微生物标本采集送检及处理原则

1、微生物标本采集、送检及处理原则一、标本采集的一般原则：1、病程早期、急性期或症状典型时，使用抗生素前。2、无菌采集应无污染，严格进行无菌操作。3、根据目的菌的特性用不同的方法采集适量标本，采集量不应过少。4、注意在不同病程采集不同部位标本。5、采集标本时要防止传播和自身感染。二、标本的处理：1、标本保存在4 环境中，在2h 之内送检。脑脊液则要在25 保存，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h。对环境敏感的细菌应保温并立即送检。2、标本中可能含有致病菌，必须注意安全防护。切勿污染环境。对于烈性传染病标本运送时更要由专人运送，严格按规定包装。3、 厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，

2、有时可直接用抽取标本的注射器运送。I血液及骨髓标本：血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本方法。如从患者血液中检出 细菌，一般应视为病原菌。常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球菌、 链球菌 （ A、 B 群、 肺炎链球菌等） 、 肠球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、伤寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等。1、采血时间及次数2、抽血部位及抽血量3、报告方式：培养5d 无菌生长者报告“培养5d 无菌生长”。查见细菌报告菌名和药敏结果。4 、 菌血症、 败血症的诊断标准： 1） 两次培养均出现同一种细菌 （可排除污染） ；2 ）发病星期后血中抗体滴度上升。n脑脊液标本：脑脊液的细菌学检查对于细菌性

3、脑膜炎的诊断有重要价值。正常人的脑脊液是无菌的，检出细菌提示有细菌性（急性化脓性、结核性等）脑膜炎。常见的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、链球菌（A、 B 群和肺炎链球菌）、葡萄球菌、产单核细胞李斯特菌、结核分枝杆菌等。1、涂片检查：（1） 一般细菌涂片检查：例如：革兰阴性、凹面相对的球菌，可能是脑膜炎奈瑟菌；链状排列的革兰阳性球菌；长丝状等多形态性的革兰阴性杆菌，可能是流 感嗜血杆菌。(2) 结核分枝杆菌涂片检查(3) 新生隐球菌涂片检查2、分离培养3、报告方式：培养48 小时，仍无菌生长者报告“培养2 天无细菌生长”。查见细菌报告细菌，报告菌名和药敏结果。m呼吸系统标本：(一)痰标

4、本下呼吸道的痰液是无细菌的，而经口腔咳出的痰带有多种上呼吸道的正常寄生菌(如草绿色链球菌)。若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病菌，提示有上呼吸道感染。常见的病原菌主要有肺炎链球菌、 A 群链球菌、金黄色葡萄球菌、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌。1、标本的采集时间2、 标本采集方法： (1) 自然咳痰法 (2) 气管镜下采集法 (3) 气管穿刺法 (4)结核分枝杆菌标本收集法：收集24h 痰液以提高阳性检出率。1）一般细菌涂片（ 2）结核分枝杆菌涂片（ 3）放线菌及诺卡菌涂片4、培养：（ 1）培养标本的选择：应选择粘液痰作涂片。（ 2）痰标

5、本培养前处理：用无菌盐水将痰洗涤3 次，加入等量的1%胰酶溶液（PH7.6）, 37oC水浴90min,使痰液均质化后备用。（ 3）分离培养5、报告方式：痰标本培养24 小时后仅有草绿色链球菌生长而无致病菌生长，报告“正常菌群”。查出的致病菌， 报告菌名和药敏结果， 同时报告细菌的量化指标。（二）咽拭标本正常咽拭有多种上呼吸道的正常菌群（如草绿色链球菌）。若从患者标本中查出致病菌提示上呼吸道有细菌感染（如急、慢性扁桃体炎，咽炎，喉炎等）常见的病原菌主要有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、微球菌和棒状杆菌等）。1、涂片检查（先培养后涂片）。02、分离培养3、报告方式： 同痰标本检查。I

6、V穿刺液标本穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等。正常穿刺液是无菌的，若从患者穿刺液中查见致病菌或条件致病菌提示该部位有细菌感染。胸腔感染的病原菌以结核分枝杆菌多见；腹腔感染的病原菌以肠道细菌如大肠挨希菌、粪肠球菌，以及结核分枝杆菌多见；心包炎和关节腔液以金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌多见。1、涂片检查（先接种后涂片）2、分离培养：（ 1）普通培养（ 2）厌氧培养（ 3）结核菌培养3、报告方式：培养24h 无细菌生长，报告“培养24h 无细菌生长”。查见细菌，报告菌名和药敏结果。V泌尿、生殖道标本（一）尿液标本中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有重要价值。细

7、菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌。3）结核分枝杆菌培养有致病菌或条件致病菌生长， 菌落计数105/ml ， 提示感染 （膀胱炎， 肾盂肾炎、 肾或膀胱结核等）。常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌和伤寒沙门菌等。1、中段尿标本采集法2、涂片检查：（ 1）一般细菌及淋病奈瑟菌（ 2）念珠菌（ 3）结核分枝杆菌3、一般细菌培养：如培养2d 无细菌生长，即可弃去。（ 1）倾注平板法（ 2）平板接种环法（3）标准接种环法：若定量接种环含量为 .001ml ，则整个平板菌落数超过100 个，可报告“菌落数105/ml ”。4、特殊培养：（ 1）淋病奈瑟菌培养（ 2）厌氧菌培养5、

8、报告方式：培养24h 细菌生长，报告“ 24h 无细菌生长”。查见细菌，报告菌名及其菌落计数（菌落数/ml ）和药敏结果。（二）生殖道标本正常的内生殖器是无菌的，而外生殖器（包括男性尿道口和女性阴道）有多种细菌寄生。查见病原菌提示有细菌感染。常见的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃细菌、变形杆菌等。1、涂片检查：革兰染色镜检2、分离培养：（ 1 ）普通培养（ 2 ）淋病奈瑟菌培养（ 3 ）阴道加特纳菌培养（ 4 ）报告方式：如查见淋病奈瑟菌、阴道加特纳菌等病原菌，报告菌名和药敏结果。VI粪便标本正常情况下肠道中有多种细菌。引起感染性腹泻的病原微生物有：（ 1 ）细菌性：产

9、毒素型腹泻、侵袭型腹泻、食物中毒、慢性腹泻；（2）真菌性；（3）病毒性。1、标本采集：（ 1）自然排便采集；（2 ）直肠试子。2、涂片检查：粪便标本因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形态无法分辩是否为病原菌。因此，粪便标本一般不作涂片检查。3、培养：（ 1）沙门 - 志贺菌培养（ 2）致病性大肠埃细菌培养（ 3）霍乱弧菌培养（ 4）副溶血弧菌培养（ 5）小肠结肠炎耶尔森菌培养（ 6）真菌培养（ 7）菌群失调的细菌学检验4、报告方式：vn脓液及创伤感染分泌物标本化脓性感染可由单种或多种细菌引起。菌、变形杆菌和结核分枝杆菌、诺卡菌，以及梭杆菌和拟杆菌等。常见病原菌主要有金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞1、标本采集： （ 1）开放性脓肿和脓性分泌物； （ 2 ）大面积烧伤