低频脉冲电针对慢性根性痛大鼠背根神经节P物质的影响

1、低频脉冲电针对慢性根性痛大鼠背根神经节P物质的影响         08-11-03 10:27:00     编辑：studa20            作者：屠文展，蒋松鹤，楼新法，张瑞峰，刘芬，庞玲霞，李莎莎 【摘要】  目的:探讨局部及肢体远端不同穴位低频脉冲电针对慢性根性痛大鼠背根神经节P物质（sP）的影响。方法:复制慢性根性痛大鼠模型。将25只雄

2、性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、局部电针组（取双侧L4“夹脊”穴）、远端电针组（取双侧“阳陵泉”穴）及远近结合电针组（取双侧L4“夹脊”穴双侧“阳陵泉”穴）。通过免疫组化法，观察比较患侧背根神经节sP表达的变化。结果:与模型组相比，正常组、电针组患侧背根神经节sP的表达均减少（P <0.05）。各电针组之间，远近结合电针组患侧背根神经节sP的表达较局部电针组、远端电针组减弱（P <0.05）。结论:低频脉冲电针的镇痛作用可能部分是通过抑制sP的合成实现的。与局部电针组和远端电针组相比，远近结合电针组抑制sP的合成作用较强。 【关键词】  低频脉冲；电针；P物

3、质；慢性根性痛；脊神经节    Abstract:  Objective: To investigate the effect of substance P in dorsal root ganglion treated with low frequency transduction pulse electro-acupuncture on different acupoints of local and distant limbs of the chronic radicular pain rats. Methods: The model of rat

4、 with chronic radicular pain was adopted and 25 maleness Wistar rats were divided into three groups randomly， including normal control group， model group，local acupoints needling group（choose GB34 Yanglingquan at each side），distant acupoints needling group（choose EX-B2 Jiaji at each side of L4）；dist

5、ant and local coordination of acupoints needling group （choose GB34tYanglingquan at each side and EX-B2  Jiaji  at each side of L4）. The changes of the expression of substance P in the dorsal root ganglion were observed by the immunochemistry. Results : Compared with the model group， the e

6、xpression of substance P in the dorsal root ganglion in the normal control group and electroacupuncture groups were lower significantly (P <0.05)Among the electroacupuncture groups， the expression of substance P in distant and local coordination of acupoints needling group were lower significantl

7、y (P <0.05) compared with local acupoints needling group and distant acupoints needling group. Conclusion: The analgesia effect of low frequency transduction pulse electro-acupuncture is realized by suppressing the synthesis of substance P to some extent. Compared with local acupoints needling gr

8、oup and distant acupoints needling group，distant and local coordination of acupoints needling group effects better in inhibiting the synthesis of substance P.    Key words:   low frequency transduction pulse electroacupuncture；substance P；chronic radicular pain；immunochemist

9、ry；ganglia    低频脉冲电针是将物理医学与中医针灸学相结合治疗慢性腰腿痛的有效而副作用极少的一种手段。已有大量动物实验证实低频脉冲电针是通过调节神经递质的表达和释放而起到镇痛作用。P物质(substance P，sP)，是其中较为重要的一种1，2。但电针对于其中较为复杂的慢性根性痛模型（类似于人体的腰椎间盘突出症）的神经递质表达影响少见报道，尤其是局部取穴法和远道取穴法电针镇痛效果孰优及其结合应用价值的实验数据鲜见报道。    本研究通过不同规律配穴3的电针干预慢性根性痛大鼠模型，观察根性压迫的局部及肢体远端等不同部位穴位

10、电刺激所引起的背根神经节内sP表达是否存在差异。    1  材料和方法    1.1  动物及分组  雄性Wistar大鼠30只（由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供），体重150200 g，基础痛阈为（5.0±1.3）s，随机分为正常对照组（A组）、模型组(B组)、局部电针组（C组，取双侧L4“夹脊”穴）、远端电针组（D组，取双侧“阳陵泉”穴）和远近结合电针组（E组，取双侧L4“夹脊”穴双侧“阳陵泉”穴），以上各组均为5只。取穴标准见李忠仁主编的实验针灸学4。  

11、0; 1.2  主要试剂  免疫组化SP一抗（calbiochem公司产品），购自上海西格玛奥德里奇生物技术有限公司，SABC（兔IgG）-POD试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司产品），其他试剂均为国产化学纯。    1.3  动物模型复制  参照文献5复制腰神经根压迫模型。经10%水合氯醛腹腔麻醉（0.5 g/kg）后，在手术显微镜下咬除L4、5棘突、右侧椎板和关节突，暴露并游离出右侧L4脊神经背根，在接近背根神经节（DRG）近侧端处用内径为1 mm的硅胶管，纵行切开，套入L4脊神经背根，在硅胶管外用丝线结扎，缝合切口，

12、动物存活4周。    1.4  电针方法  动物术后4周，将电针组大鼠固定在特定筒架上，按要求取穴进针后，用韩氏治疗仪通电给予刺激，频率2 Hz，强度以引起大鼠肢体轻度抖动为宜(2 mA)，持续30 min，每日同一时段连续电针8 d。    1.5  标本制备及sP检测  造模后35 d（即电针组电针8 d后）各组大鼠经10%的水合氯醛液（0.75 g/kg）腹腔麻醉，开胸暴露心脏，经左心室灌流固定。先用150 ml生理盐水快速灌流冲洗血液，继以4%多聚甲醛400 ml(用0.1 mol/L PBS缓冲液配制，pH 7.4)持续灌注1 h左右。取患侧L35背根神经节后，固定2 h（4 ），放入含20%蔗糖的PB溶液中过夜至组织块沉底，冰冻切片，片厚10m，间隔取片，贴片后切片置-80 冰箱内保存，免疫组化法检测sP。SP免疫组化染色按照说明