发酵工厂菌种选育的具体方法与实验设计

1、食品发酵与酿造工艺学题目：发酵工厂菌种选育的具体方法与实验室设计XXX年级专业姓名学号XXXX 级食品科学与工程XXXXXXXXX食品发酵与酿造工艺学柠檬酸的菌种选育的具体方法与实验设计微生物菌种是决定发酵产品的工业价值以及发酵工程成败的 关键，只有具备良好的菌种基础，才能通过改进发酵工艺和设备 以获得理想的发酵产品。而自然界现有的菌种由于其产量较低, 不能直接用于生产，目前，发酵工业生产中所使用的菌种，都是 经过人工选育的优良菌种。本篇以柠檬酸的菌种选育为例，阐述 发酵工厂菌种选育的具体方法与实验室设计。柠檬酸是有机酸中第一大酸，由于物理性能、化学性能、衍 生物的性能，是广泛应用于食品、医药

2、、日化等行业最重要的有 机酸。我国的柠檬酸产业，较早地进入了国际市场，经过多年的 努力和奋斗已成为世界第一的生产和出口大国。特别是经历了近 几年的竞争与整合，全行业的面貌大为改观。所以柠檬酸的菌种 选育对于整个行业和国家来说都尤为重要。.柠檬酸的菌种的具体选育方法1.取样:从腐烂水果上分离出一株柠檬酸产生菌一一黑曲霉。2. 培养基的制备:2.1分离培养基（）:甘薯粉15%，柠檬酸10%分装在试管内,1公斤/厘米2压力火菌20分钟。2.2生长培养基：4° Be'麦芽汁，2%琼脂。I公斤/厘米2压力灭菌15分钟。2.3种子培养基（）:甘薯粉8%，献皮1%。每500毫升三角瓶装10

3、0毫升，I公斤/厘米2压力灭菌30分钟。2.4发酵培养基：12%甘薯粉，每500毫升三角瓶装100毫升, l公斤/厘米2压力灭菌30分钟。3. 菌种培养方法:采用迥转摇床，193转/分，偏心距25毫米，31C振荡培养, 菌丝接种，接种量 5%（v/v），培养5天。4. 菌种的分离与筛选:采用酸性滤纸法，把少许试样混入分离培养基中，摇匀，倾 入无菌培养皿内（内有2 3层滤纸做支持物）,31 C培养4 5天,把长出的单菌落挑入生长培养基斜面上，3C培养45天，即可 见到抱子。初筛：将上述生长好的斜面种子，用无菌操作切取一小块,投人发酵培养基中，振荡培养6天，测定总酸。复筛：根据初筛总酸产量，选取产

4、酸较高者，按上述方法进 行平行发酵试验来考察其产酸能力。5. 菌种诱变105从生长培养基上用无菌水洗下嫩抱子，倒人有玻璃球的无菌 三角瓶中，摇振数分钟，用带有脱脂棉的灭菌漏斗过滤，制成 106个抱子/毫升的单抱子悬浮液， 每支10 X 100毫米的试管装5 毫升，用钻60进行照射。把照射过的悬浮液经适当稀释涂布于有生长培养基的培养皿内，31C培养3 4天，挑出单株，进行产酸试验。经8万伦琴剂量照射后，得到一株r-115，经复筛，产酸能力 达 8.1%。为进一步提高产酸能力，以r-115为出发菌，以静电加速器产生的12万沦琴的产射线进行第二次照射，获得一株编号为r-144的菌株，总酸产率在 9%

5、左右。.实验室布局图应S-S、璃空專琲任I窣檢揃理 咛 态<n嘩I瞬曰埃IWI悴WO4 口T 口O亲K三.房间用途及基本要素1.培养基制作室:培养基室是制作、配制微生物培养所需培养基及检验用试剂的场所，其主要设备应为操作台与药品柜。操作台上要放置电炉, 以满足熔化煮沸培养基时用；还要放天平，以称取药品用；操作 台材料要耐高热、耐酸碱；药品柜分门别类存放一些一般药品及 试剂。2.菌种培养室菌种培养室是菌种培养与检验主要操作室，主要设施是实验 台，及相关处理菌种设备仪器。实验台位置应在实验室中心位置, 要有充足光线，实验台两侧安装小盆与水龙头，实验台中间设置 试剂架，架上装有日光灯与插座，实

6、验台材料要以耐热、耐酸碱 为宜。3.无菌室无菌室通过空气的净化和空间的消毒为微生物实验提供一个 相对无菌的工作环境，与外界用两道缓冲间隔开。无菌室与缓冲 间均装有紫外灯，要求每 3平米安装30 W紫外灯一盏；无菌室是处理样品和接种培养的主要工作间，应与细菌检验操作室紧密相 连，无菌室与操作室之间设有双层窗构成小通道。4.洗涤室洗涤室用以消毒洗涤待用与已用之玻璃器皿,培养基及污物。8洗涤消毒室应设有：1-2个洗涤池，洗涤池上下水网要畅通；器皿柜或实验台，以放置洗涤好器皿；高压灭菌锅，其所用电源应 满足用电负荷；室内安有通风装置（通风柜）或换气扇;5.实验室理化分析室是物理化学分析的主要操作室。实

7、验台与细菌操作室要求相同，设置通风橱以满足加热、消化、干燥、烧灼和化 学处理等工作需要。四.主要仪器设备型号及厂家仪器名称型号产地作用电热恒温培养箱DH5000A天津市泰斯特仪器一般控制的温度范围为：55 0度，控制的湿度范 围为：5090%。可作 为霉菌培养箱。电热干燥箱DH6-907385- m上海新苗医疗器械用于吸管，平皿类玻璃器皿的干热、灭菌和烘烤。咼压灭菌锅YXQ-LS-5osn上海博讯实业用于实验所用器材的灭菌。电热恒温水浴锅DK-S28上海新苗医疗器械部分培养温度需要水浴组合式恒温振荡培HCY -123A太仓市豪诚实验仪菌种培养时要求温度湿度养箱器显微镜S92100LeicaMicrosc op观察细菌形态和动力、微生物和微小物品结构的必备仪器分析天平LA310S天津市德盟科技称量