推荐2019年企业植物蛋白饮料中还原糖和蔗糖含量的检测

1、编号：QA 001修改版本号： 本份页码：共4页制定日期：修定日期：实施日期：制定部门：品控部1、原理样品经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖，在加热条件下，直接滴定标定 过的碱性酒石酸铜溶液，以次甲基蓝作指示剂，根据样品液消耗体积，计算还原糖量（用 还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液）。根据水解前、后还原糖的差值，再换算成样品 蔗糖含量2、试剂（1）有限公司三层文件题目：检验方法 植物蛋白饮料中 总还原糖和蔗糖含量的检测页码：4 1(2)(3)(4)(5)(6)(8)碱性酒石酸铜甲液：称取15.00g硫酸铜（CuSO4 5H2O及0.05g次甲基蓝，溶于 水中并稀释至1000ml，

2、贮存棕色试剂瓶中。碱性酒石酸铜乙液：称取 50.00g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入 4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。 亚铁氰化钾溶液（106g/L ）。盐酸（1+ 1）:量取50ml盐酸慢慢倒入50ml水中，混匀。氢氧化钠溶液（200g/ L）。葡萄糖标准溶液：精密称取1.0000g经过99± 1C干燥至恒重的纯葡萄糖，加水溶 解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000ml。此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖。 转化糖标准溶液：准确称取0.95g纯蔗糖

3、，用100ml水溶解，置于具塞三角瓶中， 加5ml盐酸（1+1）在68 70C水溶中加热15min，放置室温定容至1000ml，每毫 升标准溶液相当于1.0mg转化糖。甲基红指示剂：称取甲基红 0.10g用少量乙醇溶解，稀释至100ml。（9）3、仪器（1）（2）4、操作方法酸式滴定管：25ml、50ml。可调式电炉（带石棉板）。液，置于150ml锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管制疋核 准审 核编号：QA 001（1）样品处理吸取25.00 50.00ml液体样品，置于250ml容量瓶中，加50ml水， 慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氰化钾溶液，加入至刻度，混匀， 沉淀，

4、静置30min,用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。（2）标定碱性酒石酸铜溶液：吸取 5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml乙制定日期：1999/09/07修定日期：实施日期：制定部门：品控部杨协成（广州）有限公司三层文件题目：检验方法 植物蛋白饮料中 总还原糖和蔗糖含量的检测修改版本号：本份页码：共4页页码：4 2滴加约9ml葡萄糖标准溶液，控制在2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续 加匍萄糖标准溶液或转化糖标准溶液，直至溶液监色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖 或转化糖标准溶液的总体积，同时平行操作四份，取其平均值，计算每 10ml（甲、乙液 各5ml）碱性酒石酸铜溶液相当于

5、葡萄糖的质量或转化糖的质量（ mg。m3= vlml（4 1）式中：m10ml （甲、乙液各5ml）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg;v1平均消耗葡萄糖标准溶液的体积，ml;ml1ml葡萄糖标准溶液相当于葡萄糖的质量，1mg ;m4= v2m2（4 2）式中：m10ml（甲、乙液各5ml）碱性酒石酸铜溶液相当于转化糖的质量，mg;v2平均消耗转化糖的体积，ml;m21ml转化糖标准溶液相当于转化糖的质量，1mg（3）样品还原糖含量的测定样品液预测：吸取5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml乙液，置于150ml锥形瓶 中，加水10ml,加入玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以

6、 先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态， 待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好 褪去为终点，记录样液消耗体积（样品中还原糖浓度根据预测加以 调节，以0.1g/100g为宜，即控制样液消耗体积在10ml左右，否则 误差大）。 样品溶液的测定吸取5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml乙液，置于150ml锥形瓶 中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管加比预测体积少1ml 的样品溶液，控制在2min内加热至沸，趁沸继续以每秒1滴的速 度滴定，直到监色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。同法平行 操作四次，取平均消耗体积。 计算制疋核 准审 核制定日期：

7、1999/09/07杨协成（广州）有限公司 三层文件编号：QA 001修定日期：修改版本号：实施日期：题目：检验方法 植物蛋白饮料中 总还原糖和蔗糖含量的检测本份页码：共4页制疋部门：品控部页码：4 3m3X1=x 100（4-3）V5 x V3/250 x 1000式中：Xi样品中还原糖的含量（以葡萄糖计），g/100mlm 3 10ml碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各 5ml）相当 于还原糖（以葡萄糖计）的质量，mgV 5样品体积，ml；V 3测定时平均消耗样品溶液体积，ml ；250样品溶液总体积，ml。（4）样品蔗糖含量的测定 样品中蔗糖的转化吸取50ml样品处理液，置于100ml容量瓶中

8、。加5ml （1 + 1）盐酸，在68- 70 C 水浴中加热15min，冷却后加2滴甲基红指示液，用200g/L氢氧化钠中和至中 性，加水至刻度，混匀。 样品中转化糖的测定按4 （3）中直接滴定法测定还原糖。 计算m4x 100(4-3)V6x V4/ 100X 50/250x 1000式中：茨一一 样品转化后总还原糖含量，g/100mlm 410ml碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各 5ml）相当于还原糖的质量，mgV 6样品体积，ml；V 4测定时平均消耗样品溶液体积，ml;100转化糖总体积，ml;250样品溶液总体积，ml;50用于水解的样品液体积，ml。X3=（ X2- X1）x 0.9

9、5（4- 5）式中：Xb样品中蔗糖含量，g/100ml;X 2水解处理后还原糖（以葡萄糖计）含量， g/100ml;X 1水解处理前还原糖含量（以葡萄糖计），g/100ml;0.95还原糖（以葡萄糖计）换算为蔗糖的系数。制疋核 准审 核制定日期：1999/09/07杨协成（广州）有限公司 三层文件编号：QA- 001修定日期：修改版本号：实施日期：题目：检验方法 植物蛋白饮料中 总还原糖和蔗糖含量的检测本份页码：共4页制疋部门：品控部页码：4 4说明：（1）本法为直接滴定法，经过标定的定量的碱性酒石酸铜试剂，可与定量的还原糖作用， 根据样品溶液消耗体积，可计算样品中还原糖含量。（2） 亚甲基蓝

10、本身也是一种氧化剂，其氧化型为蓝色，还原型为无色，它的氧化能力比碱 性酒石酸铜更弱，当还原糖将溶液中碱性酒石酸铜耗尽时， 稍微过量一点点的还原糖 会将亚甲基蓝还原，变为无色状态，指示滴定终点。其反应是可逆的，当空气中的氧 与无色亚甲基蓝结合时又变为蓝色。 滴定时要保持沸腾状态，使上升蒸汽阻止空气浸 入溶液中。（3）加入少量亚铁氰化钾，可使生成的红色氧化亚铜沉淀络合， 形成可溶性络合物，消除 观察红色沉淀对滴定终点的干扰，使终点变色更明显。（4）本法对滴定操作条件要求很严，对碱性酒石酸铜溶液的标定，样品液必须预测，样品液测定的操作条件与预测条件均应保持一致。对每一次滴定所使用的锥形瓶规格、加 热电炉功率、滴定速度、预加入大致体积、终点的确定方法等都尽量一致，以减少误差，并将滴定所需体积的绝大部分先加入碱性酒石酸铜试剂中共沸，使其充分反应， 仅留1ml左右进行滴定，并判断终点。（5） 蔗糖水解条件较低，在本法所列条件下，蔗糖水解，其他还原性双糖不水解，原有的 单糖不被破坏。（6）计算蔗糖含量时换算系数为0.95，蔗糖水