实验室生物安全手册

1、实验室生物安全手册科左后旗妇幼保健所检验科目录一、临床实验室生物危害性的评估 - 64二、实验室设备与设施 -65三、实验室与仪器设备危害相关的危害 -65四、微生物操作规程和规范 -65（一）实验室安全技术操作规程 -651、常规微生物操作规程中的安全操作要点652、特殊的安全操作规程 -66五、健康和医学监测 -68六、安全组织和培训 -68（一）、生物安全委员会 -68（二）、保障人员的安全准则 -681 、生物安全管理制度 -682 、实验室的安全管理程序 -69（三）人员培训计划 - 71七、废弃物处理 -71八、意外事故应对方案和应对程序 -72九、化学试剂、火和电的安全 - 78

2、1、防水灾、防火灾、防电害、防盗程序2、有毒品、强酸、强碱等安全管理程序一临床实验室危害性评估科左后旗妇幼保健所临床实验室危害性评估小组组长：秦岭副组长：张春玲孟玉莲李永山白那顺组员：李媛媛苏高原包晓华东智生物危害评估是临床实验室生物安全工作的核心内容， 是实验室分级管理的重要前提。临床实验室生物危害评估应 建立在对于特定实验室工作全面了解的基础之上并由有资 力人员进行。微生物的致病性是影响生物危害评估最重要的 决定性因素。根据病原体的毒力、感染的后果（包括发病率） 流行性、感染发病的剂量、实验室和社区中的感染途径或传 播方式、宿主范围、病原体在实验室环境中的存活能力以及 有无有效的预防治疗手

3、段等分析评估微生物相关的特定的 实验室危害。当实验室活动涉及传染或潜在传染性生物因子时，应进 行危害程度评估。生物危害评估不仅有助于确立实验室标准 化操作程序，有助于实验室的合理设计与布局，有助于实验 设备和安全设备的正确配置与有效使用，而且有助于在工作 过程中对于标准操作程序以及实验室设备、设施的配备是否 恰当和使用的有效性进行评价与改进。所以，生物危害评估 活动应是一个动态的、不断完善的过程。1 1、生物因子种类：对有传染性标本的检查可能含有如 人类免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、梅毒螺旋体、淋球菌、 支原体、衣原体、结核杆菌、乙肝病毒、甲肝病毒等。2 2、 来源： 临床实验室在工作过程中可能

4、造成实验室环 境的污染，如离心、混匀、制片、移液、加样等可产生气溶 胶污染，标本喷溅等可直接污染皮肤黏膜及实验台面和地面 等。另外，由于室内环境空间的限制，设备、人员拥挤以及 通风换气不充分等都可能使实验室内病原体的浓度增加，使 人群在室内被污染的机会明显大于室外。另外，啮齿动物、 昆虫等也都可携带传播微生物病原体，给实验室工作人员健 康带来威胁。比如对患者的血液、体液、分泌物、排泄物等 标本处理时产生的高浓度气溶胶。由于病原微生物的来源广泛，所以在临床实验室的各个 岗位均存在安全风险，对检验人员及其他相关人员均存在潜 在危害。a.a. 静脉采血岗位针刺接种：注射器针头刺伤，特别是在采集患者血

5、液以 后的针头刺伤可能使被刺伤者发生职业暴露。采血者刺伤自 己的风险较大。喷溅或泼撒污染：可能由于针头意外脱掉而发生血液喷 溅，也可能由于容器倾倒而出现血液泼撒，这两种情况均可 造成皮肤或粘膜污染暴露。气溶胶污染：在拔出采血针头时、在向容器内注入血液 时，特别是在注入血液时发生针头脱落可形成大量的气溶胶 粒子，易造成呼吸暴露。b.b. 标本运送岗位 院内标本运送过程中， 一般致病微生物可能通过经口、经粘膜或破损皮肤等途径导致传染的发生。泄漏和泼撒污染：容器破裂可造成标本泄漏污染环境和 运送人员或其他人员；容器倾倒可造成标本泼撒而致环境和 人员污染。容器表面污染：标本采集时或发生泄漏、泼撒时可导

6、致 容器外表面污染而具有潜在危害。c.c. 标本接收岗位 主要是运送标本泄漏、泼撒及容器外表面污染造成的工 作人员接触污染，一般情况下工作人员需穿工作服、戴手套 上岗。在疑为高致病性病原体感染时， 需特别注意呼吸道传播， 尤其是泄漏或泼撒后的气溶胶污染造成的播散。d.d. 标本离心岗位 离心时可能喷射出气溶胶粒子，特别是在离心结束前的制动过程中以及在打开试管盖帽等时均可产生大量具有潜 在感染性的气溶胶颗粒。泄漏污染：玻璃离心管可因为破碎造成标本泄漏；离心 管内标本盛装过满可造成泄漏。在手工开盖时可发生血标本 污染手指或环境；凝集试验可造成标本滴落污染台面或手指 等；标本管破裂、倾倒可产生血液泄

7、漏污染。e.e. 血细胞学检测岗位 在非自动进样的血球计数仪进行血液细胞学分析时，标 本混均及手工开盖时可产生气溶胶颗粒；手工细胞学复检制 片时可产生气溶胶颗粒。在手工开盖时可发生血标本污染手指或环境，手工细胞 学复检制片时可污染手指或环境；标本管破裂可产生血液外 泄。f.f.体液检测岗位 标本污染：体液标本，特别是部分由患者自己采集的体液标本如尿液、粪便、前列腺液等常存在容器外表面污染； 制备涂片时标本污染手指。泄漏污染：标本倾倒造成泼撒；容器破裂造成外泄；干 化学检测试条携带污染。气溶胶污染：在制备涂片及干化学试条蘸取标本时可产 生气溶胶颗粒。g.g. 酶联免疫吸附试验手工检测岗位 气溶胶

8、污染：使用加样枪加样时可产生气溶胶粒子，特 别在吹出最后一滴液体时，手工洗涤时可产生气溶胶粒子。泄漏和泼撒污染： 手工加样可发生样本滴落污染台面等； 加样时可发生反应板表面污染，洗板时可发生洗液污染反应 板表面；标本管破裂、倾倒可产生血液外泄。h.h. 胶体金免疫试验检测岗位 气溶胶污染：使用加样枪加样时可产生气溶胶粒子，特 别在吹出最后一滴液体时。泄漏和泼撒污染： 手工加样可发生样本滴落污染台面等；加样时可发生反应板表面污染；标本管破裂、倾倒可产生血 液外泄。i.i.仪器维修、维护岗位表面的污染：仪器外表面可附着有各种生物因子；临床 标本对流经的管道可造成污染。气溶胶污染：实验过程中产生的气

9、溶胶可在环境中长时 间存在，其传染性即与粒子的物理性质有关，又与粒子中所 携带的致病微生物的特性有关；打开标本流经的管道时可产 生传染性气溶胶粒子污染j.j.清洁、消毒岗位气溶胶污染：任何布物等的抖动可产生气溶胶粒子；任 何带盖的容器在开启盖子时可产生气溶胶；任何污染的材料 的直接运送过程中可产生气溶胶。直接接触污染：任何实验室污染的废弃物在收集、归类 等时均可经直接接触造成操作人员的接触污染。泄漏和泼撒污染：容器破裂可造成生物材料的泄漏；容 器倾倒可造成生物材料的泼撒。刺伤接种：破碎的玻璃以及针头等尖锐物品可能造成工 作人员的刺伤，当其污染有生物因子时可能造成相应的直接 接种。另外，啮齿动物

10、、 昆虫等也都可携带传播微生物病原体， 给实验室工作人员健康带来威胁。3 3、传染性：由于临床实验室的标本来自不同的患者，其传染性和致病性也是未知的。工作人员在工作中都极有可 能接触到结核分支杆菌、 SARSSARS 病毒、人类免疫缺陷病毒、丙 型肝炎病毒、梅毒螺旋体、淋球菌、支原体、衣原体、乙 肝病毒、甲肝病毒等高致病性微生物，如人对乙肝病毒极易 感染，只需少量污血进入人体即可导致感染。4 4、致病性：临床实验室由于其规模、建筑布局、周围 环境、内部分割及通风条件等的不同而有不同的室内小气 候。室内小气候的好坏、优劣，对实验室工作人员的身体健 康有很大的影响。临床实验室也由于处理和检测的标本

11、不 同、检测项目和方法不同，其藏匿的具有潜在感染能力的微 生物的种类、数量和存在形式亦不同，再加上实验室工作人 员免疫状态的不同，均可造成实验室工作人员及相关人员的感染。5 5、传播途径：实验室获得性感染与在工作中直接接触、 使用含有传染性病原体的标本或生物材料等有关。最常见的 实验室获得性感染由上呼吸道吸入、经口食入、尖锐物品刺 伤接种及皮肤黏膜污染等形式的职业暴露所致。PIKEPIKE 对 39213921例报告的实验室感染分析表明， 其中 59%59%源自研究性实验室， 17%17%发生在临床诊断性实验室。大多数实验室感染由细菌、 病毒和立克次体引起。在这些实验室感染中气溶胶是最主要 的

12、传播途径，在实验室以外引起的感染中70%70%是由喷溅、针刺或切割伤所致。6 6、 致病因子在环境中的稳定性：病源微生物在环境中 有一定抵抗力比较稳定，比如结核杆菌在干燥空气中可存活 1 1 年以上。7 7、 预防： 工 作人员必须穿戴工作服、工作帽、口罩、 手套，做好安全防护；正确使用生物安全标志；采集血液时 必须做到一人一针一巾一带一片；工作流程必须合理，严格 管理人流、物流、标本流，禁止反复流动；清洁区、半污染 区、污染区三区划分明确；所有报告单消毒后发放；每天对 室内空气、操作台、地面进行常规消毒；所有检验科工作人 员在进入实验室工作之初应检测乙肝、丙肝病毒血清学指标 并保留血清，并应

13、注射乙肝疫苗，以后应定期每半年复检一 次。评估结果：科左后旗妇幼保健所检验科能够设置临检、 生化、免疫等科室，能够检测乙肝病毒血清学指标以及丙肝 等项目，有传染各型肝炎的危险性，现为 I I 级实验室。二、实验室设置与设施实验室设有常规室、 生化室、 免疫室和检验人员休息室。基本上做到正确分区。在各个检验室均有全自动检验仪器， 和基本安全保护设施消毒设备如紫外线消毒灯。三、 实验室 与仪器设备相关的危害如： 离心机在处理标本时易产生气溶胶；尖锐物品刺伤接种等。仪器外表面可附着有各种生物因子； 临床标本对流 经的管道可造成污染从而可能对检验人员及清洁 维护维修人员造成接触危害。四、微生物操作规程

14、与规范（一） 实验室安全技术操作规程A A、常规微生物操作规程中的安全操作要点1 1、禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入2 2、接触微生物或可能含有微生物的物品后，脱掉手套 后和离开实验室前要洗手并注意洗手的方法和质量。3 3、禁止在工作区吃东西、吸烟、处理隐形眼镜、化妆 及储存食物。也不可以在检验室的冰箱内存放物品，以免造 成交叉污染危害人员健康。4 4、以移液器吸取液体，禁止口吸。以免吸入口中，造 成直接危害5 5、尖锐器具的操作：如针头用后应放入锐器盒中禁止 盖帽。6 6、按照实验室安全操作规程，减少标本溅出和降低气 溶胶的产生。7 7、每天至少

15、消毒一次工作台，活性物质溅出后要随时 消毒。每天开始工作前用湿布抹擦一次；地面用湿拖把拖擦 一次，禁用干抹干扫，抹布和拖把等清洁工具各室专用，不 得混用，用后洗净晾干。下班时用 250-500mg/L250-500mg/L 有效氯溶液 或 0.1%-0.2%0.1%-0.2% 过氧乙酸溶液抹擦一次。地面的消毒：用2 2 倍浓度上述消毒液拖擦。8 8、所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行严 格灭菌 。以免造成实验室外污染。9 9、制定有效的防鼠防虫措施，如窗纱等。B B、特殊的安全操作规程1 1、工作人员应接受必要的免疫接种和检测（如乙型肝 炎疫苗、卡介苗等） 。2 2、必要时收集从事危险

16、性工作人员的基本血清留底， 并根据需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及 时处理。3 3、工作人员要接受有关的潜在危险性知识的培训，掌 握预防暴露以及暴露后的处理程序。4 4、严格遵守下列规定，防止利器损伤：（1 1）除特殊情况（肠道外注射和静脉切开等）外，禁止 在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能使用朔料器材 代替玻璃器材。（2 2）尽可能应用一次性注射器或真空采血系统，用过的 针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽、从注射器取下必须 置于利器盒或直接放入防穿透的容器中，禁止用手直接操 作。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特殊区域消 毒。（ 3 3） 尽可能使用无针注射器和其他

17、安全装置 （如真空 采血系统） 。（ 4 4）禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利 器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须严格消毒。8 8、实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒。9 9、人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇 报，并记录事故经过和处理方案。1010、禁止将无关动物带入实验室。五、 健康和医学监测实验室人员需严格遵守实验室规章制度以保障健康安全，工作人员应接受必要的免疫接种和检测（如乙型肝 炎疫苗）。并定期检测抗体及有无感染的情况。六、安全组织和培训（一）、生物安全委员会科左后旗妇幼保健所生物安全组织管理委员会组长：秦岭副组长：张春玲 孟玉莲 李永山 白那顺组员：李媛媛苏

18、高原包晓华东智（二）、保障人员的安全准则严格按照微生物操作技术规范、生物安全管理制度和实 验室安全管理程序进行操作是保障工作人员健康安全的准 则。1 1、生物安全管理制度实验室安全设施应完善。（1 1） 实验室内各工作室布局合理，应有清洁区、半污染区、污染区的划分。规模较小的实验室，也应有清洁区，作 为工作人员的生活区（工作室作为污染区，不得在其中饮水， 抽烟、进餐，不得将食品带进工作室）。（2 2）工作流程应合理，避免人流，物流、标本流过多的 反复、交叉流动。各室有各室的专用物品包括清洁工具（3 3） 通风设备应合理，保证工作室通风良好，温湿度适 宜。实验室应有不少于每天 3-43-4 次通

19、风换气次数。（4 4）建筑材料应符合国家有关标准和要求：实验室台应 防水、耐腐蚀、耐热；地面应平整、防滑、易清洁。（5 5）每个实验室出口应有洗手装置，最好为感应或脚踏 式开关。应用洗手液，避免共用肥皂时造成交叉污染。（6 6）应设置实施各种消毒方法的设施，对于小型实验室 也应按照规定进行严格消毒，合理应用消毒物品，至少有紫 外线消毒设备。（7 7）应有专门放置生物废弃物的容器。且废液必须经进 行消毒后送入指定地点销毁。2 2、实验室的安全管理程序为了加强对实验室的安全管理，确保医疗质量和医疗安 全，根据医疗机构临床实验室管理办法和病原微生物 实验室生物安全管理条例的有关规定，对实验室在医疗安

20、 全上特做如下规定：（ 1 1）禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊 情况须经实验室负责人批准后方可进入。（ 2 2）禁止非工作人员使用实验室仪器、设备及其他物 品；未经允许，非工作人员禁止翻阅实验室任何资料。（ 3 3）实验室各类测试数据、病人资料、记录和文件等 均按保密规定进行保管和使用，任何人不得擅自对外提供。 如发现泄密事故，应立即采取补救办法，并对泄密人员进行 严肃处理。（4 4）实验室的电、水、气设施必须按规定安装。（5 5）各类在用仪器设备和防护装置必须保持完好状态， 不准随意改动安全装置。精密贵重仪器和大型设备专人操作 和管理，未经批准不得擅自操作和拆卸。稀缺贵重物品材料

21、 和剧毒、易燃、易爆放射性等危险物品必须分类分柜存放， 专人管理。注意防水、防高温、防电火花、防晒，通风良好。（6 6）每天下班前，工作人员应关好水电、空调、电脑、仪器、火种、门窗等，确认无隐患后方可离去。节假日前各 室负责人应统一检查，落实值班人员和责任，消除不安全隐 患。（7 7）电炉、煤气炉使用时，工作人员不得离开现场。（8 8）贵重物品妥善保管，做好安全防盗措施。（9 9）做好消毒隔离工作，注意自身防护，防止传染病发 生。（ 1010）实验室要把安全知识、安全制度、操作规程等列 为实验教学内容之一。 对新进实验室的人员 （包括外协人员） 必须先经过安全教育，在掌握了安全操作技能，在掌握

22、了安 全操作技能和具有自我保护能力后，才能动手操作。实习和 进行人员必须在带教人员的指导下按操作规程进行试验，危 险性的试验必须有安全防护措施，需要有人监护。（1111）实验室发生事故后，工作人员应积极采取应急措 施， 报告实验室负责人和科主任。造成轻伤以上的事故或 被盗、水灾、火灾、爆炸、中毒等严重的安全事故要立即抢 救，保护事故现场，并立即逐级报告科主任、保卫等有关部 门和医院主管领导，不得隐瞒不报或拖延上报。（三）人员培训计划首先进行上岗培训包括对长期离岗或下岗人员的再上 岗培训，使将要进入检验室的工作人员熟知实验室的安全知 识，正确进行自身防护和实验室的现状。具体包括实验室设施设备（包

23、括个体防护装备）的安全使用、应急意外事故的 处理、实验室管理体系及技能培训。七、废弃物处理1 根据医疗废物类别，将医疗废物分类收集 . 包装， 使用后的一 次性医疗用品在包装前要进行消毒，毁型。2 在盛装医疗废物前应当对医疗废物包装物或者容器进行认证 检查，确保无损失 渗漏和其他缺陷。3 感染性废物，病理性废物 、损伤性废物、药物性废物不能混 合收集。 少量的药物性废物可以混入感人性废物， 但应当在标签 上注明。4 放入包装物或者容器内德感染性废物、病理性废物、损伤性 废物不得取出。5 盛装的医疗废物达到包装物或者容器的时，应当适用有效地 封口方式，是包装物或者容器的封口紧实、严实。6 包装物

24、或者容器外表面被感染性废物污染时，应当对被污染 处进行消毒处理或者增加一层包装。7 运送人员在运送医疗废物时，应当防止造成包装物或者容器 破坏和医疗废物流失、 泄露和扩散， 并防止医疗废物直接接触身 体。八、意外事故应对方案和应对程序（一）感染性物质运输程序程序：1运输前应将标本进行可靠包装。禁止使用皮氏细菌培养皿邮寄标本；禁止将干冰放入密闭的容器。2严格遵守运输有关规定3运输用于诊断的标本时应根据需要标记上“易腐坏” “干冰保存” 、“冷冻生物制品”或“易碎”等标志。4高致病性病原微生物检验标本的运输1 1）高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本的容器应 当密封或者包装材料应当符合防水、防破损

25、、防外泄、耐高 （低）温、耐高压的要求：容器或包装材料上应当印有国务 院卫生行政部门规定的生物危害标识、警告用语和提示用 语；2 2）运输高致病性病原微生物菌（毒）种或者标本，应当 不少于两人的专人护送，并采取相应的防护措施，严防发生 被盗、被抢、丢失、泄露事件。5病原微生物检验标本发生意外的处理1 1）泄漏事故：（1 1）立即消毒清洗发生泄漏污染的区域。 通知主管和主任。如果培养物发生泄漏或容器发生破损，应 对该区域进行至少十分钟的消毒清洗，直至气溶胶或飞沫已 经沉降。（ 2 2）吸净漏出的液体。 （ 3 3）清洗发生泄漏的区域 （4 4）尽可能使用漂白剂、酒精或苯酚对工作台进行消毒。2 2

26、）高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本在运输、储 存中被盗、被抢、丢失、泄露的，承运单位、护送人、保藏机构应当采取必要控制措施，并在 2 2 小时内分别向承运单位 的主管部门、护送人所在单位和保藏机构的主管部门报告， 同时向所在地的县级人民政府卫生主管部门或者兽医主管 部门报告，发生被盗、被抢、丢失的，还应当向公安机关报（二）意外事故处理方案和应急程序A A、疑有高致病性病原微生物的处理程序程序：1医疗机构临床实验室如发现疑有高致病性病原微生物 的标本，首先应报告领导，所领导应及时报告给当地卫生行 政部门；2严格按照病原微生物实验室安全管理条例的有关 规定将标本送往有资质的实验室进一步确诊；3按照病原微生物实验室安全管理条例的有关规定 及时将病原微生物菌（毒）种标本就地销毁或者送交保藏机 构保管。4被高致病性病原微生物污染的物品， 处理前必须经过 高压灭菌，包括用于隔离的设备和材料。B B、防止紧急意外事件的预案与流程1 1、当发生血样管打破，血样泼洒时，立即用l l ：5050 的8484 消毒液将污染的桌面或地面全部浸泡 3030 分钟，再擦拭干 净。2 2、当发生废弃针头剌破皮肤时，立即