核酸的提取及其组分的鉴定讲座

1、2021/8/121烦恼有何惧怕，既然躲不掉，就调好心态与它共存。心向阳光，何惧风霜。茫茫人海你我相遇就是缘分，欢迎下载！核酸的提取及其组分的鉴定核酸的提取及其组分的鉴定目的目的1.1.熟悉苯酚法提取动物组织中核酸的原理和操作方法；熟悉苯酚法提取动物组织中核酸的原理和操作方法；2.2.了解核酸的组成，掌握核酸组分的鉴定方法。了解核酸的组成，掌握核酸组分的鉴定方法。 原理原理蒸馏水研磨：破坏肝细胞蒸馏水研磨：破坏肝细胞水饱和苯酚：使蛋白质变性，与水分层，核酸位于水相水饱和苯酚：使蛋白质变性，与水分层，核酸位于水相 乙醇：沉淀核酸。乙醇：沉淀核酸。原理原理 核酸可被硫酸水解得到磷酸、戊糖、含氮碱基

2、化核酸可被硫酸水解得到磷酸、戊糖、含氮碱基化合物，根据这三种物质的性质特点可用不同的方法加合物，根据这三种物质的性质特点可用不同的方法加以鉴定：以鉴定：1磷酸磷酸：可与钼酸试剂作用产生黄色的磷钼酸铵沉淀。：可与钼酸试剂作用产生黄色的磷钼酸铵沉淀。PO43-+12MoO32-+3NH4+ +24H+=（NH4）3 PO412MoO36H2O+6H2O2嘌呤嘌呤：嘌呤碱可与硝酸银作用生成白色的絮状嘌呤：嘌呤碱可与硝酸银作用生成白色的絮状嘌呤银沉淀。银沉淀。3核糖核糖：与浓硫酸共热得到糠醛，后者与：与浓硫酸共热得到糠醛，后者与3，5-二羟二羟甲苯缩合而成绿色化合物。甲苯缩合而成绿色化合物。步骤 1核

3、酸的提取：核酸的提取： 取兔肝取兔肝1克，剪碎置于研钵中，加克，剪碎置于研钵中，加2ml蒸馏水研匀，再蒸馏水研匀，再加加2ml蒸馏水混匀。蒸馏水混匀。 取取15100mm短试管短试管1支，滴加匀浆液支，滴加匀浆液40滴（约滴（约2ml）。）。 向试管中加入向试管中加入90苯酚溶液苯酚溶液2ml，充分振摇，充分振摇5min（注意（注意手法，防止溶液溅出），手法，防止溶液溅出），3000rpm离心离心5min。 用滴管小心吸取上层水相至另一试管中（贴壁吸取，用滴管小心吸取上层水相至另一试管中（贴壁吸取，为避免吸到下层液，可留一些上层液在原试管内）。为避免吸到下层液，可留一些上层液在原试管内）。 加

4、入加入3 ml 95%乙醇，充分摇匀，直至絮状沉淀析出。乙醇，充分摇匀，直至絮状沉淀析出。 3000rpm离心离心5min，弃去液体，沉淀部分即为核酸。，弃去液体，沉淀部分即为核酸。 2核酸的水解：核酸的水解： 向核酸沉淀中加向核酸沉淀中加2ml蒸馏水，震荡摇匀使沉淀溶蒸馏水，震荡摇匀使沉淀溶解。加入解。加入10硫酸硫酸2ml，摇匀，于，摇匀，于沸水浴中加热沸水浴中加热7分钟分钟，冷却后备用。冷却后备用。 3核酸的鉴定：核酸的鉴定：磷酸的鉴定：磷酸的鉴定：测定管测定管对照管对照管核酸水解液核酸水解液1010- -5%5%硫酸硫酸- -1010 钼酸试剂钼酸试剂 10 1010 10 摇匀摇匀,

5、 ,沸水浴沸水浴5min5min试剂（滴）试剂（滴）管别管别嘌呤的鉴定：嘌呤的鉴定：测定管测定管对照管对照管核酸水解液核酸水解液2020- -5%5%硫酸硫酸- -20205 5AgNOAgNO3 310101010浓氨水浓氨水5 55 5 不可震摇！静置数分钟，观察结果。不可震摇！静置数分钟，观察结果。试剂（滴）试剂（滴）管别管别测定管测定管对照管对照管核酸水解液核酸水解液5 5- -5%5%硫酸硫酸- -5 5 3 3，5-5-二羟甲苯二羟甲苯 5 55 5 摇匀，沸水浴摇匀，沸水浴10min10min试剂（滴）试剂（滴）管别管别核糖的鉴定：核糖的鉴定：注意注意u苯酚、钼酸试剂及苯酚、钼酸

6、试剂及3，5-二羟甲苯等均有强烈的腐蚀二羟甲苯等均有强烈的腐蚀性，操作时务必小心！若接触到苯酚，立即用性，操作时务必小心！若接触到苯酚，立即用95酒精清洗。酒精清洗。u实验中用到的第一支试管（含苯酚），不要清洗，实验中用到的第一支试管（含苯酚），不要清洗，请直接放在走廊的红色小桶内。请直接放在走廊的红色小桶内。u提取核酸时，应选用短粗试管（提取核酸时，应选用短粗试管（15100mm）；鉴）；鉴定时则可以选用长试管（定时则可以选用长试管（15150mm）。）。92021/8/12n9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。2022-1-192022-1-19Wednesday, January

7、19, 2022n10、低头要有勇气，抬头要有低气。2022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022 10:11:50 PMn11、人总是珍惜为得到。2022-1-192022-1-192022-1-19Jan-2219-Jan-22n12、人乱于心，不宽余请。2022-1-192022-1-192022-1-19Wednesday, January 19, 2022n13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。2022-1-192022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022n14、抱最大的希望，作最大的努力。2022年1月19日星期三2022-1-

8、192022-1-192022-1-19n15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。2022年1月2022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022n16、业余生活要有意义，不要越轨。2022-1-192022-1-19January 19, 2022n17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。2022-1-192022-1-192022-1-192022-1-19谢谢大家谢谢大家102021/8/12n9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。2022-1-192022-1-19Wednesday, January 19, 2022n10、低头要有勇气，抬头要有低气。

9、2022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022 10:11:50 PMn11、人总是珍惜为得到。2022-1-192022-1-192022-1-19Jan-2219-Jan-22n12、人乱于心，不宽余请。2022-1-192022-1-192022-1-19Wednesday, January 19, 2022n13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。2022-1-192022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022n14、抱最大的希望，作最大的努力。2022年1月19日星期三2022-1-192022-1-192022-1-19n15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。2022年1月2022