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文档简介
1、第i页乙酰氨基葡萄糖苷酶是什么乙酰氨基葡萄糖苷酶是一种用来检测肾损伤和肾小管的敏 感指标。也可以用来检查尿路感染和糖尿病肾痛早期诊断,它的临床意义通常在病理情况下出现, 如果其他检查正常,单靠乙酰 氨基葡萄糖苷酶偏高,建议低盐低脂高维生素饮食,戒烟戒酒。 接下来我们就详细的了解一下乙酰氨基葡萄糖苷酶的作用,应该注意什么以及它的检查方法。B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查的正常值 1、对硝基酚比色法:血清 NAG21.54 土 6.4U/L,尿液 NAG呈正态分布,中位数为 9.13U/g 肌酐,第 95 百分位数上限为 16.10U/g肌酐。 2、荧光光度法:成人血清:9.94 2.O7U/L。成
2、人尿液:6.39 3.19U/LCre。B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查的作用第2页血、尿 NAG 活性测定对反映肾实质病变,尤其是急性损伤和活动期病变更敏感,主要用于早期肾损伤的监测和病情观察。1、肾小管疾病重金属 (汞、铅、镉等 ) 及药物性肾损伤、 缺血、缺氧、失血、休克等均可引起NAG 舌性增加。 2、肾病综合征尿 NAG 常明显增加,缓解期下降,复发时迅速回升,故可作为临床观察指征。 肾小球肾炎急性期变化较大, 但与肾小管损伤相比,变化幅度较小。 3、尿路感染的定位诊断急、慢性肾盂肾炎尿NAGt 升,能与单纯性膀胱炎区别。可用于早期上尿路感染的诊断。 4、肾移植排斥反应的监测肾移植排斥
3、反应早期NAG 即可升高,比尿蛋白、血肌酐、肌酐清除率更敏感。 5、糖尿病肾痛早期诊断糖尿病肾病尿 NAG 升高,用于本 病的早期诊断优于尿白蛋白及B2-微球蛋白。B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶结果偏高可能有的疾病:肾病综合征 、 尿路感染第3页B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查需要注意哪些(1) 对硝基酚比色法:1基质对硝基酚应纯化,配制前置 50C烘 24h。用 10mmol/LNaOF 配成 0.04mmol/L 浓度,用窄带宽分光光度计扫描吸收曲线,入 max=401 nm 根据 IFCC 标准,A 入 max=0.73160.7388 , E 入max=18380 90(25 C)。2底物溶
4、解度小,配制时应先用适量 pH 4.6 缓冲液调成糊 状,再逐渐加缓冲液至所需量。3测定结果超线性范围时,应将标本用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。4尿酶浓度受尿量影响较大,应留取 24h 尿量。若以 NAG/g 肌酐比值计算酶排出率,即不受尿浓缩或稀释的影响,又不需留 24h 尿。(2) 荧光光度法:荧光法测 NAG 已有国产试剂盒, 其敏感度高, 不受尿色 干扰。第4页也可用上海第三分析仪器厂产 930 荧光光度计, 激发滤 光片 360,发射滤光片用 (400+450) 复合,效果满意。本法酶反应液中各成分浓度为:底物1.33mmol/L,枸橼酸 20mmol/L,Na2HPO43
5、2mmol/。配试剂所用溶剂应用重蒸馏水,底物应无游离4-MU,BSA 中应无该酶或用 50C加热 2h 灭活。血清中 NAG 于 4C稳定数小时至数天,-20C可稳定数 月。尿标本 4C稳定 1 周,也可用枸橼酸盐抗凝血浆。B-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二种酶催化水解,一种是B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.30),另一种是B-N-乙酰 已糖苷酶 (EC 3.2.1.52) ,只有对提纯的酶才能限定 EC3.2.1.30 或 EC3.2.1.52。目前国内文献中常称的 NAG 严格地说是按所 用底物命名的,而不是指酶对底物的特异性。 所以目前国外文献 常泛称B-N-乙酰氨基葡萄糖苷
6、酶。B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查的方法 (1)对硝基酚比色法混合,在 405nm 波长,1cm 光径,蒸 馏水调零,读取各管吸光度,用(AU-AC)之差查标准曲线。第5页基质对硝基酚应纯化, 配制前置50C烘24h。 用10mmol/L NaOF配成 0.04mmol/L 浓度,用窄带宽分光光度计扫描吸收曲线, 入max=401 nm 根据 IFCC 标准,A 入 max=0.73160.7388 , E 入max=18380 90(25 C)。根据对硝基酚的摩尔吸光系数底物溶解度小,配制时应先用适量pH 4.6 缓冲液调成糊状,再逐渐加缓冲液至所需量。测定结果超线性范围时, 应将标本用生理
7、盐水稀释后重 测,结果乘以稀释倍数。尿酶浓度受尿量影响较大,应留取 24h 尿量。若以 NAG/g 肌酐比值计算酶排出率,即不受尿浓缩或稀释的影响,又不需留 24h 尿。(2) 荧光光度法: 先将血清或尿用不含牛血清白蛋白 (BSA)的缓冲液作 20 倍稀释,混匀, 激发波长 364nm 发射波长 448nm 以终止液调零, 6 卩 mol/L4-MU 管调荧光强度至 100 后,分别测空白管及测定管 的荧光强度。荧光法测 NAG 已有国产试剂盒, 其敏感度高, 不受尿色 干扰。第6页也可用上海第三分析仪器厂产 930 荧光光度计, 激发滤 光片 360,发射滤光片用 (400+450) 复合
8、,效果满意。本法酶反应液中各成分浓度为:底物1.33mmol/L,枸橼酸 20mmol/L,Na2HPO432mmol/。配试剂所用溶剂应用重蒸馏水,底物应无游离4-MU,BSA 中应无该酶或用 50C加热 2h 灭活。血清中 NAG 于 4C稳定数小时至数天,-20C可稳定数 月。尿标本 4C稳定 1 周,也可用枸橼酸盐抗凝血浆。B-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二种酶催化水解,一种是B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC 321.30),另一种是B-N-乙酰 已糖苷酶 (EC 3.2.1.52) , 只有对提纯的酶才能限定 EC3.2.1.30 或 EC 321.52。目前国内文献中常称的 NAG 严格地说是按所 用底物命名的, 而不是指酶对底物的特异性。 所以目前国外文献 常泛称B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。B
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