胆系恶性肿瘤上皮钙粘合素和连环素的表达及其意义

1、    胆系恶性肿瘤上皮钙粘合素和连环素的 表达及其意义        【摘要】目的探讨胆囊癌和肝外胆管癌组织中上皮钙粘合素(E-cadherin，E-cd)、-连环素(-catenin,-C)和-连环素(-catenin,-C)表达特征及意义。方法胆囊癌组织标本40例，肝外胆管癌42例。用石蜡切片ABC免疫组织化学法观察其上皮钙粘合素和连环素的表达。结果40例胆囊癌E-cd、-C和-C阳性率分别为35.0%、50.0%和42.5%，42例胆管癌E-cd、-C和-C

2、阳性率分别为35.7%、42.8%和40.5%；高分化和未发生转移胆囊癌或胆管癌E-cd、-C、-C阳性率及三者共同阳性率均明显高于低或未分化及发生转移的胆囊癌或胆管癌。结论E-cd、-C和-C表达可能与胆囊癌和胆管癌发生发展、生物学行为及其预后有密切关系。【关键词】胆囊癌；胆管癌；细胞内粘附分子；连环素；免疫组织化学 The expression of E-cadherin, - or -catenin in gallbladder carcinoma and cholangiocarcinoma and implicationYANG Zhulin, LI Yongguo, ZHONG D

3、ewu, et al.（Research Laboratory of Hepatobiliary Diseases, The Second Affiliated Hospital ofHunan Medical University, Changsha 410011,China）【Abstract】 Objective To investigate the expression of E-cadherin (E-cd), - or -Catenin (-C, -C) in gallbladder carcinoma and cholangiocarcinoma and the biologic

4、al implications. Methods Immunohistochemical method of avidin-biotin complex in paraffin embedded sections was used. Results The positive rate of E-cd, -C and -C in gallbladder carcinoma was 35.0 %, 50.0 % and 42.5 %, respectively, that in cholangiocarcinoma was 35.7 %, 42.8 % and 40.5 %, respective

5、ly. The positive rate of E-cd, -C, -C and E-cd (+) -C (+) -C (+) was significantly higher in the cases of good-differentiation or without metastasis than that in the ones of poor- or undifferentiation or with metastasis. Conclusion The expression of E-cd, -C, -C might be related to the carcinogenesi

6、s, development, biological behaviors and prognosis of gallbladder carcinoma and cholangiocarcinoma.【Key words】 Gallbladder neoplasms；Biliary neoplasms；Intracellular adherin molecules；Catenin；Immunohistochemistry上皮钙粘合素(E-cadherin, E-cd)是一种上皮组织中的粘附分子，它与-连环素(-catenin, -C)和-连环素(-catenin, -C)形成复合体，促进上皮细胞

7、间相互粘附，维持组织结构完整性和极性1，2。我们应用ABC免疫组织化学法研究肝外胆管癌和胆囊癌组织中E-cd、-C、-C的表达及其意义。材料与方法1.组织标本：胆囊癌组织标本40例，其中男7例，女33例，平均年龄(49.8±10.2)岁；病理类型包括高分化腺癌23例(57.5%)、低分化腺癌12例(30.0%)、鳞癌4例(10.0%)和未分化癌1例(2.5%)。肝外胆管癌42例，其中男20例，女22例，平均年龄(48.2±6.9)岁；病理类型包括高分化腺癌17例(40.5%)、低分化腺癌16例(38.1%)、未分化癌7例(16.7%)和粘液腺癌2例(4.7%)。上述胆囊癌和

8、胆管癌标本常规制作4 m厚石蜡切片。2.主要试剂：鼠抗人E-cd单克隆抗体(1/40)、兔抗人-C、-C多克隆抗体(1/200、1/200)、生物素标记羊抗鼠IgG(1/300)、生物素标记羊抗兔IgG(1/300)及ABC试剂(1/500)均购自Sigma公司，Hcl-DAB为瑞士进口分装。3.方法：E-cd、-C、-C染色方法均为常规ABC免疫组织化学法。细胞膜呈淡棕黄色至深棕黄色颗粒者为阳性细胞，胞浆和(或)胞核着色细胞为阴性或表达失常细胞。切片中阳性细胞率90%为阳性2-5；切片中阳性细胞率90%为表达缺失或失常，为阴性。选择正常胆管上皮组织切片作为每次染色的阳性对照，以0.01 mo

9、l/L PBS液(pH7.4)替代一抗作为每次染色的替代或阴性对照。4.统计学方法：2检验和四格表确切概率法。结果1.E-cd、-C、-C表达特征：E-cd、-C、-C免疫组化正常表达定位胞膜，胞浆和胞核阴性。本研究结果发现，部分病例胞浆和(或)胞核着色，属于表达失常。40例胆囊癌E-cd、-C、-C正常表达病例分别为14例(35.0%)、20例(50.0%)和17例(42.5%)。42例胆管癌E-cd、-C、-C正常表达病例分别为15例(35.7%)、18例(42.8%)和17例(40.5%)。2.E-cd、-C、-C表达与病理类型的关系：胆囊高分化腺癌E-cd、-C、-C阳性率(52.1%

10、、60.9%、56.5%)均明显高于低分化腺癌(16.7%、25.0%、16.7%)，差异均有显著性(P值均0.05)；4例鳞癌E-cd、-C、-C阳性病例分别为2、3、2例，1例未分化癌均为阴性。胆管高分化腺癌E-cd、-C、-C阳性率(52.9%、64.7%、64.7%)较明显高于低分化腺癌(31.2%、37.5%、25.0%)和未分化癌(0、16.7%、16.7%)，其中与未分化癌阳性率比较差异均有显著性(P0.05)；2例粘液腺癌E-cd、-C、-C阳性病例分别为1、0、1例。3.E-cd、-C、-C表达与是否发生转移的关系：18例转移组胆囊癌E-cd、-C、-C阳性率(22.2%、2

11、7.8%、22.2%)明显低于22例未转移组胆囊癌(54.5%、68.1%、59.1%)，差异均有显著性(P值均0.05)。17例转移组胆管癌E-cd、-C、-C阳性率(23.5%、23.5%、23.5%)较明显低于25例未转移组胆管癌(44.0%、56.0%、52.0%)，其中-C阳性率之间差异有显著性(P0.05)。4.E-cd、-C、-C表达组合与病理类型的关系：高分化胆囊癌或胆管癌三者组合阳性率均较明显地高于低分化或未分化胆囊癌或胆管癌(表1)。5.E-cd、-C、-C表达组合与肿瘤是否转移的关系：转移组癌三者组合阳性率均较明显低于未转移组癌(表2)。表1胆道肿瘤病理类型与E-cd、-

12、C、-C表达的关系病理类型例数三者均阳性三者均阴性两者阳性两者阴性胆囊癌高分化腺癌2311921低分化腺癌1219*11鳞癌42110未分化癌10100胆管癌高分化腺癌179620低分化腺癌163562未分化腺癌706*10粘液腺癌20110     注：与高分化腺癌三者阳性或阴性比较，P0.05；*P0.05表2胆道肿瘤是否转移与E-cd、-C、-C表达的关系是否转移例数三者阳性三者阴性两者阳性两者阴性胆囊癌转移1841301未转移22107*41胆管癌转移1731031未转移259871     注：与转移病例

13、的三者阳性或阴性比较，*P0.05；P0.05讨论近年来的研究发现，E-cd、-C、-C表达和分布状况与恶性肿瘤分化程度、临床分期、转移发生及其预后等有密切关系2-4。本研究结果表明，高分化和未发生转移的胆囊癌或胆管癌病例E-cd、-C、-C阳性表达率及其三者阳性率均较明显地高于低分化或未分化及发生转移的胆囊癌或胆管癌病例。其结果与国内外学者在其他一些恶性肿瘤中的报道较一致。说明E-cd、-C、-C表达状况与胆囊癌和肝外胆管癌分化程度、转移发生及其预后等生物学行为有密切关系，E-cd、-C和-C阳性表达者(尤其是三者均阳性表达者)可能分化程度好、恶性度低、不易发生转移或侵袭周围组织能力差及预后

14、好，三者可能是反映胆囊癌和胆管癌发生发展过程、生物学行为及其预后的重要标记物。作者单位：杨竹林（410011长沙，湖南医科大学附属第二医院肝胆疾病研究室）李永国（410011长沙，湖南医科大学附属第二医院肝胆疾病研究室）钟德?（410011长沙，湖南医科大学附属第二医院肝胆疾病研究室）黄生福（410011长沙，湖南医科大学附属第二医院肝胆疾病研究室）王群伟（410011长沙，湖南医科大学附属第二医院肝胆疾病研究室）参考文献1Takeichi M. Cadherin cell adhesion receptors as a morphogenetic regulator. Science, 19

15、91,251:1451-1455.2Valizadeh A, Karayiannakis AJ, Ei-Hariry I, et al. Expression of E-cadherin-associated molecules (-,-,and -catenin and p120) in colorectal polys. Am J Pathol, 1997,150:1977-1984.3Krishnadath KK, Tilanus HW, Blankenstein MV, et al. Reduced expression of the cadherin-catenin complex in oesophageal adenocarcinoma. Correlates with pro