龙牙百合原生质体制备与电融合条件初探

1、 JIANGXINORMALUNIVERSITY本科生毕业设计(论文)过程管理手册 学号：0908180009学生姓名：程思睿选题编号：届别：2013学院：生命科学学院 专业： 生物工程 指导教师姓名及职称： 指导教师姓名及职称： 评阅教师姓名及职称： 江西师范大学教务处制说 明1.任务书由指导教师与学生共同商定，并由指导教师填写，经学院毕业设计(论文)工作指导小组(教研室)审核后，发至学生手中；2.学生应认真撰写毕业设计(论文)的开题报告，做好各阶段进展情况记录及个人工作总结；3.本手册中各部分内容应填写完整，签名齐全;4.本手册装订顺序为：任务书、开题报告、过程进展情况记录(含前期准备阶段

2、、撰写阶段、中期自查、完善阶段)、个人工作总结、形式审查表、指导教师评价表、评阅教师评价表、答辩评分及成绩评定表；5.本手册在毕业设计(论文)完成后，与毕业设计(论文)一起交指导教师，作为毕业设计(论文)答辩的主要档案资料，并由各学院保存至学生毕业后四年。江西师范大学本科生毕业设计（论文）任务书学号0908180009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探研究主要内容及基本要求研究主要内容：1 龙牙百合的组织培养技术研究2. 不同酶解时间对原生质体产量的影响；3. 纤维素酶和果胶酶不同配比对原生质体产量的影响；4. 原生质体电融合最佳条件的测定；基

3、本要求：1.实验操作正确、规范，实验结果记录完整；2.掌握原生质体制备的方法；3.掌握植物细胞组织培养技术；4.熟练掌握无菌操作；5.论文书写符合本科生论文形式要求。主要参考资料1 国家药典委员会，中华人民共和国药典：一部M.北京工业出版社，2005：12 涂鹏飞，何燕萍，楼之岑，肉苁蓉的本草考证J 中国中药杂志，1994,19(1):33 田爱梅，郑日如，王国强，陈发菊，曹家树，中国野生百合种质资源的研究保护与利用，安徽农业科学2007,35(31):9987-99904 张良波，李培旺，黄 振，李昌珠，木本植物原生质体制备体系的研究进展，中南林业科技大学学报 5 聂琼，刘仁祥，徐如宏，烟草

4、原生质体分离纯化条件的优化，贵州农业科学2012,40（9）：20-236 Davey M R,Anthony P,Power J B,et al.Plant proto-plast technology:Current statusJ.Acta PhysiologiaePlantarum,2005,27(1):117-129.7 于晓玲，李春强，彭 明，植物原生质体技术及其应用，中国农学通报 2009,25(08):22-268 李浚明编译.植物组织组织教程.中国农业大学出版社M.2002.第2版.1909 于立杰,王忆,许雪峰等.珠眉海棠根原生质体分离条件研究.干旱地区农业研究,2010,

5、28(2):118一1210 HoritaM,MorohashiH,KomaiF.RegenerationoffloweringPlantsfromdiffieilelilyProtoplastsbymeansofanurseculture.Planta,2002,215:880一88411 赵红娟,张博,陈爱萍等.酶解对首稽子叶原生质体分离效果的影响.草地学报,2008,16(1):50一5312 胡静,毛罕平.洋葱内表皮原生质体分离和纯化研究.江苏农业科学,2009,3:43一4513 张宁，崛江百合原生质体的分离与培养，华中农业大学硕士学位论文14 卢明艳.越橘原生质体分离纯化研究D.吉

6、林：吉林农业大学,2006，6（3）：43-4715 潘增光,邓秀新.苹果原生质体制备培养及植株再生J.园艺学报, 2000, 27(2): 95-101 16 涂艺声, 熊立亭, 冷 冰，3种杜鹃属植物原生质体制备纯化条件的研究，江西师范大学学报2009年4月第33卷第2期17 江 力,孔小卫,吴晓杰,李少松，烟草原生质体的分离纯化，安徽大学学报，2006年11月第30卷第6期 17 江 力,孔小卫,吴晓杰,李少松，烟草原生质体的分离纯化，安徽大学学报，2006年11月第30卷第6进程计划第一阶段：2012年09月01日-2012年09月30日，收集资料，确定指导老师和研究方向，开会选题。第

7、二阶段：2012年10月01日-2012年10月31日，查阅资料，进行总结；阅读分析文献，撰写开题报告。第三阶段：2012年11月01日-2012年11月30日，实验初期阶段，根据文献资料，设计实验流程。第四阶段：2012年12月01日-2012年12月20日，预备试验，领取实验材料，审定修改研究方案。第五阶段：2012年12月21日-2013年01月08日，确定试验方法，正式试验。第六阶段：2013年02月13日-2013年02月28日，论文前期准备工作，分析整理实验数据，着手写论文综述。第七阶段：2013年03月01日-2013年03月31日，撰写论文初稿。第八阶段：2013年04月01日

8、-2013年05月01日，修改论文，准备答辩。毕业设计(论文)工作指导小组 (或教研室)审核意见毕业设计(论文)工作指导小组组长(或教研室主任)签名： 年 月 日签名学生签名： 年 月 日指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）开题报告学号0908180009学生姓名程思睿学院生命科学学院专业生物工程选题编号届别2013指导教师姓名及职称涂艺声（教授）指导教师姓名及职称涂艺声（教授）中文题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探外文题目Preparation and fusion of protoplast of longya Lily optimization开题报告内容

9、见附件开题报告内容学生签名： 年 月 日指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录学号0908180009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探时间自2012 年 9 月1日 至 2012年 9月30日进展情况记录初始阶段：1.了解完成毕业论文的程序，选择感兴趣的研究方向，确定指导老师及论文选题；2.对学院老师的研究方向进行了解，确定导师，根据论文题目，搜集资料。根据老师提供的文献以及自己查阅相关的资料，了解课题的研究内容及发展方向；3.查阅文献资料，了解实验原理和技术； 4.植物原生质体就是除去细胞壁的具有生活力的“

10、细胞”。由于在原生质体制备的过程中,没有对细胞核内染色体及细胞质中各个细胞器进行操作,使得每个原生质体均含有该植物的全部遗传信息,并在适当的培养条件下能通过细胞壁再生、细胞繁殖、愈伤组织萌发或体胚发生、器官发生的途径再生得到与亲本性状相似的个体。5. 在作物杂交育种中，原生质体融合可以有效地克服有性杂交不亲和性以及花期不育等常规育种中所遇到的问题，并创造新的种质或优良的品种。学生签名： 年 月 日指导教师意见该生在这个阶段通过查阅了大量的文献资料，对原生质体有了较深的了解，并且在阅读资料过程中，了解原生质体制备的基本方法。指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录

11、学号0908180009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探时间自2012 年 10 月1日 至2012 年 10月31日进展情况记录撰写开题报告阶段：充分学习了有关文献和资料后，撰写开题报告。1.通过查阅国内外关于原生质体制备的文献和资料，了解原生质体的意义；2.通过查阅国内外关于制备原生质体的文献和资料，了解原生质体的研究进展；学生签名： 年 月 日指导教师意见该生能认真查阅文献，构思清晰，在独立完成工作时极为认真负责，能按要求完成开题报告。指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录学号0908180009学生姓

12、名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探时间自2012 年 11 月1日 至2012 年 11月30日进展情况记录实验初期阶段：1. 根据收集及查阅的文献资料和专业知识，准备实验材料，设计实验流程；2. 进行龙牙百合的组织培养，为实验准备材料。3. 开始实验，记录好实验数据。学生签名： 年 月 日指导教师意见该生做事严肃认真，实验方案具体可行，独立完成实验时实事求是，一丝不苟完成实验并做好相关记录。指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录学号0908180009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体

13、制备与电融合条件初探时间自2012 年 12 月1日 至2012年 12 月20日进展情况记录实验阶段：根据已经设计好的实验流程开始进行实验，并且及时的做好实验记录。 1. 不同酶解时间对原生质体产量的影响； 2. 纤维素酶和果胶酶不同配比对原生质体产量的影响； 3. 进行原生质体电融合的最佳条件；学生签名： 年 月 日指导教师意见该生在实验中勤思好问，实验态度严谨端正，按质保量完成预期实验目标。指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录学号09081810009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探时间自2012 年

14、 12 月21日 至2013 年 1月8日进展情况记录实验数据处理阶段：整理实验结果，做好数据处理；做好实验数据分析，准备写论文。1确定了酶液组成为1%纤维素酶+1%果胶酶时原生质体产量最高； 2.初步确定了最佳酶解时长为3.5小时； 3.初步确定了最佳电融合条件为交流电压 6V 持续时间50S 直流电压300V 脉冲时间25S 脉冲次数10次学生签名： 年 月 日指导教师意见这一时间段该生已经能完全自主独立里对实验进行分析和操作，完成实验的能力已经提高了很多，在整个实验过程中，一直认真负责，很细心的做每次检测，对于每个工艺的控制操作也很用心。很好的完成了最后的验证实验。指导教师签名： 年 月

15、 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录学号0908180009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探时间自2013 年 2月13日 至2013 年 2月28日进展情况记录论文初期：1论文前期的工作（包括初始阶段、撰写开题报告阶段、实验初期阶段、实验阶段、实验数据处理阶段），准备写论文。2着手写论文综述部分。本实验表明野生卷丹百合原生质体制备的最适条件为酶液组成为1%纤维素酶+1%果胶酶，最佳酶解时长为3.5小时，电融合最佳条件为 交流电压6V 时间50S 直流电压300V 脉冲时间25S 脉冲次数 10次学生签名： 年 月 日指导教师意

16、见该生在实验过程中每个操作步骤都非常认真细心，做事也很负责，已经能逐步单独完成实验，操作能力和分析能力进一步提高，对于实验的完成有了很大的帮助，在分析实验过程方面也愈来愈成熟，表现出了良好的分析能力。指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录学号0908180009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探时间自 2013 年 3 月1日 至2013 年 3月31日进展情况记录论文初稿：1已经进入了论文阶段，根据文献资料及实验数据，完成论文初稿；论文主要分为3章。第一章主要介绍原生质体制备的意义及国内外研究进展；第二章主要

17、介绍实验材料和方法；第三章是对结果的讨论，如不同酶解时长对原生质体产量的影响，不同酶液组成的酶解效果。2对论文进行查漏补缺，交给老师，请老师帮忙审查、更正。学生签名： 年 月 日指导教师意见该生在表现出了良好的分析能力和整理数据能力，对于数据的的分析非常到位，在许多不足的地方又认真负责的弥补，在数据整理方面很细心，能很好的按时完成。指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录学号09081800009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探时间自2013 年 4 月1日 至2013 年 5月1日进展情况记录论文修改：根据老

18、师指出的缺点和不足，自己认真修改、完善论文。 1根据老师提出的建议，完善了论文的综述部分，使本篇论文更加完整，更具有研究价值。 2根据老师提出的建议，对开题报告进行了完善和补充，使之更具有可读性。学生签名： 年 月 日指导教师意见该生能很好的同老师交流，在论文的撰写中非常认真细心，学习的态度端正，学习是很虚心的向老师，同学请教，这对于论文的撰写是非常有帮助的。指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）中期自查学号0908180009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探时间自2013 年 3 月10日 至2013 年 3月15日中

19、期自查在前期查阅大量文献后，初步掌握查阅文献资料对方法。设计好本次论文的实验流程，完成了正式实验，初步掌握了无菌操作的要求、培养基的配制方法及原生质体制备工艺，取得了以下实验结果：1.确定了离心的最佳条件；2.确定了酶液的最佳组成；3.确定了龙牙百合原生质体电融合的最佳条件；。 学生签名： 年 月 日指导教师意见该生做事认真负责，不但及时的完成自己的事情，并且在空余时间还会帮助同学做他力所能及的事情，在完成事情方面也非常细心，每件事情都考虑的很周到，对于实验的态度非常严谨和端正。指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）个人工作总结学号0908180009学生姓名程思睿专业生

20、物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探时间自2012 年 9 月7日 至2013 年 5月1日工作总结本毕业论文从2012年9月初开始，到2013年4月下旬结束。在这8个月的学习过程中，我得到了涂艺声老师的悉心指导和其他同学的热心帮助。通过完成本篇毕业论文，我从中学到了很多。我认识到科学研究要有严谨的态度及吃苦的精神，对所要进行的研究有一个清晰的认识，对实验数据要做到实事求是，对论文细节要求严格，对科学研究要持有不断完善的精神。我顺利完成本科论文的实验目标：1确定了酶液组成为1%纤维素酶+1%果胶酶时原生质体产量最高； 2.确定了最佳酶解时长为3.5小时； 3.确定了

21、龙牙百合原生质体进行电融合的最佳条件为交流电压6V 持续时间50S 直流电压300V 脉冲时间25S 脉冲次数为10次学生签名： 年 月 日指导教师意见该生实验工作时认真负责，细心的做着各方面的事情，态度端正，乐于学习，在遇到问题时能虚心向别人请教。指导教师签名： 年 月 日江西师范大学本科生毕业设计（论文）形式审查表学号0908180009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探形式审查内容（在是、否、无相应的空格里打“”，“否”指未达到规范要求，“无”指没有相应要求或项目）项目是否无封面填写完整正确（含外文题目）文稿为A4打印稿文字编排格式规范统

22、一有中文摘要（含中文关键词）中文关键词为35个有外文摘要（含外文关键词）有目录（标题文字、页码与内文相符）正文有小标题正文标点符号使用正确正文无错别字或病句参考文献有10篇以上参考文献含外文资料参考文献含最新期刊资料参考文献序号在文中有标注参考文献格式规范过程进展情况记录含中期自查过程进展情况记录含个人工作总结过程进展情况记录反映了学生的实际工作过程进展情况记录填写完整过程进展情况记录内容无逻辑错误图表设计与绘制规范附带了光盘等程序载体或电子稿已复制至学院指导教师审查意见形式审查合格（）不合格（）指导教师签名： 年月日核查意见形式核查合格（）不合格（）学院毕业设计(论文)领导小组组长签名： 年月日江西师范大学本科生毕业设计（论文）指导教师评价表学号0908180009学生姓名程思睿专业生物工程毕业设计(论文)题目龙牙百合的原生质体制备与电融合条件初探指导教师评语本论文是对龙牙百合原生质体制备以及电融合条件进行了优化。该生专业理论知识掌握较好。能查阅大量中外文献，实验动手能力较强。在毕业论文期间已基本掌握原生质体的制备方法，整个论文工作包括龙牙百合的组织培养、酶解条件的优化。能独立进行实验方案设计和操作，实验态度认真。在实验中遇到问题与老师讨论，提出解决的方法，分析问题和实验操作能力得到提高。论文条理清晰，讨论合理充分，格式规范。工作量饱满，符合本科论文要