水稻细菌性条斑病监测方法

1、水稻细菌性条斑病监测方法（试行）为规范水稻细菌性条斑病疫情监测工作，及时掌握疫情发生、发展动态，特制定本方法。本方法规定了水稻细菌性条斑病监测区域、监测布点、监测时期、监测方法等。本方法适用于我省各地水稻细菌性条斑病的监测。1 监测准备收集当地水稻等植物的种植情况，水稻细菌性条斑病发生历史和现状等有关资料；制定简便易行的水稻细菌性条斑病监测计划。2 监测区域 重点监测疫情发生高风险区域，如：从疫情发生区调入水稻的种子及产品的地区，水稻植物种子繁育基地等高风险区域。主要监测水稻细菌性条斑病的发生发展情况。3 监测作物 重点监测水稻植物。4 监测工具剪刀、取样袋、手套、鞋套、小镊子、荧光记录笔、标

2、签纸、记录表、消毒液等。5 监测时期在水稻四叶期、拔节期、孕穗至抽穗阶段、齐穗后至叶片枯黄前，对水稻秧田和本田进行田间症状目测踏查。发现感染水稻细菌性条斑病典型症状和疑似症状的植株叶片，则取样送实验室检验鉴定。6 监测方法6.1未发生区6.1.1 访问调查向水稻种植户、农技人员等相关人员询问有关水稻植株矮缩和非正常枯萎的情况，初步了解疫情可能发生地点、时间、危害情况。对询问过程发现的水稻细菌性条斑病可疑性地区，进行深入重点调查。6.1.2踏查 在水稻作物生长期进行2-3次踏查，代表面积占种植面积的50%以上。踏查发现可疑病害症状立即进行标记，踏查结果记入水稻细菌性条斑病监测调查记录表（见附表1

3、）。6.2 发生区6.2.1 发生区范围监测采取访问调查和踏查方法（具体方法见6.1.1和6.1.2），发现可疑疫情进行定点调查。6.2.2 发生区发生动态监测采取定点调查法。每县选3-5个调查点，在水稻四叶期、拔节期、孕穗至抽穗阶段、齐穗后至叶片枯黄前进行调查。填写水稻细菌性条斑病监测调查表（见附表1）。7 疫情诊断7.1现场诊断整个水稻生育期的叶片均可受害。病菌侵入后，开始显症为细小水渍状短条点斑，渐形成叶脉间透明条斑，后由于受叶脉限制，形成宽约0.25 mm，长约1 mm-5 mm的条斑，随后，单个病斑可扩大到宽1 mm、长10mm以上，颜色由黄转黄褐色，对光观察呈油渍状半透明。病情严重

4、时，多个条斑融合、连接在一起，形成不规则的黄褐色至枯黄色斑块，导致病叶枯萎，变褐，最后死亡，后期的症状与白叶枯病有些相似。湿度大时，病斑出现许多黄色菌脓，干燥后呈鱼籽状。现场难以确诊的，取样送实验室鉴定。7.2室内鉴定经现场检验检测，初步确定为细菌性病害，但不能确定为水稻细菌性条斑病的，取样带回实验室进行检测鉴定，难以鉴定的送省级植物检疫机构和指定的科研院校进行鉴定。目前主要根据田间症状、菌落形态特征、生理生化性质、致病性测试、血清学反应和PCR技术进行鉴定。8 监测记录详细记录、汇总监测区内各调查点结果。监测结果记入水稻细菌性条斑病监测调查表（见附表1）。并将原始记录表连同照片、影像等其它资

5、料妥善保存于县级植物检疫机构。9 监测报告县级植物检疫机构对监测结果进行整理汇总形成监测报告，并按要求逐级报送上级植物检疫机构。附表1 水稻细菌性条斑病监测调查表监测单位（盖章）：调 查 地 点县（市、区） 镇（街） 村调查地经度 ° 调查地纬度 ° 调查方法调查作物品种作物生育期调查面积（亩)发生面积（亩)发病株率（%）*本年度最早发病时间发生情况（级）调查人调查时间年 月 日备注注：1. 在水稻四叶期、拔节期、孕穗至抽穗阶段、齐穗后至叶片枯黄前各调查一次。2. 带*项为初次发现该有害生物的监测点填写。附录1 水稻细菌性条斑病鉴定检疫及防治一、学名及分类地位病害英文名 B

6、acterial leaf streak of rice学名 Xanthomonas 0ryzae pv.oryzicola (Fang et al.) 1990分类地位 薄壁细菌门（Gracilicutes）假单胞菌科（Pseudomonaceae）黄单胞菌属（Xanthomonas）二、病害症状，水稻细菌性条斑病主要为害水稻叶片，幼龄叶片最易受害。病菌多从气孔侵入，还可由伤口侵入，病斑局限于叶脉间薄壁细胞，初为深绿色水渍状半透明小点，逐渐向上下扩展，成为淡黄色狭条斑，由于受叶脉限制，病斑不宽，但许多条斑可连成大块枯死斑。对光观察，病斑部半透明，水浸状，病部菌脓多，色深，不易脱落。水稻在孕穗

7、期可见到典型症状。三、危害情况水稻细菌性条斑病是继白叶枯病之后的又一重要细菌性病害，主要发生在热带和亚热带地区的水稻上，籼稻通常极为感病，多数粳稻的抗性都很强。籼稻因病造成的损失在5%-20%左右，严重时可达50%。四、病原特征本病由水稻黄单胞杆菌稻生致病变种所引起, 菌体短杆状, 两端钝圆, 单生, 也有双链, 不成串, 菌体一端着生一条鞭毛。细菌在培养基上菌落圆形, 边缘整齐, 稍凸起, 表面光滑发亮, 蜜黄色并带粘性, 好气性, 在28下生长良好。菌体较白叶枯病菌体为小, 生理生化反应与白叶枯细菌基本相似; 不同之处在于条斑菌能使明胶液化, 使牛乳胨化, 使阿拉伯糖发酵变酸, 对青霉素和

8、葡萄糖反应钝感。五、传播途径病田收获的种子、病残株带病菌，为下季初侵染的主要来源。病粒播种后，病菌侵害幼苗的芽鞘和叶梢，插秧时又将病秧带入本田，主要通过气孔侵染。在夜间潮湿条件下，病斑表面溢出菌脓。干燥后成小的黄色珠状物，可借风、雨、露水、泌水叶片接触和昆虫等蔓延传播，也可通过灌溉水和雨水传到其他田块。远距离传播通过种子调运。六、境外分布最早主要发生在于菲律宾。主要分布于亚洲的越南、柬埔寨、泰国、马来西亚、菲律宾、印度尼西亚、尼泊尔、孟加拉国、印度；非洲的塞内加尔、喀麦隆、尼日利亚、马达加斯加、大洋洲的澳大利亚和美洲的哥伦比亚等国。七、寄主范围除为害水稻外，茭白、李氏禾和许多野生稻等均可受侵染

9、而发病。八、检验方法产地检验：在国内调种引种前，尽量到产地作实地考察，尤其在孕穗抽穗期，对繁种田块作产地检疫，十分有效且完全必要。种子检验：对调运中的种子，按种子量的0.1%-0.01%作抽样检查，种子样品作下列程序的检验。取种子100-500g，脱壳或粉碎后用0.01mol/L pH7.0磷酸缓冲液按1：2比例浸泡2-4h（4），过滤或离心，上清液经高速离心浓缩（1000r/min,10min），得上清液和沉淀两部分。上清液用于噬菌体检测，沉淀经悬浮后作血清学检验和接种试验。也可用常规的种子分离法检验或者种子育苗检验。噬菌体检验： 分别于3个培养皿中加上清液和指示菌液各1ml和指示剂1ml，

10、混均后加NA培养基，摇匀后在26恒温下培养12-16h，如出现噬菌斑，即可判断该种子来自病区。致病性检验: 取沉淀和悬浮液用针剌法接种在感病品种（汕优63）5-6叶龄稻叶上，若有病菌，5天后即可出现透明条斑。免疫分离检测：利用抗血清对病原菌的专化吸附功能，将样品中的细菌吸附在固相载体上，通过半选择性培养基，使细菌在半选择性培养基上长出特征性菌落，即可证明种子样品是否带菌。该病菌属国内植物检疫性病害，同时也是中南、中匈、中罗植检植保双边协定中规定的检疫性病害。九、防治方法1.加强检疫，水稻细菌性条斑病是国内检疫对象。在无病区, 严格执行检疫制度, 以控制病害的传播和蔓延。尤其是在市场经济条件下, 农资经营放开, 种子经营流动性大, 这项工作显得更加重要。2.选用抗病良种，不同品种的感病和损失程度不同。籼稻品种绝大多数感病,粳稻通常较抗病。3.培育无病壮秧，选用无病种子, 培育无病壮秧, 选择背风向阳、地势较