit was 80 X10-5g/L.Conclusion The method were simple ， with high sensitivity and good selectivity.It was used to determine trace

4、 nitrite in vegetable samples.The recovery was 92.8resonance scatteringKey words ： diazotizationcoupling reaction spectra ； nitrite;sulfanilic amide;N,Ndimethyl aniline它与脂肪族和芳香族的亚硝酸根广泛存在于环境、水体、食品和土壤中，胺类化合物反应生成的N-亚硝胺化合物一直是公认的强致癌物，因此，亚硝酸 根是环境、水质、食品等检测的重要指标之一。检测亚硝酸根的方法有光度法 1 、荧光法 2、电化学法 3、色谱法 4等。共振光散射是

5、一种新 分析技术，多用于蛋白质、核酸等大分子的分析测定 5。目前，基于重氮化 偶联反应共振散射光谱法测定亚硝酸根的报道较少。实验发现，亚硝酸根磺胺N, N二甲基苯胺重氮化-偶联反应体系的反应产物可产生强烈的共振光散射现 象。我们对此现象进行研究，建立了测定痕量亚硝酸根的新方法。1 材料与方法11 仪器和试剂970CRT荧光光度计（上海分析仪器总厂）；紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；NanoZS90纳米粒度与Zeta电位 分析仪（英国Malvern公司）。亚硝酸根标准溶液：用干燥的 NaNO粉末配制含 亚硝酸根为1mg/ml贮备液，临用时稀释为10卩g/ml ;磺胺溶液：58

6、 x 10- 3mol/L（用乙醇溶解后再用水定容）；N, N二甲基苯胺溶液：0.015mol/L（称取 09063gN N二甲基苯胺，加10mol/L盐酸溶液250ml，待其溶解后用水稀释至 500ml）;乙酸钠溶液：40mol/L ,水为16MD的高纯水。所用试剂均为分析纯。12 实验方法 在2支25ml比色管中，依次加入磺胺溶液 30ml，其中1 支加入10卩g/ml的亚硝酸根溶液10ml或适量样品，另1支为试剂空白，稀释 到10ml，摇匀，静置15min,加入0015mol/L的N,N二甲基苯胺溶液30ml, 4mol/L的乙酸钠溶液14ml，定容至25ml，摇匀，静置25min。以试

7、剂空白为 参比，在激发波长、发射波长均为533nm的条件下，测定溶液的共振散射光强 度，其中含亚硝酸根者为I，试剂空白为10 ,计算 1（ 1=1 -10）。按实验方法进行测定，样品中亚硝酸根的V2x W（1）13 样品分析 取新鲜白菜、土豆样品洗净，晾干。称取 30g 样品在研 钵中研碎，加入60ml蒸馏水于60r水浴锅中浸泡10min,滤入100ml容量瓶 中，定容。取白菜、土豆样各 05ml， 含量由式 （1） 计算得到。 X=Cx V1（卩 g/g）;c-由回归方程计算得到比色管中V2-取样体积；W样品的质量。式中：X-样品中亚硝酸根的含量 亚硝酸根的总含量（卩g） ； V1-浸取液的

8、总体积;2 结果N,N二甲基苯胺亚硝酸根体系的可知,磺胺与亚硝酸根反应生成N,N二甲基苯胺反应生21 光谱 以蒸馏水为参比，测定磺胺 吸收光谱 （图 1）和共振散射光谱 （图 2）。由图 l 的重氮盐在可见光区无吸收，在弱碱性介质中重氮盐与 成的偶联产物在370和500nm处有吸收，并且随着亚硝酸根量的增加其吸收逐渐增强。由图2可知，磺胺、N, N二甲基苯胺及生成的重氮盐的共振散射光强 度均为 0，与基线重合，偶联反应的发生使得共振散射光明显增强，在468和533nm处产生2个共振散射峰，533nm处的共振散射光强度大且稳定，其强度与 亚硝酸根浓度呈正比，因此，实验选择 533nm作为定量测定

9、波长。利用激光纳 米粒度仪测得偶联反应产物的平均粒径为 342nm说明在反应条件下偶联反应 产物发生聚集，聚集产物具有较大的平均粒径从而使得共振散射光强度明显增 强。1：1.0ml ；1：1.0ml ；磺胺； 2： 1 +NO-2 1.0ml;3:1+N,N 二甲基苯胺 +乙酸钠； 4：3+NO-25：3+NO-2 2.0ml；6：3+NO-2 3.0ml 1 吸收光谱（略） 磺胺； 2： 1 +NO2- 1 .0ml;3: 1 +N,N 二甲基苯胺 +乙酸钠； 4：3+NO2-5：3+NO2-2.0ml；6：3+NO2-3.0ml图 2 共振散射光谱（略）22 酸度的影响 按照实验方法改变盐

10、酸的加入量。结果表明，当盐酸 的用量为0ml时，体系的共振散射光最强，且稳定性、重现性良好。因此，实 验过程中不直接加入盐酸，体系的酸性环境由 N,N二甲基苯胺溶液中的酸提 供。23 乙酸钠用量的影响 按照实验方法改变乙酸钠的加入量。结果表 明，乙酸钠用量为14ml时体系的共振散射光强度有最大值，故选用乙酸钠用量 为 14ml。24 磺胺用量的影响 按照实验方法改变磺胺的加入量。结果表明，磺 胺的用量为30ml时体系的共振散射光强度较大且重现性好。因此，实验选用磺 胺的加入量为 30ml。按照实验方法改变 N,N 二甲N二甲基苯胺用量在30ml时体系的共振散射 N, N二甲基苯胺的用量为30m

11、l。25 偶联试剂N,N二甲基苯胺用量的影响 基苯胺的加入量。结果表明， N， 光强度最大且稳定，本实验选用按实验方法改变重氮化反应时间进行测26 重氮化反应时间的影响定。结果表明，重氮化反应时间为 15min 时共振散射光强度最大。本实验选择 重氮化的反应时间为 15min。27 偶联产物的稳定性 实验发现，偶联产物的共振散射光强度在 10min内达到稳定并在70min之内保持不变，在24h之内基本不变，即产物的 共振散射光强度稳定。实验选择静置时间为 25min。回归系数为： R=09983， 的斜率，得到方法的检出限为28 工作曲线的绘制 按照实验方法改变亚硝酸根的加入量，测其共振 散射

12、光强度。结果表明，10卩g/ml亚硝酸根的加入量在03.0ml（012X10- 3g/L） 时，线性关系良好。用最小二乘法进行回归，求得回归方程为： A=- 26007+0707C（卩 g/L）按 12 次空白实验的标准偏差的 3 倍除以工作曲线80 X 10-5g/L。29 共存离子的影响按照实验方法，当亚硝酸根含量为10卩g/25ml，相对误差 10%时，对23种常见离子进行了干扰实验。实验发现，各种离子 允许共存的倍数为 K+, Ca2+ NO3-，Mg2+ Ba2+, Br-,S042-500 倍；Sn2+，F-,PO43-200倍；Ni2+、Se2+100倍；Ge4+20咅；Cu2+

13、, Fe2+, I- , S2O32-10 倍；Zn2+,Ag+, Co2+, A13+, Hg2+, Mn2+5咅。01mol/L 的酒石酸钠 10ml，可 掩蔽100倍的Co2+, 50倍的Hg2+和Mn2+ 20倍的Cu2+ 01mol/L的柠檬酸三 钠10ml ,可使Zn2+允许共存的倍数提高到100倍。210 样品分析结果 对白菜、土豆样品进行测定 测得白菜、土豆样中亚硝酸根的含量分别为36.7和7.3卩g/g ,加标回收实验测得回收率为 985%和 928。3 小结该方法简单 灵敏度高 选择性好 可用于蔬菜中亚硝酸根含量的测定 回收率为92.8%98.5%。参考文献1Adnan A

14、ydin,Ozgen Ercan,Sulin Tascioglu.A novel methodfor the spectrophotometric determination of nitrite in water J.Talanta,200566(5) ：1181-1186.2董存智 秦利鸿 . 蔬菜中痕量亚硝酸根催化荧光光度法测定 J.中国公共卫生 ,2005,21(11) ：1400-1401.3Nikolaos Karousos Lok Cee Chong Caroline Ewen,etal.Evaluation of multifunctional indicator for the electroanalytical determination of nitriteJ.Electrochimica Acta,2005,50(9)：1879-1884.4施家威 颜金良 . 离子色谱法快速测定食品中的硝酸盐、亚硝酸盐J.