植物DNA和RNA提取方法

1、实用标准文案实验一植物基因组DNA勺提取一、实验目的掌握植物总DNA勺抽提方法和根本原理.学习根据不同的植物和实验要求设计和改进植物总DN月由提方法.二、实验原理通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需参加抗氧化剂或强复原剂(如疏基乙醇)以降低这些酶类的活性.在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用.十二烷基肌酸钠(sarkosyl)、十六烷基三甲基澳化镂(hexadyltrimethylammomumbromide,简称为CTAB?十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsul

2、fate,简称SDS售离子型表面活性剂,能溶解细胞膜和核膜蛋白,使核蛋白解聚,从而使DNA导以游离出来.再参加苯酚和氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变T并使抽提液分相,因核酸(DNARNA冰溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大局部蛋白质.上清液中参加无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DN崎于TE溶液中,即得植物总DNA溶液.三、实验材料水稻幼叶四、主要试剂配方2%CTABt提缓冲溶液：CTAB4gNaCl16.364g1MTris-HCl20ml(PH8.0)0.5MEDTA8ml,先用70mlddH2O溶解,再定容至200ml灭菌,冷却后0.2-1%2-疏基乙醇(400ul)氯仿-异戊醇(24

3、：1)：先加96ml氯仿,再加4ml异戊醇,摇匀即可.五、实验步骤1. DNA的提取(1)2%CTABtt提缓冲液在65c水浴中预热.(2)取少量叶片(约1g)置于研钵中,用液氮磨至粉状；(3)参加700ul的2%CTAB由提缓冲液,轻轻搅动；(4)将磨碎液分倒入1.5ml的灭菌离心管中,磨碎液的高度约占管的三分之二；(5)置于65c的水浴槽或恒温箱中,每隔10min轻轻摇动,40min后取出；(6)冷却2min后,参加氯仿-异戊醇(24：1)至满管,剧烈振荡23min,使两者混合均匀；(7)放入离心机中10000rpm离心10min,与此同时,将600l的异丙醇参加另一新的灭菌离心管中；(8

4、)10000rpm离心1min后,移液器轻轻地吸取上清夜,转入含有异丙醇的离心管内,将离心管慢慢上下摇动30sec,使异丙醇与水层充分混合至能见到DN煤状物；(9)10000rpm离心1min后,立即倒掉液体,注意勿将白色DNA沉淀倒出,将离心管倒立于铺开的纸巾上；(10) 60sec后,直立离心管,参加720“的75呃醇及80l5M的醋酸钠,轻轻转动,用手指弹管尖,使沉淀与管底的DNA块状物浮游于液体中；(11)放置30min,使DN破状物的不纯物溶解；(12) 10000rpm离心1min后,倒掉液体,再参加800“75%勺乙醇,将DNA再洗30文档大全实用标准文案min;(13) 100

5、00rpm离心30sec后,立即倒掉液体,将离心管倒立于铺开的纸巾上； 数分钟后,直立离心管,枯燥DNA(自然风干或用风筒吹干)；(14)参加50“0.5XTE(含RNase)缓冲液,使DNAff,置于37c恒温箱约15h,使RNAW解；(15)置于-20C保存、备用.2. DNA质量检测琼脂糖电泳检测,原理和方法见实验二.六、考前须知(1)叶片磨得越细越好.(2)移液器的使用.(3)由于植物细胞中含有大量的DNA,因此,除在抽提液中参加EDTA卬制酶的活性外,第一步的操作应迅速,以免组织解冻,导致细胞裂解,释放出DNA酶,使DNA条解.思考题：1 .本实验中所用到的各试剂的作用是什么？CTA

6、B,氯仿,异丙醇,75%乙醇,EDTA2 .提取基因组DNA勺方法有哪些？各有何优缺点？实验二多聚酶链式反响(polymerasechainreaction,PCR)基因扩增及琼脂糖凝胶电泳检测一、实验目的通过本实验学习PC阪应的根本原理,掌握PCR的根本操作技术以及琼脂糖凝胶电泳技术.二、实验原理PCR用于扩增位于两端序列之间的DNA区段,即通过引物延伸而进行的重复双向DN蛤成.根本原理及过程如下：PCR循环过程中有三种不同的事件发生：(1)模板变性；(2)引物退火；(3)热稳定DNAm合酶进行DN蛤成.1 .变性：加热使模板DNA高温下(94-95C)变性,双链间的氢键断裂而形成两条单链,

7、即变性阶段.2 .退火：在体系温度降至37-65C,模板DNA与引物按碱基配对原那么互补结合,使引物与模板链3端结合,形成局部双链DNA即退火阶段.3 .延伸： 体系反响温度升至中温72C,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板,在引物的引导下,利用反响混合物中的4种脱氧核甘三磷酸(dNTP),按5到3方向复制出互补DNA即引物的延伸阶段.上述3步为一个循环,即高温变性、低温退火、中温延伸3个阶段.从理论上讲,每经过一个循环,样本中的DNA1应该增加一倍,新形成的链又可成为新一轮循环的模板,经过2530个循环后DNA可扩增106109倍.典型的PCR反响体系由如下组分组成：DNA模板、反响缓冲液、

8、dNTPMgCb、两条合成的DNA弓I物、耐热DNATaq聚合酶.琼脂糖凝胶电泳的原理：琼脂糖是一种天然聚合长链状分子,沸水中溶解,45c开始文档大全实用标准文案形成多孔性刚性滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度.DNA分子在碱性环境中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动.DNA子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应.不同DNA其分子量大小及构型不同,电泳时的泳动率就不同,从而分出不同的区带.琼脂糖凝胶电泳法别离DNA主要是利用分子筛效应,迁移速度与分子量的对数值成反比关系.澳化乙锭(EB)为扁平状分子,在紫外照射下发射荧光.复合物,其发射的荧光强度较游离状态EB发射的荧光强度大的含

9、量成正比.用肉眼观察,可检测到5ng以上的DNA三、实验材料及相关试剂基因组DNA基因特异性引物,PCRT增相关试剂,等四、实验步骤(2)将反响混合液混匀,然后每个PCRt中分装24L反响混合液,再加1L模板DNA最后加1滴石蜡油,预防水分蒸发,然后稍离心.(3)将PCRt放到PCR热循环仪中,按以下程序开始循环：94C4min预变性_94C30sec,60C30sec,72C2min_7C7min35个循环(4)考前须知由于PCRM敏度非常高,所以应当采取举措以防反响混合物受痕量DNA的污染.a.所有与PCFW关的试齐J,只作PCR实验用,而不挪作它用.b.操作中所用的PCR管、离心管、吸管

10、头等都只能一次性使用.c.每加一种反响物,应换新的枪头.3 .PCR产物的检测：琼脂糖浓度(1.2%);EB浓度(56/100mlTBE)(1)制胶(以150mL为例)a.称取1.8g琼脂糖,参加150ml的TBE缓冲?夜(pH8.0),摇匀,用电子天平称三角瓶的总重量.b.电炉上加热,至琼脂糖完全溶解；然后在天平上加蒸储水至原重量；c.用凝胶将制胶板两端封好,插入适当的梳子,将溶解的琼脂糖(约50C),倒入EB可与DNA子形成EB-DNA10倍以上,且荧光强度与DNA1.模板DNA勺抽提：实验一所得的水稻基因组2.PCRB作(在冰上操作)：(1)PC或应混合液的配制：反响体系25序加样：反响

11、物ddHaO10 xBuffer25mmol/LMgCl210mmol/LdNTP10M上游引物10M下游引物DNATaq聚合酶DNAL,在无菌的加样顺序体积/科L117.3xn22.5xn40.5xn51Xn61Xn70.2xn0.2mL离心管中按以下操作程终浓度1x1.5mmol/L200mmol/L0.4mol/L0.4mol/L1U31.5xn文档大全实用标准文案其中,直至厚度为46mnt如有气泡要把气泡赶出),在室温下冷却凝固(约3045min);d.将制胶板置于电泳槽中,小心垂直向上拔出梳子,以保证点样孔完好.(2)点样a.将2.0以澳酚蓝参加到PCFT物中,然后稍微离心；b.每孔

12、点样10.0“,蓝色样品混合物将沉入点样孔下部.(3)电泳翻开电源开关,调节电压至35V/cm(约100V),可见到澳酚蓝条带由负极向正极移动,约1小时后即可观察.(4)染色将电泳好的凝胶放入含EB的水溶液中,染色15-20分钟.(5)观察将电泳好的胶置于紫外透射检测仪上,戴上防护观察罩,翻开紫外灯,可见到橙红色核酸条带,根据条带粗细,可粗略估计该样品DNA的浓度.如同时有分子量的标准DNA进行电泳,那么可通过线性DNA带的相对位置初步估计样品的分子量.(6)考前须知a.煮胶时,胶液的量不应超过三角瓶容量的1/3,否那么易溢出.b.煮好的胶应冷却至50c左右时再倒,以免制胶板变形,并减少漏胶的

13、时机.c.倒胶注意厚度(4-6mm),充分凝固后再拔出梳子,以保持齿孔形状完好.也可待胶稍凝固后,放入4c冰箱10多分钟,以加速胶的凝固.d.加样前赶走点样孔中的气泡,点样时吸管头垂直,切勿碰坏凝胶孔壁,以免使带型不整洁.e.一般情况下不必每点一个样品都换枪头,吸电泳缓冲液洗几次即可再点下一个样品.凝胶中含有EB,切勿直接用手接触胶,废弃胶应集中处理,勿乱丢.思考题：1 .PC或应液中主要成分是哪些？在PCR反响过程中各起什么作用？2 .为什么在PC阪应过程中,使用三个不同的温度变化？3 .用PCRT增目的基因,要想得到特异性产物需注意哪些事项？实验三植物总RNA勺提取一、实验目的通过本实验学

14、习从植物组织中提取RNA勺方法二、实验原理RNA是一类极易降解的分子,要得到完整的RNA必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解.高浓度强变性剂异硫鼠酸月瓜,可溶解蛋白质,破坏细胞结构,使核蛋白与核酸别离,失活RNAB,所以RNA从细胞中释放出来时不被降解.细胞裂解后,除了RNA还有DNA蛋白质和细胞碎片,通过酚、氯仿等有机溶剂处理得到纯化、均一的总RNA三、仪器、药品与试剂配方(一)仪器1 .低温离心机文档大全实用标准文案2 .分光光度计3 .琼脂糖胶电泳系统,用前先用1%NaOH液浸?过夜,之后再用DEPCK浸泡冲洗.4 .高压灭菌锅5 .研钵、剪刀、一次性手套等

15、二药品1 .焦碳酸二乙酯DEPC2 .吗咻代丙烷磺酸MOPS3 .异硫鼠酸月瓜4 .醋酸钠NaAc5 .氯仿6 .苯酚7 .甲醛8 .乙醇9 .乙二胺四乙酸EDTA10 .琼脂糖11 .异丙醇三试剂配方1. .0.1%DEPC水0.1mlDEPC参加100ml三蒸水中,振摇过夜,再湿热灭菌.2. 2mol/LNaAc、0.5mol/LEDTA、4mol/L异硫鼠酸月瓜、4mol/LLiCl等均用DEPC水配制.3. 5XMOPS电泳缓冲液pH7.0MOPS0.1mol/LNaAc40mmol/LEDTA5mmol/L四、实验步骤一总RNA的提取方案一1 .实验前10天左右播种水稻种子,在3-4

16、叶期,剪取1.2g幼叶.放入研钵,在液氮中研磨成粉末状,移入10mL离心管.参加4mol/L异硫鼠酸月瓜4mL苯酚3mL2mol/LNaAcpH4.80.3mL氯仿0.6mL混匀,冰浴放置30min.2. 4,8000r/min,离心13min.3.弃沉淀,取上清至另一干净无菌离心管中.4.参加2倍体积无水乙醇,-70C,0.5h.5. 4,8000r/min,离心13min.6.弃上清,在沉淀中参加1mL4mol/LLiCl,使其溶解.7.移入1.5mL离心管中,冰浴2h.8. 4C,13000r/min,离心15min.9.弃上清,在沉淀中参加400uLDEPC水,再参加400uL氯仿,混

17、匀.文档大全实用标准文案10. 4C,13000r/min,离心6min.11.取上清,并参加1/10体积3mol/LNaAcpH5.0,2倍体积无水乙醇,-20C放置30min.12. 4,13000r/min,离心20min.13.将沉淀RNA用70驻醇洗涤2次.14.将沉淀RNA室温下稍枯燥.15.力口30uLDEPC水溶解,-70C保存.二总RNA的提取方案二利用TRIzol提取液抽提RNA具体步骤如下：1 .取幼叶约250mg在液氮中研磨至细粉,转入预冷的1.5ml离心管；2 .参加1mlTRIZOL提取液震荡摇匀；3 .室温放置5min后,参加0.5ml的氯仿,剧烈摇动离心管5mi

18、n;4 .在8c条件下,12000rpm离心15min;5 .溶液分为两层,下层为酚一氯仿浅红色液层,将上层液体移入干净离心管,加入0.5ml异丙醇在1530c条件下,沉淀10min;6 .然后在,28C条件下,12000rpm离心10min,RNA淀管壁和底部；7 .去掉液体局部,参加1ml75%酒精洗2次；8 .风干后,参加25lDEPC处理过的水溶解RNA储藏于-80C冰箱备用.三甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分析总RNA1.配制1.2%变性琼脂糖凝胶40mL称取0.48g,参加DEPCK25.2mL,5X电泳缓冲液4mL,加热使溶解,稍冷却参加甲醛3.4mL,混匀,室温凝固0.5-1h.2.R

19、NA电泳检测样品制备RNA2科l甲醛2.5“甲酰胺7.5“10XMOPS2履RNALoadingBuffer2科l灭菌的DEPC水4履混合液轻轻混匀并离心,放于65c下温育5min后,置于冰上.3.电泳检测将1.2%变性琼脂糖凝胶放入水平电泳槽中,加1XMOPS1泳缓冲液,覆盖凝胶约1mm将RNA样品加到凝胶点样孔中,在5V/cm条件下电泳30min,然后在EB中染色15-20min,在紫外灯下观察提取的RNA的质量.五、考前须知1 .在研磨过程中,利用液氮时刻使组织保持冰冻状态.2 .RNA酶是一类生物活性非常稳定白酶类,除了细胞内源RNA酶外,外界环境中均存在RNAH,所以操作时应戴手套,

20、并注意时刻换新手套.思考题:文档大全实用标准文案1.实验中所用到的各试剂的作用是什么？焦碳酸二乙酯(DEPC),吗咻代丙烷磺酸(MOPS),异硫鼠酸月瓜,醋酸钠(NaAc),氯仿,苯酚,甲醛,乙醇,乙二胺四乙酸(EDTA),异丙醇动植物组织mRNAI取实验方法一、材料水稻叶片或小鼠肝组织.二、设备研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空枯燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽.三、试剂1、无RNA灭菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶(180C2小时)装蒸储水,然后参加0.01%的DEPC(体积/体积),处理过夜后高压灭菌.2、75充醇：用DEPC处理水配制75%醇,(用高温灭菌器皿配制),然后装入高温烘

21、烤的玻璃瓶中,存放于低温冰箱.3、1X层析柱加样缓冲液；20mmol/LTrisCl(pH7.6),0.5mol/LNaCl,1mmol/LEDTA(pH8.0),0.1%SDSo4、洗脱缓冲液：10mmol/LTrisCl(pH7.6),1mmol/LEDTA(pH8.0),0.05%SDS.四、操作步骤(一)动植物总RNA取-Trizol法Trizol法适用于人类、 动物、 植物、 微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染.RNAM直接用于Northern斑点分析,斑点杂交,Poly(A)+别离,体外译,RNase封阻分析和分子克隆

22、.1、将组织在液N中磨成粉末后,再以50-100mg组织参加1mlTrizol液研磨,注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%2、研磨液室温放置5分钟,然后以每1mlTrizol液参加0.2ml的比例参加氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒.3、取上层水相于一新的离心管,按每mlTrizol液加0.5ml异丙醇的比例参加异丙醇,室温放置10分钟,12000g离心10分钟.4、弃去上清液,按每mlTrizol液参加至少1ml的比例参加75%S醇,涡旋混匀,4C下7500g离心5分钟.5、小心弃去上清液,然后室温或真空枯燥5-10分钟,注意不要枯燥过分,否那么会降低RNA的溶解度.

23、然后将RNA溶于水中,必要时可55C-60c水溶10分钟.RNA可进行mRNA别离,或贮存于70成醇并彳存于-70C.注意1、整个操作要带口罩及一次性手套,并尽可能在低温下操作.2、加氯仿前的匀浆液可在-70C保存一个月以上,RNA沉淀在70成醇中可在4c保存一周,-20C保存一年.(二)mRN墟取由于mRN袜端含有多poly(A)+,当总RNA流彳至oligo(dT)纤维素时,在高盐缓冲液作用下,mRN徽特异的吸附在oligo(dT)纤维素柱上,在低盐浓度或蒸储水中,mRNAT被洗下,经过两次oligo(dT)纤维素柱,可得到较纯的mRNA1、用0.1mol/LNaOH悬浮0.5-1.0go

24、ligo(dT)纤维素.2、将悬浮液装入灭菌的一次性层析柱中或装入填有经DEPCb理并经高压灭菌的玻璃棉文档大全实用标准文案的巴斯德吸管中,柱床体积为0.5-1.0ml,用3倍柱床体积的灭菌水冲洗柱床.3、用1x柱层析加样缓冲液冲洗柱床,直到流出液的pH值小于8.0.4、 将(一)中提取的RNA液于65c温育5分钟后迅速冷却至室温,参加等体积2x柱层析缓冲液,上样,立即用灭菌试管收集洗出液,当所有RNA溶液进入柱床后,参加1倍柱床体积的1x层析柱加样溶液.5、测定每一管的OD260当洗出液中OD为0时,参加2-3倍柱床体积的灭菌洗脱缓冲液,以1/3至1/2柱床体积分管收集洗脱液.6、测定OD2

25、60合并含有RNA的洗脱组分.7、参加1/10体积的3MNaAc(pH5.2),2.5倍体积的冰冷乙醇,混匀,-20C30分钟.8、4c下12000g离心15分钟,小心弃去上清液,用70呃醇洗涤沉淀,4c下12000g离心5分钟.9、小心弃去上清液,沉淀空气枯燥10分钟,或真空枯燥10分钟.10、用少量水溶解RNA液,即可用于cDNA合成(或保存在70充醇中并贮存于-70C).注意1、mRN肝70醇中-70C可保存一年以上.2、oligo(dT)纤维素柱用后可用0.3mol/lNaOH洗净,然后用层析柱加样缓冲液平衡,并参加0.02%叠氮钠(NaN3淋箱保存,重复使用.每次用前需用NaOHK层

26、析柱加样缓冲液依次淋洗柱床.RNAI取流程RNA(totalRNA)和信使RNA(mRNA)抽提RNA勺提取RNAffi无RNA1的环境原核生物能产生功能上截然不同的三种RNA,信使RNA(mRNA孩糖体RNA(rRNA),转运RNA(tRNA)而真核生物那么能产生四种,还有一种为真核生物所持有的小RNA.mRNA由基因转录而来的,它运送编码蛋白所需的信息.由于mRNAi表了基因表达的水平,因此mRNA勺别离,定量和检测极为重要.应用RNA寸细胞和分子生物学的各个方面进行研究非常普遍.RNA存在于从简单的逆转录病毒到哺乳动物细胞的所有的生命形式之中.由于当前没有一种方法能够直接扩增RNA,因此

27、,RNA的别离通常是决定实验结果质量的第一步,也是关键的一步.提取RNA过程中预防RNA1的污染所采取的步骤RN的离的实用方法既有简单直接的方法(如别离rRNA?口tRNA),也有困难和涉及复杂步骤的方法(如别离mRNA)在无细胞体系中克隆基因的体外转录非常有用,它可以产生足量的同源RN吩子用作探针或模板以识别和测定表达基因的量,或用于RNA勺生化研究,处理RNA羊品时必需仔细小心,其程度取决于样品的用途和来源.由于RNA#存在于所有的生物中并且能够才6抗诸如煮沸这样的物理破坏,固此建立一个无RNAB的环境对于制备优质RNA艮重要.对于制备mRNAe说这些预防举措尤其重要.方:K:工作区域应与

28、进行普通微生物实验的区域别离好,特别是那些用于细菌接种,培养基和试剂配制的区域,那些培养基和试剂用于从细菌和动物细胞中进行DNA勺文档大全实用标准文案制备和操作.通常认为这些区域富含RN服.如有可能,使用标有无RN丽的商品试管,吸头,溶液和水.通常新的无菌处理过的塑料试管和吸管无RN丽,3双蒸水ddH2O刖溶液应该用RNAB的抑制剂DEPC焦碳酸二乙酯 进行处理：每100mL溶液或水中参加0.1mLDEPC原液,放在摇床上充分混匀并在37c下作用数小时.然后将溶液高压灭菌15min使DEPOfe活.4用分子级的试剂和DEPCt理过的水配制的溶液通常没有RN服.5别离RNAZ前,将一些实验室玻璃

29、制品置于烤箱在300C烘烤4h以灭活核酶.如有可能,将其他设备也灭菌处理.从组织中提取RNAM要注意：动物器官的解剖器械存放组织块的玻璃器皿冻存组织块所用的器皿组织器官的冲洗液人汗含有RN服,故在所有步骤中均应戴手套并经常更换.记住我们的周围环境含有大量的微生物和气雾,它们来自吸液操作或来自我们自己的呼吸.这些可能造成RNA9B的污染一些组织像脾脏可能比其它组织含有更多的RN丽.细菌比哺乳动物细胞中有更多的RNAS.因此从这些细胞中制备RNAK采取更严格的预防举措.别离后的RNA!过琼脂糖凝胶电泳再经澳化乙锭染色后便可检查其是否完整.rRNA18s和28s条带模糊可能说明由RN服弓I起的RNA

30、勺降解.一步法别离RNA应用从组织或细胞中别离细胞的总RNA从液体样品中别离RNATRIREAGENTTripure是一种用于RNA别离的商品溶液.该法源于chomc-zynski的RNA离一步法.它更便于使用并且结果更加可靠.对于来源有限的样品,我们推荐使用这种试剂.这种试剂能从同一样品中同时别离RNA,DNA蛋白质.万案.用lmLTripure/50-100mg组织匀浆组织样品.对于细胞,每10cm2面积贴壁的单层细胞或每106个细胞细胞沉淀使用1mL.将样品转至1.5mLEP管中.-70C可保存1月室温下放置样品5min.每1mLTripure中参加0.2mL氯仿并摇动15s,置于室温下

31、215min.4c下12000g离心15min.将水相上部转至一个新EP管.每1mLTripure参加0.5mL异丙醇沉淀RNA将样品置于室温下510min.4C,12000g离心10min.凝胶样沉淀物为RNA.吸出上清并用1mL75%醇在涡旋振荡器上洗涤RNAK淀一次,4C,7500g离心5min.晾干RNAM淀.然后用无RNAB白水,甲酰胺或0.5X的SDS溶液溶解沉淀.RNA勺检测：文档大全实用标准文案将样品稀释液于三处波长处读取0加.记录ODfi,通过计算确定RN隧度或纯度.公式如下对于ssDNA:ssDNA=33X(OD260OD310)X稀释倍数对于dsDNA:dsDNA=50X

32、(OD260-0D310)X稀释倍数对于ssRNA:ssRNA=40X(OD260OD310)X稀释倍数以上浓度单位为ug/mL.考前须知1)OD310仅是背景,假设盐浓度较高,OD310值也高.2)OD260/OD280XtDNAW言其值大约为1.8,高于1.8有RNA亏染.低于1.8那么有蛋白质污染.3)OD260/OD2801X寸RNAW言其值大约为2.0.小结所有可能与RNAg触的器材均得用DEPCt理.操作过程中应带口罩,手套.DEPOT致癌之可能,尽量预防接触皮肤提取的RNAK尽早逆转录成cDNA.逆转录聚合酶链式反响(RT-PCR)RT-PCR向接用来扩增从RN砌子今得到的一段特异序列.RNA首先被逆转录为cDNA.用位于一段特异序列或者一个基因两侧的引物生成以cDNM摸板的PCR产物成为一个标准的PCRS应.得到阳性产物说明存在着特异的RNAff列.对于一个成功的PCR5应来说,寡