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1、从不同角度透视肺炎双球菌转化实验1从微生物学角度1)肺炎双球菌的结构 肺炎双球菌是一种细菌,属原核生物。由于核区中的 DNA 分子不与蛋白质结合,因此,用它作实验材料易于单独观察 DNA 在遗传中的作用。何为荚膜?其作用怎样?荚膜是细菌细胞壁外围绕一层较厚的粘性、 胶冻样物质。 其化学成分随细菌种类不同而有差异,多数细菌的荚膜成分为多糖,如肺炎双球菌。荚膜的形成受遗传物质(基因)控制。荚膜与细菌的致病性有关,同时荚膜还能储留水分能抗干燥,对保护细菌有作用。荚膜本身无毒性,但在机体内保护细菌抵抗吞噬细胞的吞噬及消化,并能抑制体内杀菌物质(如溶菌酶)的杀菌作用,使细菌易在体内大量繁殖致病。细菌若失
2、去荚膜,致病力也随之减弱或消失。3)何为菌落? 菌落是单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时, 形成的一种肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群。每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。2从分类学角度肺炎双球菌有两种类型:一种是 R型细菌,无多糖类的荚膜,是无毒性的;另一种是S型细菌,具有多糖类的荚膜,是有毒性的。 R 型实际上是 S 型肺炎双球菌的突变类型,二者属于同一个物种。3从免疫学角度(1)为何S型细菌会致病,而 R型细菌不能致病?当细菌进入人或动物体后, 由于免疫效应,都要被吞噬细胞吞噬消化,加以消灭。由于 S 型细菌有荚膜,进入吞噬细胞后,受荚膜的保护,能抵抗
3、吞噬细胞的吞噬和消化,从而能迅速增殖、扩散,引起机体发生疾病。而 R 型细菌无荚膜,则能被吞噬细胞吞噬、消化,所以不能使机体患病。(2)同是一种S型的肺炎双球菌,为何使人患肺炎,而小鼠患败血病?肺炎双球菌都会使人或小鼠患肺炎,由于小鼠抵抗力差而细菌毒力较强,可并发败血症。3)何谓加热杀“死”? 这里加热的温度一般为 60C左右,目的使蛋白质变性,细菌的感染力和致病性降低, 但抗原的特性仍然存在。(4)加热杀“死”后的 S型细菌,其细胞中的 DNA是否变性?由于DNA具有相对稳定性,当 DNA容液加热到沸点时,其氢键断裂,双螺旋解体,但若将其缓慢冷却, 分离的单链就可部分得以重聚,恢复双螺旋结构
4、。4 从遗传学角度1)何为转化?其实质是什么?影响转化的因素有哪些?转化作用是指一种生物由于接受了另一种生物的遗传物质(DNA或RNA ),而表现出后者的某些遗传性 状或发生遗传性状改变的现象。转化的实质是外源 DNA 与受体细胞 DNA 之间的重组,使受体细胞获得了新的遗传信息。因此,转化作 用可以看成广义上的基因重组。影响转化的因素有:供体细胞 DNA的纯度。DNA越纯,转化率就越高。两种细菌的亲缘关系。亲 缘关系越近,转化越容易。受体菌状态。只有处于感受态的受体菌才能被转化。2) R 型肺炎双球菌如何转化为 S 型肺炎双球菌?加热灭活的S型细菌遗留下各个 DNA片段,其中包括控制荚膜形成
5、的基因,这些片段从S细菌中释放 出来,并且在后继的培养中被一些 R型细菌所摄取,进入 R型细菌的细胞中,以同源重组的置换方式,整合 进入R型细菌的基因组中,使 R型细菌转化成S型细菌。可见,转化后形成的S型细菌内含有两种 DNA( R 型和 S 型)。5从实验学角度1)实验构思 该实验设计中最关键的思路是什么?从活的S型细菌中提取、分离和鉴定出各种成分,分别与R型细菌混合培养,并观察其后代是否有 S型细菌出现。(2 )实验过程(3)实验对照分析在体内转化实验中,之间形成相互对照,每一组既是实验组,又是其他组别的对照组。在体外转化实验中,该实验所研究的实验因素为DNA,故用DNA处理的组为实验组
6、,而蛋白质或多糖虽然是实验所实施的处理因素,但与实验因素(DNA )无关,故组之间形成条件对照,其中组为 实验组,组为对照组;而组和组之间形成空白对照,其中组为实验组,为对照组。(4)实验结论 利用该实验能否证明蛋白质不是遗传物质?S型的蛋白质与R型细菌混合后,培养该实验能证明蛋白质不是遗传物质,因为在体外转化实验中,用 基中未出现S型菌落,说明蛋白质不是转化因子。例1 (原创)肺炎双球菌转化实验中,将加热杀死的S型细菌与R型活细菌相混合后,注射到小鼠体内,)*含在小鼠体内S型和R型细菌含量变化情况如图所示。下列有关叙述中错误是的(A .在死亡的小鼠体内存在着 S型和R型两种细菌B .曲线ab
7、段下降的原因是R型细菌被小鼠的免疫系统所消灭C.曲线be段上升,与S型细菌在小鼠体内增殖导致小鼠免疫力降低有关D . S型细菌数量从0开始是由于R型细菌突变的结果解析:本题以经典实验为素材,综合考查R型和S型细菌的特点及细菌发生转化的原因,引导学生对教材实验作进一步思考。 R型细菌的数量与小鼠免疫力有关,S型细菌的产生是由于 R型细菌转化的结果,而 非基因突变所致。答案为 D。例2 (原创) 证明DNA是遗传物质的肺炎双球菌体外转化实验中,设置了以下几组:ffiS型细菌的蛋白质+R型活细菌兰整S型细菌英膜的多糖祢型浮田菌TR型菌落;©S型细菌的DNA+R型活细菌空©S型細菌的DNA+DKA水解酶+R型活细菌 翹兰下列有关叙述中,错误的是A .该实验设计的关键是将细菌的各组分分离开来分别进行实验B .组之间形成条件对照,其中组为对照组,组为实验组C.和组之间形成空白对照,其中组为实验组,为对照组D .实验成功证明了 DNA是遗传物质,但不能证明蛋白质和多糖不是解析:该实验所研究的实验因素为DNA,故用DNA处理的组为实验组,而蛋白质或多糖虽然是实验 所实施的
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