山腊梅叶的黄酮及生物碱成分的薄层色谱鉴别

1、 山腊梅叶的黄酮及生物碱成分的薄层色谱鉴别 中文摘要一、目的 探讨山腊梅叶的黄酮及生物碱成分的鉴别方法。二、方法 应用薄层色谱法鉴别山腊梅叶的黄酮及生物碱成分，黄酮采用 =3%AlCl3 ( 乙醇) 溶液显色, 生物碱采用稀碘化铋钾试液显色。三、结果 供试品药材药材溶液与对照品药材溶液的黄酮和生物碱成分在同一薄层板上有相同的点。四、结论 以薄层色谱方法鉴别山腊梅黄酮和生物碱成分的分离效果较好 , 且专属性较强 ,对具体成分的提取分离有一定的参考意义。五、关键词 山腊梅; 黄酮; 生物碱; 薄层色谱 ABSTRACTPurpose:To investigate the method of ide

2、ntifying chimonanthus leaves flavonoids and alkaloids.Methods:flavonoids and alkaloids application identified by TLC chimonanthus leaves, flavonoids using = 3% AlCl3 (ethanol) solution color, alkaloids with thin bismuth potassium iodide test solution color.Result:The test solution and reference medi

3、cinal herbs medicinal solution of flavonoids and alkaloids in the same plate with the same points.Conclusion:TLC method to identify the chimonanthus flavonoids and alkaloids isolated better,specificity and strong.Extraction separation of specific ingredients have some reference value. Key words:Chim

4、onanthus; flavonoids; alkaloids; TLC. 前言 山腊梅叶为腊梅科腊梅属植物山腊梅（Chimonanthus nitens Oliv）的叶，又称之为毛山茶、岩马桑，亮叶腊梅、香风茶、野腊梅1。民间使用历史悠久，常用叶泡茶饮以防治感冒。 据记载，山腊梅还具有解表祛风，清热解毒；预防感冒，流行性感冒，中暑；治慢性气管炎，胸闷的功能主治2。山腊梅叶中含有丰富的挥发油、黄酮类及生物碱类物质3.4。对山腊梅的成分鉴别，文献主要介绍了性状鉴别、显微鉴别及挥发油成分的鉴别5，本实验运用传统的薄层色谱法对山腊梅中的黄酮类及生物碱类成分进行鉴别。 正文1、 仪器及试剂1.1仪器圆

5、底烧瓶，冷凝管，旋转蒸发器，20 cm× 10 cm 双槽展开缸，1.2试剂95%乙醇溶液、乙酸乙酯、氯仿、浓氨水、石油醚、甲酸、苯、甲醇试剂，薄层层析硅胶G( 化学纯) ,羧甲基纤维素钠。2、 供试品及对照药材2.1供试品 山腊梅，采摘自江西省上饶市婺源县，经江西中医药大学药中药化学学科组舒老师鉴定为蜡梅科腊梅属植物山腊梅（Chimonanthus）叶子。2.2对照品 对照品山腊梅干燥叶由药房提供。3、实验方法与结果3.1硅胶GF254薄层板的制作6 取一定量的羧甲基纤维素钠分析纯试剂，加入到定量的蒸馏水中，边加热边溶解，配制成 = 0. 3 %羧甲基纤维素钠溶液。将配制好的羧甲基

6、纤维素钠溶液加入到盛有硅胶GF254的研钵中，顺时针研磨至无气泡。取出干燥洁净的玻璃板，将上述硅胶液铺在玻璃板上，尽量铺得薄而均匀平整，晾干，放入烘箱在105温度下活化三十分钟待用。3.2山腊梅叶的黄酮成分的薄层色谱鉴别73.2.1黄酮成分的提取 取新鲜山腊梅叶15g，剪碎，置圆底烧瓶中，加入95%乙醇溶液，用量以没过药材表面为准。加热回流一小时，滤过，残渣再加等量95%乙醇溶液，加热回流一小时，合并滤液，置旋转蒸发器中旋干，残渣用蒸馏水溶解，抽滤滤过，滤液用乙酸乙酯提取两次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，置水浴锅上蒸干，残渣加甲醇2ml，使其完全溶解，作为供试品溶液。另取山腊梅对照药材5g，

7、用同法制成对照药材溶液。3.2.2黄酮成分的薄层鉴别8 照薄层色谱法( 中国药典2010 版一部附录VB) 试验,取供试品溶液和对照药材溶液各10µl分别点于同一以 = 0. 3 % 羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 GF254 薄层板上, 以 （石油醚 乙酸乙酯 甲酸)= ( 5.5 3.5 0.1) 为展开剂,展开 ,取出, 晾干, 喷以 = 3%AlCl 3 ( 乙醇) 溶液9，105 加热约 5min ,置紫外光灯( 365 nm) 下检视 ,供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上 ,显相同颜色的荧光斑点 。3.3山腊梅叶的生物碱成分薄层色谱鉴别3.3.1生物碱成分的提取1

8、0 取新鲜山腊梅叶15g，剪碎，置圆底烧瓶中，加入浓氨水溶液725ml，密塞 ,摇匀 ,放置三十分钟，加入氯仿溶液,用量以没过药材表面为准， 加热回流两小时,滤过，残渣再加入等量的氯仿溶液，加热回流两小时，合并滤液，放冷 ,分取氯仿液 （下层）,药渣再用氯仿适量洗涤,合并氯仿液 ,用无水硫酸钠脱水, 置水浴上蒸至约2ml，作为供试品。另取山腊梅对照药材5g，用同法制成对照药材溶液。3.3.2生物碱成分的薄层鉴别 照薄层色谱法( 中国药典 2010 版一部附录VB) 试验 ,吸取上述两种溶液各 10µl , 分别点于同一以 =3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF 254 薄层板上 ,以

9、 ( 苯 乙酸乙酯 甲醇) = ( 4 3 1) 为展开剂 , 另槽用等量的浓氨溶液预平衡 15 min, 展开 ,取出 ,晾干 。喷以稀碘化铋钾试液,供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的斑点 。4、结果与讨论4.1黄酮成分的薄层图如下 1 2 3 41、2、3、为供试品 4为对照品 图中显示有七个显色点，比移值分别为：Rf1=0.2 Rf2=0.4 Rf3=0.53 Rf4=0.67 Rf5=0.73 Rf6=0.83 Rf7=14.2生物碱成分的薄层图如下1 2 3 41、2、3为供试品 4为对照品图中显示有五个显色点，比移值分别为：Rf1=0.096 Rf2=0.

10、151 Rf3=0.205 Rf4=0.260 Rf5=0.3014.3讨论薄层色谱法鉴别化学成分的关键在于硅胶板的制作和展开剂的选择11，本实验鉴别黄酮和生物碱两种成分时所用的薄层板略有不同，鉴别生物碱类成分用的薄层板在制作时加入了一定量的浓氨溶液，以减少拖尾，使显示出的点更圆，而鉴别黄酮成分时不需要加入。关于展开剂的选择，黄酮成分的鉴别首先尝试了文献中提得较多的氯仿与甲醇的各种比例，但分离效果不理想，接着尝试了石油醚与甲酸等等一系列的组合，最终找到石油醚：乙酸乙酯：甲酸=5.5:3.5:0.1系统，对于分离山腊梅黄酮成分效果比较理想。生物碱成分的鉴别首先尝试了氯仿与丙酮的各种比例，接着尝试

11、了甲苯与氯仿等等一系列的组合，由于时间关系，目前找到的最理想的组合是苯：乙酸乙酯：甲醇=4:3:1，在此系统条件下能得到五个比较清楚的点，但比移值比较小，还有待改进。 参考文献1中国药典2010版一部.2全国中草药汇编第三版.3 舒任庚,李莎莎,胡浩武. 山蜡梅化学成分研究J.中国药学杂志,2010,(15):1134-1135.4张尊敬，刘忠达. 山腊梅的成分及药理作用研究近况. 浙江中医药杂志2009年11月第44卷第11期.5 徐年军,白海波,严小军. 山腊梅中挥发油成分分析J.分析测试学报,2006,(01):90-93.doi:10.3969/j.issn.1004-4957.2006.01.0246中国药典2010版一部附录VB.7 罗勇慧.广金钱草黄酮和生物碱成分薄层色谱鉴别的研究.广东药学院学报2004年12月第20卷第6期.8李广，王清光，王义明，罗国