双氧水微生物限度检查方法验证方案20121112

1、5%双氧水溶液微生物限度检查方法验证方案编码： VP/QBV-12-T090-00页码：7/7项目人员 ItemPersonnel部门/岗位Dept./Position签名Signature日期Date方案起草Prepared byQC/检验员年 月 日 (Y) (M) (D) 方案审核Reviewed byQC/经理助理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/副经理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/经理年 月 日 (Y) (M) (D)方案批准Approved by质量受权人 年 月 日 (Y) (M) (D)颁发部门Issued byQA生效日期Effective Date 年

2、月 日 (Y) (M) (D)分发部门Distributed to QC制作备份：1份Copies prepared: 1pcs目 录1.概述32.目的33.依据及参考文件34.验证小组和各部门职责35.验证时间安排46.验证内容47.偏差情况68.变更79.验证结果评价内容7附件1：培训确认表1附件2：文件检查确认表2附件3：设备确认结果2附件4：试验器材确认结果4附件5：试验用菌种确认结果4附件6：培养基确认结果5附件7：试剂确认结果5附件8：器皿确认结果6附件9：细菌、霉菌及酵母菌计数验证结果记录71.概述5%双氧水溶液是本公司车间使用的消毒剂种类之一。因需建立5%双氧水的微生物检验方法

3、，所以需对其微生物限度检查方法进行验证。按中国药典2010年版二部附录XI J“微生物限度检查法”要求，结合5%双氧水溶液本身的性质，本次确认将采用以下微生物检验方法进行确认试验取2ml 5%双氧水溶液置100ml pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液中，用封闭式薄膜过滤器滤干，平行制备2张膜，将滤膜菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红琼脂培养基平板上培养，置规定温度，检测细菌平皿培养72小时，检测霉菌及酵母菌平皿培养120小时，测定菌数。2.目的根据中国药典2010年版的要求确定本公司使用的5%双氧水溶液微生物限度检查方法。 3.依据及参考文件3.1中国药典2010年版二部附录XI J“微生物限度检

4、查法”3.2中国药品检验标准操作规范2010年版“微生物限度检查法”3.3药品生产质量管理规范（2010年修订）3.4 微生物限度检查法 SOP-QC-0213-V013.5 验证管理规程 SOP-QA-017-V023.6QC消毒液配制使用标准操作规程SOP-QC-216-V004.验证小组和各部门职责4.1验证小组及对应职责职位姓名部门具体职责组长代珊QC确认总协调工作，并审核确认的数据组员许维雅QC负责确认方案和确认报告的起草，负责检品的检测与确认记录的填写，负责确认数据的收集。辛海安黄微QC负责检品的检测与确认记录的填写。林明凤吴东丹刘利袁碧芳彭艳妃QC监督确认过程实施及确认过程中的偏

5、差及OOS处理。吴东琴QA负责确认方案和确认报告的归档保存。监督确认过程实施及确认过程中的偏差及OOS处理。4.2验证委员会姓名职务职责颜杰质量受权人1.负责确认方案及报告的批准；2.负责确认过程中出现的偏差/OOS的批准放行。马立如QA经理1.负责确认方案及报告的审核；2.负责确认过程中出现的偏差/OOS的评估。张德志QA副经理5.验证时间安排时 间工作内容2012年11月方案起草、审批2012年11月12月标准确认、检验方法确认2012年12月完成报告6.验证内容6.1验证前准备6.1.1培训确认本次验证内容是否已对相关人员进行培训，检查确认结果记录在附件1培训确认表。6.1.2文件确认本

6、次验证前验证方案及相关指导的SOP是否已经批准。检查确认结果记录在附件2文件检查确认表。如无相关文件，则需要增加发放。6.1.3仪器设备确认检查所涉及的设备是否符合实验要求，确认结果填写在附件3 设备确认结果中。可接受标准：设备应经验证，在校准有效期内。6.1.4试验器材确认检查所涉用试验器材，确认结果填写在附件4试验器材确认结果中，可接受标准：试验器材各配件应齐全，无损坏。6.1.5试验用菌种确认检查所涉及的试验用菌种是否符合实验要求，确认结果填写在附件5 试验用菌种确认结果中。可接受标准：菌种形态特征应良好、菌种代数不得超过第五代。6.1.6培养基确认检查所涉及的培养基是否符合实验要求，确

7、认结果填写在附件6 培养基确认结果。可接受标准：营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基应在有效期内，应做培养基适应性检查。6.1.7试剂确认检查所涉用试剂是否符合实验要求，确认结果填写在附件7试剂确认结果中。可接受标准：试剂应在有效期内。6.1.8器皿确认检查所涉用器皿是否符合实验要求。确认结果填写在附件8器皿确认记录中。可接受标准：一般玻璃器皿要求洁净，无破损，量筒要进行校准。6.1.9验证用培养基、缓冲液应置121湿热灭菌30分钟，平皿、刻度吸管应置200干热灭菌2小时。6.2验证方法6.2.1 菌液制备：接种金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌新鲜培养物至营养琼脂培养基上，3035培养1

8、824小时；接种白色念珠菌新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基上， 2328培养2448小时。上述培养物分别用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50100cfu 的菌悬液。取黑曲霉菌经2328培养57天新鲜改良马丁琼脂培养基斜面培养物，加入含0.05%（ml/ml）聚山梨酯的0.9%无菌氯化钠溶液洗下孢子吸出，转移至空试管中作为菌悬液原液，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯的0.9%无菌氯化钠溶液进行10倍梯度稀释至含孢子数50100cfu/ml的孢子悬液。6.2.2菌液计数：分别取上述3种细菌菌液1ml加入培养皿，注入不超过45营养琼脂培养基1520ml，每种试验菌平行制备2个平板，于3

9、035倒置培养48小时。分别取上述2种真菌菌液1ml加入培养皿，注入不超过45玫瑰红钠琼脂培养基1520ml，每种试验菌平行制备2个平板，于2328倒置培养72小时。6.2.3 5%双氧水的配制：按照QC消毒液配制使用标准操作规程SOP-QC-216-V00配制上述5%双氧水。6.2.4细菌数、霉菌数、酵母菌数回收率测定：验证试验每种5%双氧水应进行3次独立的平行试验，并计算各试验菌每次试验的回收率。要求回收率不低于70%。用薄膜过滤进行验证，具体拟定方法如下：6.2.4.1试验组：取2ml5%双氧水和1ml验证用菌液（含50100CFU试验菌）置100ml pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液中，

10、用封闭式薄膜过滤器滤干，平行制备2张膜，将滤膜菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红琼脂培养基平板上培养，置规定温度培养4872小时，测定菌数。6.2.4.2供试品组：按试验组检验方法（不加试验菌）测定供试品本底细菌、霉菌及酵母菌数，检测细菌平皿培养72小时，检测霉菌及酵母菌平皿培养120小时，测定菌数。6.2.4.3菌液组：测定所加的试验菌数。6.2.4.4稀释剂对照组：用相应的稀释液替代5%双氧水，按试验组的制备方法和菌落计数法测定菌数。6.2.4.5试验结果：结果见附件9细菌、霉菌及酵母菌计数验证结果记录6.2.4.6结果判断：稀释剂对照组的菌回收率均应不低于70%。若试验组的菌回收率均不低

11、于70%，则可按该供试液制备方法和计数法测定供试品的细菌、霉菌或酵母菌数；若任一次试验中试验组的菌回收率低于70%，需分析原因，采取适当方法重新验证。注：试验组回收率（%）=（试验组平均菌落数-供试品对照组平均菌落数）菌液组平均菌落数100%稀释剂对照组回收率（%）= 稀释剂对照组平均菌落数菌液组平均菌落数100%6.2.4.7结果统计 实验结果统计填写在附件9细菌、霉菌及酵母菌计数验证结果记录7.偏差情况验证过程中如果有任何偏差应及时记录，分析原因，评价是否是关键偏差，并提出整改措施，并将偏差附于验证报告中。8.变更验证过程中是否有变更，如有变更在再验证报告中进行说明。9.验证结果评价内容对

12、验证结果进行综合评价，内容包括但不限于：确认实验是否有遗漏；确认验证过程中是否有偏差，偏差是否已经采取纠偏措施和预防措施；确认记录是否完整；是否需要进一步补充实验。评价必须以书面形式写出报告。附件1：培训确认表培训确认表培训人/培训日期培训对象部门职责签名代珊QC确认总协调工作，并审核确认的数据彭艳妃QC监督确认过程实施及确认过程中的偏差及OOS处理。辛海安QC负责确认方案和确认报告的起草，负责检品的检测与确认记录的填写，负责确认数据的收集。黄微QC负责检品的检测与确认记录的填写。吴东丹QC刘利QC袁碧芳QC林明凤QC吴东琴QA负责确认方案和确认报告的归档保存。监督确认过程实施及确认过程中的偏

13、差及OOS处理。确认人/日期： QA复核人/日期： 3硫酸氢氯吡格雷片微生物限度检查方法确认编码：R/QBV-11-T008-00页码：3/8附件2：文件检查确认表文件检查确认表SOP名称SOP编号是否已批准消毒剂管理规程SOP-PR-007-V02是 否验证管理规程SOP-QA-017-V02是 否生测室管理规程SOP-QC-005-V01是 否微生物限度检查法SOP-QC-0213-V01是 否培养基管理规程SOP-QC-017-V01是 否菌种管理规程SOP-QC-012-V02是 否XG1.D型脉动真空灭菌柜使用保养标准操作规程SOP-QC-0343-V01是 否培养箱使用操作规程SO

14、P-QC-303-V00是 否电子天平使用标准操作规程SOP-QC-317-V01是 否洁净工作台使用保养标准操作规程SOP-QC-304-V00是 否生物安全柜使用保养标准操作规程SOP-QC-0386-V00是 否Haier 药品保存箱使用及保养标准操作规程SOP-QC-0395-V00是 否评价：确认人/日期： QA复核人/日期： 25%双氧水溶液微生物限度检查方法验证编码：R/QBV-11-T016-00 页码：3/7附件3：设备确认结果 设备确认结果设备名称型 号生产厂家及出厂编号校准有效期至验证编号霉菌培养箱MJ-300BS-II上海新苗医疗器械制造有限公司(0812240005)

15、霉菌培养箱MJ-300BS-II上海新苗医疗器械制造有限公司(1005240001)生化培养箱SPX-300BS- II上海新苗医疗器械制造有限公司(0405011)电热恒温培养箱DHP-9162上海一恒科技有限公司（035184）脉动真空灭菌柜XG1.DTX-0.24山东新华医疗器械股份有限公司（20122024）脉动真空灭菌柜XG1.DTX-0.36B山东新华医疗器械股份有限公司（20100953）生物安全柜BSC-1600A2苏州安泰空气技术有限公司（J10060420）生物安全柜BSC-1600A2苏州安泰空气技术有限公司（J10060421）生物安全柜BSC-1300A2苏州安泰空气

16、技术有限公司（J10050341）电子天平GF-200日本AND(14678558)电子天平HF-200日本AND(12850048)评价：确认人/日期： QA 复核人/日期：75%双氧水溶液微生物限度检查方法验证编码：R/QBV-11-T016-00页码：7/7附件4：试验器材确认结果试验器材确认结果名称型 号来 源检查项目及标准检查结果光学显微镜YS100Nikon各配件应齐全，无损坏封闭式无菌检查薄膜过滤器STV2、STV3型浙江宁海白石药检仪器厂完整，洁净，无破损微孔滤膜孔径0.45m，直径50mm杭州高得泰林有限公司完整，无破损评价：确认人/日期： QA复核人/日期：附件5：试验用菌

17、种确认结果试验用菌种确认结果菌种名称及编号来 源保存方法及条件菌种代数（不得超过第五代）/形态特征金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003中国药品生物制品检定所培养基斜面28大肠埃希菌CMCC（B）44102中国药品生物制品检定所培养基斜面28枯草芽孢杆菌CMCC（B）63501中国药品生物制品检定所培养基斜面28白色念珠菌CMCC（F）98001中国药品生物制品检定所培养基斜面28黑曲霉CMCC（F）98003广州市药品检验所培养基斜面28评价：确认人/日期： QA复核人/日期：附件6：培养基确认结果培养基确认结果培养基名称来 源检查项目及标准批号/有效期至营养琼脂培养基北京三药科技开发公司1

18、.应在有效期内2.应做适应性检查玫瑰红钠琼脂培养基北京三药科技开发公司1.应在有效期内2.应做适应性检查评价：确认人/日期： QA复核人/日期：附件7：试剂确认结果试剂确认结果试剂名称规格来 源检查项目及标准批号/有效期至pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液250g/瓶北京三药科技开发公司应在有效期内氯化钠500g/瓶广州化学试剂厂应在有效期内苯扎溴铵溶液（新洁尔灭溶液）500ml/瓶广东恒健制药有限公司应在有效期内洗必泰5kg/箱锦州九泰制药有限责任公司应在有效期内吐温80500ml/瓶天津市大茂化学试剂厂应在有效期内双氧水应在有效期内评价：确认人/日期： QA复核人/日期：附件8：器皿确认结果器皿确认结果容器名称规格型号检查项目及标准检查结果培养皿90mm洁净，无破损烧杯1000ml、500ml洁净，无破损试管18mm180mm、30 mm200mm洁净，无破损刻度吸管10 ml 、5 ml2 ml、1ml洁净，无破损量筒500ml、100ml洁净，无破损应校准评价：确认人/日期： QA复核人/日期：885%双氧水溶液微生物限度检查方法验证编码：R/QBV-11-T016-00页码：8/7附件9：细菌、霉菌及酵母菌计数验证结果记