Rh血型鉴定操作规程

1、对象：全院职工医疗药事制度文件名称：RhRh (D D )血型鉴定编写日期：2014.12014.1修订日期：2017.42017.4执行日期：2017.42017.4 注：本文件仅供本院人员使用，未经同意，不得翻印本文件最终解释权归输血科Rh ( D )血型鉴定【原理】Rh 血型系统是输血医学中仅次于ABO 系统的第二大血型系统。Rh 血型系统常见的抗原有D 和 C、c、E、e 五种，分别由 RHD 基因和 RHCE 基因编码，RhD 和 RhCE 蛋白均是反复穿膜的蛋白质。 使用相应的抗 D、抗 C、抗 c、抗 E、抗 e 五种血型试剂可以鉴定这些抗原。临床上，D 抗原是 Rh 抗原中免疫

2、原性最强的抗原， 也是最具有临床意义的抗原， 一般只做 D 抗原鉴定，凡带有 D 抗原者称为 Rh 阳性, 不带 D抗原者称为 Rh 阴性。1.试管法【样本】抗凝或不抗凝的样本均可用于Rh 鉴定试验。红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中，也可以洗涤后悬浮于盐水中。【试剂】(1)IgM 抗 D 试剂(2)Rh 对照试剂【操作】(1 )加 1 滴抗 D 到一洁净试管，并做好标记(2 )加 1 滴 Rh 对照试剂到第二个洁净试管中，并做好标记(3 )分别加 1 滴 2%5%红细胞悬液到每支试管中(4 )轻轻混匀，通常(900100)Xg 离心 15 秒(5 )轻轻重悬细胞扣，检查凝集(6 )评价反应

3、强度，记录试验管和对照管得试验结果【结果判定】(1 )抗 D 管凝集，对照管不凝集表明红细胞是RhD 阳性(2 )对照管和抗 D 管均阴性，说明待测红细胞是RhD 阴性结果(3 )对照管凝集则试验无效2.玻片法【样本】用玻片法进行 RhD 定型时，待检红细胞悬液的浓度是40%50%【试剂】适合用于玻片法的低蛋白抗 D 试剂【操作】(1 )加 1 滴抗 D 到一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记(2 )加 1 滴适合的对照试剂到另一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记(3 )向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一种试剂中分别加1 滴混匀的 40%50%待检红细胞悬液(4 )充分混合抗体试剂和细胞，

4、用搅拌棒将混合物均匀分散(5 )不断地从一边到另一边轻轻倾斜转动玻片或白瓷板，持续大概2 分钟(6 )读取，解释并记录所有玻片或白瓷板凹孔中的结果【结果判定】(1 )抗 D 试剂与红细胞反应表现凝集，而对照为阴性反应，表明待检红细胞为RhD 阳性(2 )抗 D 试剂与对照均为阴性反应，表明待检红细胞为RhD 阴性(3 )对照管凝集则试验无效【注意事项】 玻片法可能存在感染性标本暴露的风险，需要注意防范；玻片法不适用于检测弱D 表型3.柱凝集法【样本】同玻片法和试管法【试剂】已加入抗 D 试剂的柱凝集血型卡【操作】(1 )配制好的检测样本的红细胞悬液和试剂红细胞悬液通常配制为 0.8%1.0%浓度。(2 )在专用微柱凝集卡的 RhD 检测管中加入样本红细胞悬液50ul(3 )在专用血型血清学用离心机内离心(4 )判读并记录凝集反应结果【结果判定】 根据红细胞在凝胶柱内的