BIO-RAD核酸蛋白测定仪操作规程-厦门大学医学院

1、核酸蛋白测定仪操作规程BIO-RAD Smarts pec TM plus厦门大学医学院中心实验室黄静茹2017年3月正式操作仪器之前请注意如下事项: 首先要在仪器预约保护时间内及时使用本人注册的校园卡刷卡开始实验。1. 查看仪器使用记录本，如之前使用者有记录仪器异常情况， 请不要开机使用。2. 查看仪器整体有无异常，周围环境是否正常，需要时要开启室内空调，检查并清空除湿机水箱。3. 查看仪器使用记录本 及刷卡机“日历”，如之前使用者刚刚关机，请等候 10分钟以上再开机使用。、开机打开仪器电源开关，仪器进行自检，显示屏显示主界面。二、仪器操作点击操作界面上按钮，选择目标程序:A. DNA/RN

2、AJNAOD600、DNA/RNA、 Protein、 Scan、 Kinetics、1、选择检测物质类型（dsDNA、ssDNA、RNA、DNA oligo 或 RNA oligo）a、按 Select选择检测物质 dsDNA, ssDNA 或 RNA，entertype of Nucl&ic flc-id：出心忖口接受或者修改换算因子:dsDNA: A260 1.0=50ug/ml ssDNA: A260 1.0=37ug/mlRNA:A260 1.0=40.00ug/ml口260 1.0=50. 00 LJg-52 - Is 匚口门V factor- OK?7ESb、按Select选择D

3、NA寡核苷酸或RNA寡核苷酸，enterSelect typ-e of Nucleic. n-.id：胴口 oligo2Bradford:检测595 nm吸光度Enter r-olarcoefin L-r-iuL?-cri： IJErit.en oliu riolpculanue i 9ht- 5 I9-701 e或者，选择系统自带方法计算摩尔消光系数和分子量,Select a ropthcrd to find冲 1 ext. c.cief Length只需输入序列(seque nee)长度(le ngth)或组成(com po sitio n), Smarts pecPlus会以g / ml

4、和pmol / l为单位显示出样品浓度，并计算摩尔消光系数和分子量。Enter ci 190 seuenceIEnter oligo lengthsEnter o 1 i 90 CGriFOs i 11 on: #fi：3 #1皐#中 #T：2、 将装有空白溶液的比色皿放入测定仪中，按 Read Bla nk:詁 键，获得吸 收值。然后将样品放入到测定仪中，按 Read SampI或魁键，获得数据。3、测定后光吸收和浓度数据会自动显示出，如果还有其它波长检测的数据，键查看即可。DNA oligo、RNA oligo浓度以 卩g/m或 pmol/卩1按 Abs ,为单位，按Cone键进行两种单位

5、的转换。按A260/A280 看DNA、RNA纯度。如果稀释因子不是 1.0,按Dilution Factor键查键设定稀释因子。4、光吸收或浓度值显示出来之后，按Enter键返回到Ready界面，或直接放入下一个样品按Read Sample继续读数。测定完成后，按左箭头键退出程序，并打印数据报告。B蛋白质Protein1选择检测方法Sele匚t assay：BCRLowry :检测750 nm吸光度BCA :检测562 nm吸光度UV :检测 260、280、320 nm 吸光度其它：用户指定吸收波长2、选择是否扣除背景。如果是，选择指定背景波长，背景波长离测定波长约 200-300nmDo

6、 you uant to sutitr-act. bach: grourid read i 厂心？NOEriter- i.ia.elength for- the bad；grciund reading: g 门闻3、选择制作标准曲线a、新建一个标准曲线Du(lant t口 Fiake anei-i STANDARD 匚廿虫？ 7ES输入空白重复数目，依次放入空白样品，按Read Bla nkEnter number- of blank REPLICATESIInsert Blank #1/1 ard PRESS Read Blank?输入标样梯度数目Enter the number 匚岸STf

7、iHDRRDS 2-9；：选择标样浓度单位Se 1 ect c.nncentrat i 门 units： ngFill选择标样是否有重复，重复数目是否相同，输入每个标样重复数目Are any STflNDfiRDS to be read in replicate? YESSar-ie 门LJ出日r REPLICATES for- each STflHCflRDTVESEnter +-heofstandhrd replicates： I然后输入第一个标样浓度，放入第一个标样，按Read Sample键读取数据。Enter- coricentr-at- i on 匚甫STANDARD 41=1In

8、sert REP #1 of STD #1 and PRESS 依次将所有标样读取完成后，选择是否调整标曲，是否查看标曲信息，选择是否保存标曲。Cc you wish to ncdify the standard 匚urve? HOWartt. to .Jieu info 门 new STD CURUE nohj? HOEtar-idard cijrue? tESb使用原有标准曲线Dn ynu i.iarit- to recall a stoned Std curve? VESSe 1 ect 匚UWE: Bradford Std cur-e #1 djpC、无标准曲线。Smarts pec

9、Plus系统不能将吸光度转换成浓度CanncEt calculate cone without St r-Ejp0F：?uE5C.波长扫描Scan愛1设置扫描上限、下限（系统工作波长范围200-800 nm）scanning at 200 nr/Erid scanning 309 rm2、选择是否扣除背景。如果是，选择指定背景波长，背景波长离测定波长约 200-300nmDo you b.iant to subtract backr-ound neading?VESEnter uauelen9th for the backGround readin9S 0 门円73、选择快速扫描或慢扫描S?l

10、ect type uf scan：S1 oi-i4、对于快速扫描，选择连续扫描次数Enter th芒 rnjpiber of successik-e scans (l-S)：!D.动力学分析Kinetics1选择需要收集的波长ripiE门tt广 readiri9 uauelenath for k ineti匚 assay: 2、选择数据收集时间Enter- duratiori of time-d assays |secjnds3、选择连续收集时间间隔Eriter- interjal of d日t日 collections| sec4、选择是否扣除背景。如果是，选择指定背景波长，背景波长离测定波

11、长约 200-300nmDo you want to subtract b jck9r-ound neadin3?7ESEnter wave length for the back Sr-ound r-ead i r-i90 rimE.OD600菌液浓度测定1接受或者修改换算因子(A600 1.0=5.00e008cell/ml)0600 l.U=5.00e00Scell/r-il Is this factor OK.八/E匕2、将样品放入样品仓，按 Read Sample键读取数据。重复本步骤直到所有样品吸光度收集完毕F入1选择需要收集的波长数目Enter nuttier- (1-3? of ijauelengths to read； 12、指定收集的波长Enter361 nri3、选择是否扣除背景。如果是，选择指定背景波长，背景波长离测定波长约土 200-300nmDu you i.jant to backr-ound囁？E5EntE广 wmjElength for the back 9r-oijnd read i n9： 0 rim二、关机关机前请查看放在实验台上的刷卡机“日历”，如紧接着有其他人员将使用该仪器，请不要关闭电源，联系后面使用者。无人接着使用，则关闭仪