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文档简介
1、本文格式为word版,下载可任意编辑抗体制备信息采集表 抗体制备信息采集表 请尽量具体、精确的填写下表,充分的沟通将有助于我们为您供应更好、更快的服务,感谢! 黄色标注为必填项。请将填好的表格发至邮箱:,技术支持电话:。 双击复选框可进行标记。也可复制这个符号: 表示选中 表示不选。 客户信息 联系人: 电话: 邮箱: 负责人: 电话: 邮箱: 办事处(销售员): 单位(开票抬头): 地址(收货地址): 抗原信息 抗原蛋白信息( 名称/ncbi 编 编号,物种来源) 是否供应免疫原 是(如选择"是',请在下方选择你现有免疫原的制备方法,并在具体信息处填写免疫原的纯度、浓度、质
2、量等信息。不需要填写" 附表一' 。) 否(如选择"否',请在" 附表一'填写您能够供应的抗原信息:如,基因序列,cdna 模版,原核表达载体,酶切位点,标签.) 免疫原制备方法: 原核表达蛋白(一般要求:3-5 mg,纯度85%,浓度0.5 mg/ml,透析到 pbs 或 tris缓冲液) 多肽合成(一般要求:20 mg,其中 10mg裸肽、10 mg 偶联 klh) 其他(真核表达蛋白、细菌、病毒) 抗原的 具体信息: 抗体定制类型 单克隆抗体(小鼠来源) 单克隆抗体(兔来源) 多克隆抗体(一般是兔来源,其他来源需要询问) 抗体验收的标
3、准(可以单选或多选) elisa 验证(效价检测:1:64000) 的 免疫原的 western blot 证 验证(免疫原为蛋白)的 或免疫原的 dot blot 证 验证(免疫原为多肽) 备注:抗体验收的标准不包括" 能检测自然蛋白'。 附表一:原核蛋白表达纯化需求登记表 请尽量具体、精确的填写下表,充分的沟通将有助于我们为您供应更好、更快的服务,感谢! 1. 基因及蛋白信息: 基因名称 ncbi id 号 物种来源 目标基因序列 目的蛋白的氨基酸序列 质粒构建 客户供应表达载体(为保证明验顺当进行,请供应重组载体信息图谱及测序报告等全部信息) 生工构建表达载体:直接进行
4、目的基因的全基因合成并构建表达载体。 生工构建表达载体:进行密码子优化后再进行目的基因的全基因合成并构建表达载体。 其他方式:( )。 若客户供应构建好的表达载体 (请邮件供应质粒信息、测序文件) 宿主菌名称:( ) 菌液体积:( ) 表达载体:( ) 目的基因两端插入的酶切位点和位置:( ) 培育条件:( ) 保存温度:( ) 目的蛋白性质 温度稳定范围:( ) ph 稳定范围:( ) pi 值:( ) 分子量:( ) 蛋白定位(细胞浆,胞核,胞膜或者分泌蛋白:( ) 是否存在翻译后修饰:( ) 2. 对最终目的蛋白的要求: 目标蛋白能否与标签进行融合表达 能否与 his、gst 等标签进行
5、融合表达 不需要 可以融合表达(请标明何种标签 )标签位置 5端 3端 最终蛋白是否需要切除融合标签(假如标签不影响将来的抗体制备,建议尽量避开酶切标签) 需要 不需要 假如蛋白需要切除标签,则标签与目的蛋白之间的蛋白酶识别位点有无要求: 烟草蚀纹病毒蛋白酶/tev 肠激酶/ek 凝血酶/thrombin 其他蛋白酶 蛋白需求量 需要纯化好的目标蛋白 mg(假如蛋白需要做抗体,则蛋白量大于 5 毫克) 蛋白纯度要求 纯度大于 80% 纯度大于 85% 纯度大于 90%(sds-page 电泳鉴定蛋白纯度)(假如蛋白需要做抗体,则蛋白纯度至少大于 85%) 蛋白浓度要求 默认0.3mg/ml,假
6、如需要更高浓度,费用和周期相应增加 蛋白是否去除内毒素 需要 不需要(假如蛋白需要做抗体,则一般不需要去除内毒素) 验收标准 最终纯化蛋白的验收标准为:1)sds-page 显示纯化蛋白满意理论分子量及纯度要求;2)必要时进行 wb 检测 buffer 及发货要求 其他缓冲体系,请注明缓冲液成分( ) 冻干(费用和周期相应增加); 默认 50mmol/l tris, 300 mmol/l nacl, ph8.0 缓冲体系 备注:假如对缓冲液有特别要求,在此标出( ) 如其他特别要求请注明 下单后不作更改 3. 您是否尝试过自己表达、纯化目标蛋白,结果如何? 从未进行过表达尝试 进行过表达试验: 未检测到表达, 可能缘由是:( ) 有表达,目标蛋白表达量占全菌蛋白的百分比为: %。 目标蛋白存在于 上清中 沉淀中 上清沉淀均表达 (
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