中药中皂苷类化合物的抗氧化活性评价研究_第1页
中药中皂苷类化合物的抗氧化活性评价研究_第2页
中药中皂苷类化合物的抗氧化活性评价研究_第3页
中药中皂苷类化合物的抗氧化活性评价研究_第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1、中药中皂苷类化合物的抗氧化活性评价研究【摘要】目的以人参、西洋参、三七中的皂苷类化合物为研究对象研究其抗氧化性能。方法采用Photochemi-luminescence (PCL)抗氧化活性体外评价体系为分析平台系统考察皂苷类化合物的抗氧化活性,并利用DPPH法进行对照评价。结果人参、西洋参和三七95%乙醇提取的皂苷类化合物均具有一定的清除自由基活性,并且随着皂苷含量的增加,其清除自由基能力增强。结论PCL法成功应用于皂苷类化合物的清除自由基能力研究。 【关键词】 人参; 西洋参; 三七; 皂苷类化合物; 抗氧化活性The Antioxidative Activity Evaluations

2、of the Saponins in Traditional Chinese MedicineWANG Jing,LIU Chunming*,BAI Helong,LI Li(Changchun Normal University,Changchun,Jilin 130032,China)Abstract:ObjectiveTo explore the antioxidative activity of the saponins in Panax ginseng, Panax quinquefoljus and Panax notoginseng. MethodsPhotochemi-lumi

3、nescence (PCL) was applied to determine the antioxidative activity of the saponins for the first time, and DPPH method was developed for evaluating the scavenging activity of the extracts.Photochemi-luminescence (PCL) was applied to determine the antioxidative activity of the saponins for the first

4、time, and DPPH method was developed for evaluating the scavenging activity of the extracts.ResultsThe saponins of 95% ethanol extracts from Panax ginseng, Panax quinquefoljus, Panax notoginseng had obvious anti-radical capacity, the efficiency inereased with the contents of major saponins extracted

5、from plants.ConclusionPCL method is successfully applied to study the the antioxidative activity of the saponins.1 材料与仪器 实验所用液相试剂均为色谱纯试剂(Caledon LaboratoriesL Ltd公司,加拿大),0.45 m滤膜(安捷伦公司,美国),其它试剂为分析纯 (北京化工厂),用于PCL 分析的溶剂由AnalytikJena AG公司 (德国)提供。二苯基苦基苯肼自由基 (1,1 -diphenyl- 2 - p icryhydrazyl, DPPH)购于Sig

6、ma公司(美国)。人参切片、西洋参切片、三七根部药材均购于北京同仁堂大药房(长春分店),人参皂苷Rg1,Re,Rb1,Rb2,Rc,Rd和三七皂苷 R1对照品购于中国药品生物制品检定所。Agilent-1100高效液相色谱(安捷伦公司,美国);DU800紫外可见分光光度计(Backman公司,美国);旋转蒸发仪(上海爱郎仪器有限公司);S180H超声清洗器(Elma 公司,德国);BS 124S电子天平( Sartorius AG,德国);耶拿Photochem抗氧化剂与自由基分析仪(AnalytikJena AG 公司,德国)。2 方法2.1 样品溶液的制备分别精密称取人参、西洋参、三七药材

7、粉末 (0.15 mm粒径) 1.006 3 ,1.004 7 ,1.002 7 g。用30 ml,95%乙醇浸泡(2 h)超声提取 30 min,提取3次。将乙醇提取液过滤,减压回收乙醇,浓缩至干,残渣用甲醇溶解过 0.45 m滤膜,定容于10 ml容量瓶中,制得人参、西洋参和三七样品溶液。 分别精密称取人参、西洋参、三七药材粉末 (0.15 mm粒径) 1.005 6 g、1.004 8 g和1.006 9 g。用30 ml,95%乙醇浸泡(2 h)回流提取2 h,提取3次。将乙醇提取液过滤,减压回收乙醇,浓缩至干,残渣用甲醇溶解过 0 . 45 m滤膜,定容于10 ml容量瓶中,制得人参

8、、西洋参和三七样品溶液。 分别精密称取人参、西洋参、三七药材粉末 (0.15 mm粒径) 1.007 8 g 1.0063 g和1.006 0g。用30 ml,95%乙醇浸泡(2 h)60水浴温浸提取 2 h,提取3次。将乙醇提取液过滤,减压回收乙醇,浓缩至干,残渣用甲醇溶解过 0.45 m滤膜,定容于10 ml容量瓶中,制得人参、西洋参和三七样品溶液。2.2 高效液相色谱条件采用美国Agilent1100系统,DAD二极管阵列检测器。Agilent 1100 Series自动进样器;Agilent-C18 色谱柱 (4.6 mm 250 mm,5 m) (美国安捷伦),柱温 35。采用二元线

9、性梯度洗脱,流速为0.5 ml /min,流动相组成为乙腈(A),0.05%的磷酸水溶液(B),样品分析时间为50 min,样品进样量为10 l,检测波长为203 nm。流动相梯度:02 min,75%75%B;250 min,75%50% B。2.3 抗氧化活性的PCL法分析采用Photochem (Berlin, Germany)超快速抗氧化剂和自由基全自动分析仪,测定原理是由光化学法生成自由基,并利用化学发光法检测自由基。发光氨(Luminol)是一种光致化学发光物质,通过测量反应所生成的光强度来测量自由基的瞬间含量(光强与自由基含量成正比)14。在实验中使用有光化学激发作用的光敏剂(P

10、hotosensitizer,发光氨)激发反应分子,使之在紫外灯的作用下以比正常条件下快1000倍的速度发生氧化反应,迅速产生自由基。 采用PCL-ACW-Kit方法测量人参、西洋参和三七提取物中水溶性成分的抗氧化活性。首先,配置分析混合液为 1.0 ml 反应缓冲液,包括 0.1 mol/L Sodium Carbonate (pH 10.5)和0.1 mmol/L Na2-EDTA;1.5 ml ACW-diluent (water);1 mmol/L Luminol(25 l),作为光敏剂激发反应分子,使其迅速产生自由基,同时又作为光致化学发光物质。样品和标准品均为10 l。每个样品平行

11、测试2次。2.4 抗氧化活性的DPPH法分析二苯基苦基苯肼自由基 (DPPH) 是一种性质较为稳定的自由基,其溶液显紫色,在 515 nm处有最大吸收,当有自由基清除剂存在时,DPPH的单电子由于被配对,其浓度减小而使其颜色变浅,吸光度值变小,这种颜色变浅的程度与配对电子数成化学计量关系,因此可用比色法进行定量分析。清除剂直接作用于DPPH自由基,反应时间短,用分光光度计即可测定,该方法操作简单、直接、灵敏、快速,因此DPPH分光测定法在国内外广泛用于清除自由基物质性质的研究。 取0.1 ml样品溶液,加入2 ml的60 mol/L的DPPH溶液混匀,放置30 min,以原溶剂调零点,在515

12、 nm处测起吸光度为Ai;同法0.1 ml溶剂+2 ml DPPH溶液混匀测定吸光度极为Ac;0.1 ml样品溶液+2 ml溶剂混匀测定吸光度极为Aj。按下述公式计算其自由基清除率。 清除率(%)=1-(Ai-Aj)Ao100% IP()1-(Ai-Aj)/Ac100%,其中Aj反应样品自身对吸光度的贡献;Ai样品对DPPH作用后的吸光度数值;Ac为DPPH本身在测定波长的吸收。3 结果3.1 提取方法的确定人参、西洋参、三七的乙醇超声提取物以及对照品的液相色谱图示于图1。分别采用3种提取方法提取3种药材中的皂苷类化合物。结果见图2。对于3种药材,超声提取的效果均较好,皂苷类化合物含量较高,且

13、快速、安全、简便、溶剂消耗少,常温提取其成分又不会被破坏,这一结果与文献所报道一致15。3.2 自由基清除作用的评价研究3.3 提取物清除自由基能力的比较根据所测得到人参、西洋参、三七中的主要皂苷的总量(见图2)。同时结合提取物对自由基的清除实验,可以看出两个实验体系中所得到的提取物对自由基的清除效果基本一致(见图34)。对于三七的提取物来说,其清除自由基的效果随着皂苷含量的增加而显著增大,对于提取的皂苷含量,超声提取法回流提取法温浸提取法(见图2),其清除自由基能力也是超声提取法回流提取法温浸提取法(见图34)。而西洋参和人参提取物的皂苷含量和其清除自由基能力的趋势略有差别。实验结果表明,二者都是超声提取法提取的效果要高于回流提取;但在清除自由基实验中,回流提取法却表现出最好的清除自由基能力,超声提取法次之,但二者的差别较小;而对西洋参和人参来说皆是温浸提取法的提取的皂苷含量最低,其清除自由基能力也最弱。这可以说明皂苷的含量对于自由基的清除能力有一定的影响,而之所以在西洋参和人参的提取物中出现了皂苷含量与其清除自由基能力不相符的想象,有可能是由于回流提取法提取温度较高,提取的成分较复杂,对于自由基的清除能力产生了一定影响,这有待

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论