版药典表面微生物检测操作规程

1、精品文档题目：洁净区（室）表面微生物监测标准操作规程编码：颁发部门：质量部起草：日期:2015年 月 日修订日期：年 月曰审核：日期：2015年 月 日生效日期：2016年 月 日批准：日期:2015年 月 日发放份数：版次：第1版分发部门：质量部、中心化验室1.目的：建立表面微生物测试标准操作规程，保证测试人员操作规范化、标准化。2.范围：适用于洁净室（区）表面、设备以及与产品接触表面的微生物量的测试。3.责任：表面微生物检测员。4内容：4.1基本概念：4.1.1菌落:细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU.通 常用个数表示。4.1.2表面微生物：4.1.3表面微生物

2、菌落数：规定面积的洁净室（区）表面、设备以及与产品接触表面，用接触平皿法或 擦拭法检测的微生物的菌落数目，以个/皿表示。4.2测试原理：本测试方法利用接触平皿法或擦拭法收集洁净室（区）表面、设备以及与产品接触表面的微生物，经若干时间，在适宜的方法和条件下让其繁殖到可见的菌 落数，以平板培养皿中的菌落数来评定洁净室（区）表面、设备以及与产品接触 表面的微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。4.3测试方法：4.3.1使用的仪器设备和培养基：高压消毒锅：使用时应严格按照操作规程进行。恒温培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。培养皿:一般采用90m材15mm玻璃培养皿。使用前将培养皿置于160C干

3、 热灭菌120mi n。接触碟：一般采用栢5mm无菌接触碟。培养基:胰酪大豆胨琼脂培养基。将培养基加热熔化，冷却至约45C在无菌操作条件下将培养基注入培养皿， 每皿约精品文档15ml。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入32 C恒温培养箱中培养72小时若培养基平皿上确无菌落生长即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2-8C的坏境中存放。432采样点选择：洁净区微生物测试点选择表面微生物监测的采样点数目及其布局根据以下 几个方面设置：空调系统验证的结果房间的用途与产品的距离人流物流方向如何布点：对于同一洁净区，每个相同的取样物体在其不同的地方采2个样。 如墙面2个采样点，地面2个采样点，洁净区主要

4、设备2个采样点。注：表面微生物监测的取样点数应依下列因素确定：1.洁净区（室）的大小；2.设备、管路等的复杂程度；3.生产活动的重要性；4.易受污染的部位等。应考虑包含以下部位：每扇门、每个门把手、地板（至少两点）、 墙壁（不易被清洁/消毒的部位，至少 两点）、公用介质的管路（不易被 清洁/消毒部位）、生产设备的关键性部位（如灌装针、易与人员接触的塑料帘 膜、胶塞筒、传输带）等。根据洁净区内设施、设备等表面对产品和洁净室环境 的影响程度，通常将表面分为三类：关键表面（与产品、容器及密封件直接接触 或暴露于产品、容器及密封件的表面）一般表面（如设备的外表面、墙壁等）和 地板，并且分别设定不同的微

5、生物限度要求。表面微生物的每点取样面积宜控制在25cm2左右。为避免干扰，宜在生产 活动结束后取样。4.3.3采样方法：洁净区表面微生物测试方法。4.3.3.1接触平皿法：取样：表面微生物监测用于表面菌监测，接触平皿法广泛应用。取样时，打 开碟盖，无菌培养基表面与设备直接接触， 均匀按压接触碟底板，确保全部琼脂 表面取样后，需要立即用75%酒精擦拭被取样表面，以除去残留琼脂。收好的营养琼脂接触碟在32C培养72小时。精品文档4.3.3.2棉签擦拭法：按标准要求进入相应洁净区指定位置，用灭菌镊子夹取浸有无菌生理盐水（放在灭菌锅中于121C灭菌20分钟）的无菌棉签，管口处轻轻挤压多余的溶 液，擦拭

6、取样点表面25cm2的范围，来回涂擦5次，翻转取样棉签，再与前次擦 拭移动方向垂直来回涂擦5次。取样要求：取样过程严格控制操作过程微生物的带入，尽可能采用固定力度、擦拭速度和擦拭线路。取样后将取样棉签放入装有10ml采样液的试管中， 随即盖上无菌塞， 外用 牛皮纸包裹，用绳扎紧。在运送和存放过程中保持试管竖直，直至做完菌检。将取样后的采样管用力振摇3分钟以上，将管内溶液照微生物限度检查法（薄膜过滤法）进行检查，置于32C恒温培养箱中，培养72小时，计数。 洁净区微生物测试频率和限度日常监控一月一次级别接触碟栢5mmcfu/碟擦拭法（25cm2）AV1V1B55C2525D50505.偏差纠正一旦发现表面微生物检测结果超超出纠偏范围， 可以采用以下行动进行调查 和评估：检查取样和样品的处理是否正确，包括取样人员的资质是否确认；回顾最近一次的悬浮粒子数的检测结果；回顾最近一次的沉降菌的检测结果；检查人员的更衣程序是否正确；检查清洁设备和消毒剂的质量；查看操作员工