维生素C的测定——水溶性维生素的测定

1、维生素c的测定水溶性维生素的测定 ，又称抗坏血酸、抗坏血病维生素，为水溶性的维生素。它是一种不饱和的多羟基化合物，以内酯形式存在，在2位与3位碳原子之间烯醇羟基上的氢可游离h十，所以具有酸性。自然界存在还原型和氧化型两种抗坏血酸，都可被人体利用。它们可以相互改变，但当氧化型（dhvc)一旦生成二酮基古洛糖酸或其他氧化产物，则活性丧失。维生素c主要食物来源为新奇蔬菜与水果，如西兰花、菜花、塌棵菜、菠菜、柿子椒等深色蔬菜和花菜，以及柑橘、红果、袖子等水果含维生素c量均较高。野生的苋菜、苜蓿、刺梨、沙棘、猕猴桃、酸枣等含量尤其丰盛。维生素c难溶于脂肪，易溶于水，其水溶液具有酸性，对酸稳定，遇碱或遇热

2、极易破坏，具有较强的还原性，易氧化，铜盐可促进其氧化。 测定维生素c的办法有2,6一二氯靛酚滴定法，2,4一二硝基苯脐比色法、荧光法、高效液相色谱法等。 一、2，6一二氯靛酚滴定法 具有烯醇式分子结构的抗坏血酸分子具有还原性，在中性或弱酸性条件下能定量还原2,6一二氯靛酚染料为无色。此染料在中性或碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。尽头时，稍过量的2,6一二氯靛酚使溶液展现微红色。按照染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。 样品中维生素c含量按照下列公式计算： x=t(v-v0）/m(5/100)100 式中：x样品中维生素c的含量，mg/l00g; t1ml染料溶液（2,6一二氯

3、靛酚溶液）相当于维生素c的质量，mg; v滴定样液时消耗染料溶液的体积，ml; vo滴定空白时消耗染料溶液的体积，ml; m样品的质量，g。 解释及注重事项如下。 (1)2,6一二氯靛酚滴定法测定的结果为食品中的还原型l一抗坏血酸含量，而非维生素c总量。此法是测定还原型l一抗坏血酸最简便的办法，适合于大批果蔬，但对红色果蔬不太相宜。 (2）维生素c在酸性条件下较稳定，故样品处理或浸提都应在弱酸性环境中举行。浸提剂以偏磷酸（hp03）稳定维生素c效果最好，但价格较贵。普通可采纳2草酸代替偏磷酸，价廉且效果也较好。 (3)测定维生素c时，应尽可能分析新奇样品，在不发生水分及其他成分损失的前提下，样

4、品尽量捣碎，研磨成浆状。需特殊注重的是：研磨时，加入与样品等量的酸提取剂以稳定维生素c。 (4)全部试剂应用新奇重蒸馏水配制。 (5）测定过程中应避开溶液接触金属、金属离子。 (6)样品匀浆在100ml容量瓶中，可能浮现泡沫，可加入戊醇2一3滴消退之。同时作空白试验，消退系统误差。 (7）囫囵操作过程应快速，滴定开头时，染料溶液应快速加入直至红色不立刻消逝，而后尽可能一滴一滴地加入，并不断摇动三角瓶，至粉红色15s内不消逝为止。样品中某些杂质还可以还原染料，但速度较慢，故滴定尽头以浮现红色15s不褪色为尽头。 二、2,4一二硝基苯肼法 总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮基古洛糖酸。样品中还原型

5、抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2,4一二硝基苯肼作用生成红色的脎，按照脎在硫酸溶液中的含量与总抗坏血酸含量成正比，举行比色定量。 样品中抗坏血酸含量按照下列公式计算： x=（v)/mf(100/1000) 式中：x样品中抗坏血酸含量，mg/100g; 由标准曲线得“样品氧化液”中总抗坏血酸的浓度，g/ml; v试样用1草酸溶液定容的体积，ml; f样品氧化处理过程中的稀释倍数； m样品的质量，g。 解释及注重事项如下。 (1)苯肼比色法简单受共存物质的影响，特殊是谷物及其加工食品，须要时可用层析法纯化。 (2）试验过程应避光操作。 (3)硫脲可庇护抗坏血酸不被氧化，且可协助脎的形成。

6、终于溶液中硫脲的浓度应全都，否则影响色度。 (4）试管从冰水中取出后，样品中因糖类的存在会造成色彩逐渐加深，故必需计时，30min后及时比色。 三、荧光法 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸后，与邻苯二胺(opda）反应生成有荧光的喹喔啉。其荧光强度与抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食品中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与opda反应，以此排解样品中荧光杂质产生的干扰。 样品中抗坏血酸及脱氢抗坏血酸总含量按照下列公式计算： x=（v)/mf(100/1000) 式中：x样品中抗坏血酸及脱氢抗坏血酸总含量，mg/100g; 由标准曲线查得或由回来方程算得的样品溶液浓度，g/ml; v荧光反应所用试样体积，ml; f样品溶液的稀释倍数； m样品的质量，g。 解释及注重事项如下。 （1)试验所有过程应避光。 (2)活性炭用量应精确，其氧化机理是基于表面吸附的氧举行界面反应，加入量不足，氧化不充分；加入量过高，对抗坏血酸有吸附作用。试验证实，