米非司酮对早孕蜕膜及绒毛中雌孕激素受体的影响

1、    米非司酮对早孕蜕膜及绒毛中雌孕激素受体的影响杨雪峰任芬若白桦翟子江 【摘要】目的探讨米非司酮对早孕蜕膜及绒毛中雌激素受体(ER)、孕激素受 体(PR)的影响。方法取正常早孕人工流产、口服米非司酮并米索前列醇( 米索)后 各15例患者的蜕膜及绒毛，应用单克隆抗体链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(SP)免疫组织化 学方法及CHAMPION系列数字图像处理系统观察ER、PR的变化。结果人工流 产组蜕膜ER阳性细胞百分比为(61.13±4.75)%，PR为(61.33±5.45)%；米非司酮并米索 组蜕 膜ER为(33.40±2

2、.64)%，PR为(33.78±4.12)%，两组差异有显著性(P< 0. 005 )。人工流产组绒毛ER阳性细胞百分比为(38.81±4.31)%，PR为(31.13±4.78)%，而米 非司酮 并米索组绒毛ER、PR均无表达。结论米非司酮可使早孕蜕膜及绒毛中ER、 PR下降，可能与药物流产后子宫出血时间长有关。 【关键词】米非司酮蜕膜绒毛受体，雌激素受体，孕激素 Effects on decidual and chorial estrogen and progestogen receptor in early pregn ancy by mifepris

3、tone Yang Xuefeng,Ren Fenruo,Bai Hua et al The Third Affiliated Hospital,Henan Medical University,Zhengzhou 450052 【Abstract】 Objective To explore the effects of mifepristone on decidua l and chorial estrogen receptor(ER)and progestogen receptor(PR)in early pregnanc y.Methods 15 decidual and chorial

4、 ER and PR were observed respectiv e ly in ordinary induced abortion and treated by mifepristone and misoprotol P.O.w i th Streptavidin-Peroxidase(SP)methods and a series of CHAMPION digital draft pro cessor.Results Decidual ER positive cell percentage in ordinary ind uced abortion was(16.13±4.

5、75)%,PR was(61.33±5.45)%,decidual ER in treated by m ifepristone and misoprostol P.O.was(33.40±2.64)%，PR was (33.78±4.12)%.The re w ere significant difference in these two groups (P< 0.005).Chorial E R p ositive cell percentage in ordinary induced abortion was(38.81±4.31)% and

6、 PR wa s(31.13±4.78)%.But chorial ER and PR did not expressed in treated by mifepris on e and misoprestol group.Conclusion Mifepristone could make decidua l and chorial ER and PR expression less,which perhaps could be concerned with me torrhagia long time by drug induced abortion. 【Key words】 M

7、ifepristone Decidua Chorial Receptor,estrogen Receptor ,progesterone 米非司酮配伍米索前列醇(简称米索)抗早孕已广泛用于临床，成功率在90%以上，但其 流产后子宫出血时间长是目前尚未解决的问题。本研究采用免疫组织化学(免疫组化)方法测 定正常早孕人工流产(人流)和药物流产(药流)后蜕膜及绒毛中雌激素受体(ER)、孕激素受体 (PR)水平，探讨药物流产后出现子宫出血时间较长的可能机制，为临床防治药物流产后出血 提供理论依据，现将我们的检测结果报道如下。 1资料与方法 1.1研究对象 1999年1012月在我院妇产科门诊确诊为早孕

8、，采用药物终止妊娠的妇 女15例(药流组)，选择同期人工流产终止妊娠者15例(对照组)。两组对象均符合以下条件： 年龄1932岁；停经< 56d；平时月经规则；3个月内未用过甾体激素类药物；无 生殖道炎症和肿瘤。 1.2蜕膜及绒毛收集方法 药流组：晨7时服米非司酮50mg,12h后服25mg，连服2天，总 量 150mg。服药前后禁食2h。第3天晨7时服米索600g，8时来我院观察，孕囊排出后筛检绒毛 和蜕膜组织。如未见明显蜕膜排出时，即在常规消毒下刮宫取蜕膜。对照组：行常规负压吸 引术后收集绒毛和蜕膜组织。 1.3ER、PR免疫组化染色方法 采用ER、PR单克隆抗体免疫组化链霉菌抗生物

9、素蛋白-过氧 化酶连接法(SP法)。取材的蜕膜、绒毛立即置于10%甲醛溶液中固定，常规脱水，石蜡包埋 ，切片厚度5m，每张切片常规脱蜡和水化后进行如下处理：PBS液(pH7.4)冲洗3次； 加50l过氧化酶阻断剂，室温下孵育10分钟；PBS冲洗3次，加50l正常动物非免疫血清 ，室温下孵育5分钟，PBS冲洗1次；加抗50l，置于4冰箱中过夜；PBS冲洗3次， 加生物素标记的抗50l，室温下孵育10分钟；PBS冲洗3次，加链霉菌抗生物素蛋白-过 氧化酶溶液(SP溶液)50l，室温下孵育10分钟；PBS冲洗3次，加新配制的二氨基联苯胺( DAB)溶液100l；显微镜下观察，显色后流水冲洗终止显色、

10、脱水、封片。抗ER、PR单克 隆抗体、DAB溶液、SP免疫组化试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。 1.4CHAMPION数字图像处理系统 每张切片经CHAMPION系列数字图像处理系统处理。采 用阳性 细胞百分比法评定结果。阳性细胞为细胞核被棕黄色颗粒覆盖，并观察棕黄色颗粒的分布 及染色深浅。细胞核蓝色者为阴性细胞。计数100个细胞中阳性细胞数，得出阳性率。 1.5统计学方法 两组数据采用±s表示，两组间比较采用t检验。 2结果 2.1两组蜕膜中ER、PR水平 对照组蜕膜细胞胞核内ER、PR棕黄色颗粒较多，染色较 深。药流组染色细胞数及染色强度均少于对照组。两组ER、PR阳性 细

11、胞百分比差异有显著性(P< 0.005)，见表1。 表1两组蜕膜中ER、PR水平(%，±s) 组别 总例数 ER PR 药流组 15 33.40±2.64 33.78±4.12 对照组 15 61.13±4.75 61.33±5.45 t值 13.97 15.27 P值 < 0.005 < 0.005 2.2两组绒毛中ER、PR水平 对照组见少数绒毛细胞胞核内有棕黄色染色。药流组绒毛 细 胞中ER、PR均无表达。两组绒毛中ER、PR阳性细胞百分比差异有显著性(P< 0. 005)，见表2。 表2两组绒毛中ER、PR水平(

12、%，±s) 组别 总例数 ER PR 药流组 15 0 0 对照组 15 38.81±4.31 31.13±4.78 t值 36.03 25.23 P值 < 0.005 < 0.005 3讨论 3.1米非司酮对蜕膜ER、PR的影响 本研究发现，对照组大多数蜕膜细胞核被棕黄色颗粒覆盖，且染色深。药流组蜕膜EP、PR 染色的细胞数及染色强度均减少，其阳性细胞百分比与对照组有显著差异(P< 0 .005)，提示米非司酮可使蜕膜ER、PR水平下降。米非司酮为较强的孕激素拮抗剂，与PR结 合后，改变了PR的结构，或抑制PR基因转录，从而使胞浆合成PR减少1

13、。本研究 米非司酮使蜕膜PR减少的同时，ER也减少。这与既往多数文献报道不一致2，3， 与黄丽丽等近期研究结果相似4。 3.2蜕膜中ER下降与流产后子宫出血的关系 应用米非司酮后，蜕膜中ER下降，使雌激素不能发挥生物学效应，影响药流后子宫内膜创面 修复，同时降低子宫平滑肌对催产素的敏感性，使蜕膜不易排出而滞留宫腔，导致药物流产 后子宫出血时间延长。根据这一观点，我们在孕囊排出后加服小剂量雌激素，观察药物流产 后子宫出血时间，结果表明，加服雌激素后子宫出血时间及出血量明显少于未用药者。因此 认为， 药物流产后服用雌激素，可促使子宫内膜增生，尽快修复剥脱的内膜创面，缩短子宫出血时 间。 3.3米非

14、司酮对绒毛ER、PR的影响 米非司酮对早孕绒毛EP、PR的影响，国内未见报道，米非司酮抗早孕能否直接作用于绒毛， 观点不一。Shi等从妊娠蜕膜和绒毛组织PR含量及米非司酮作用后的变化推测，米非司酮不 能直接作用于绒毛5。刘伯宁根据米非司酮流产失败清宫者发现，绒毛退变重于 蜕膜，提示米非司酮能直接作用于绒毛6。本研究正常早孕绒毛中存在ER、P R，而服米非司酮后ER、PR均无表达，这提示米非司酮可直接作用于绒毛。因此认为，米非 司酮抗早孕的靶器官不仅仅是蜕膜，绒毛也是不可忽视的。 本研究结果提示，米非司酮可使早孕蜕膜及绒毛中ER、PR下降。受体水平下降可能与药流后 子宫出血时间长有关，其结果有待

15、于扩大样本进一步研究证实。 参考文献 1.Zayteseva TS,Goncharova VN,Morozova MS,et al.The effect of RU486 on pr ogesterone and estrogen receptor concentrations in decidua and placenta in early pregnancy.Humam Reprod,1993;48(8):1288 2.周剑萍，张俊慧，刘银坤，等.米非司酮对人蜕膜与绒毛糖脂及雌、孕激素受体的 影响.生殖与避孕，1996；16(5)：5357 3.董丽颖，周健，范正红.米非司酮对早孕妇女蜕膜组织甾体激素受体含量及血清 激素水平的影响.中国临床药理学杂志，1990；6(2)：65 4.黄丽丽，石一复，陈晓瑞，等.米非司酮抗早孕蜕膜雌、孕激素受体的免