营养盐的测定—无机氮的测定

1、实验四营养盐的测定 一无机氮的测定一、目的要求1 .通过实验了解靛酚蓝分光光度法测定海水中氨 -氮的方法原理，掌握其实 验条件及步骤。2 .了解亚硝酸盐氮的测定一蔡乙二胺分光光度法的原理；硝酸盐氮的测定 一 锌镉还原蔡乙二胺分光光度法的原理二、原理水中的无机氮分为硝酸盐氮、亚硝酸盐氮和氨氮，简称三氮。此外氨氮又分 为非离子氮（NHs）和离子氮（NH+4）,此两种状态的组成比决定于水的 PH值。 三氮的测定方法如下：3 .氨氮的测定一靛酚蓝分光光度法在弱碱性介质中，以亚硝酰铁氟化钠为催化剂，氨与苯酚及次氯酸盐反应生 成靛酚蓝，在640nm测定吸光度，用标准曲线法测定。4 .亚硝酸盐氮的测定一蔡乙

2、二胺分光光度法在酸性介质中，亚硝酸盐与磺胺进行重氮化反应，其产物再与盐酸蔡乙二胺 生成红色偶氮染料，在543nm出测定吸光值，用标准曲线法测定。5 .硝酸盐氮的测定一锌镉还原蔡乙二胺分光光度法先将水中的硝酸盐氮用锌粉和二氯化镉定量地还原为亚硝酸盐，然后按亚硝酸盐的测定方法，进行测定，扣除原有亚硝酸盐，得硝酸盐的含量。三、仪器722型分光光度计移液管：1mL; 5mL; 10mL漏斗具塞比色管：50mL （带刻度）具塞比色管：25mL （带刻度）四、试剂1. 100g-N钱标准贮备溶液：称取0.4716g硫酸钱（NH4）2SQ（110C烘1小时， 置于干燥器中冷却），溶于少量水中，全量转入100

3、0mL容量瓶中，加水至标线， 混匀，加1mL三氯甲烷（CHC3）,振摇混合，贮于棕色试剂瓶中，冰箱内保存。 此溶液浓度为1.00mL含氨氮100g具有效期半年。10.0g-N钱标准使用溶液：移取钱标准贮备溶液 10.0mL置于100mL容量瓶 中，加水稀释至标线，摇匀，即得钱标准贮备溶液。临用时配制。2. 480g/L柠檬酸钠溶液：称取240g柠檬酸钠（Na3c6H507 2H2。）溶于500mL 水中，加入20mL 0.5mol/L氢氧化钠和数粒防爆沸石，煮沸除氨直至溶液体积小 于500mL,冷却后用水稀释至500mL,盛于聚乙烯瓶中，此溶液长期稳定。3. .苯酚溶液：取38g苯酚（C6H5

4、0H）和0.4g亚硝酰铁氟化钠 Na2Fe（CN5NO-2H2O,溶于少量水中，稀释至 1000mL,混匀，盛于棕色试剂瓶 中，冰箱内保存。4. 0.5mol/L硫酸溶液：移取28mL硫酸（比重1.84,缓慢倾入水中，稀释 至1L,混匀。5. 0.5mol/L氢氧化钠溶液：称取10g氢氧化钠溶于1000mL水中，力口热蒸 发至500mL,盛于聚乙烯瓶中。6. 0.10mol/L硫代硫酸钠溶液：称取 25g硫代硫酸钠（Na2&03 5H2。），溶于 少量水中，稀释至1L,加1g碳酸钠（NmCQ）,混匀，转入棕色试剂瓶中保存。7. 5g/L淀粉溶液：5g/L淀粉指示剂：称取1g可溶性淀粉，

5、用少量水搅成 糊状，加入100mL煮沸的水，混匀，继续煮至透明，冷却后加入 1mL冰醋酸， 稀释至200mL,盛于试剂瓶中。8. 次氯酸钠溶液：市售有效氯含量不少于 5.2%的次氯酸钠溶液，使用时先 标定。标定方法：取50mL 0.5mol/L硫酸溶液至100mL锥形瓶中，加入0.5g碘化钾， 混匀，加入1 mL待标定的次氯酸钠溶液，以0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液滴定至 淡黄色，加入5滴淀粉溶液，继续滴定至蓝色消失，计下硫代硫酸钠的体积， 1.00mL相当于3.54mg有效氯。9. 1.50mg/mL次氯酸钠使用溶液：用0.5mol/L的氢氧化钠溶液稀释一定量 的已标定的次氯酸钠溶液，使其

6、100mL中含有150mg有效氯，盛于聚乙烯瓶中 保存于冰箱中，可稳定数周。10. 亚硝酸盐氮标准溶液：称取 0.4926g亚硝酸钠（NaNQ）（经110c烘干 1小时），溶于少量水中，转入1000mL容量瓶中至标线，摇匀，力口 1mL三氯甲烷（CHC3）混匀，贮于棕色瓶中保存于冰箱。此溶液浓度为100g/mLN,取上述溶液5mL于100mL容量瓶中，加水至标线，混匀，配成亚硝酸盐氮标准使用 液，浓度为5.0 g/m-No临用时配制。11. 10g/L磺胺溶液：称取 5g磺胺（NH2SQC6H4NH2）,溶于350mL盐酸溶 液（1+6）,用水稀释至500mL,盛于棕色瓶中。12. . 1g/

7、L盐酸蔡乙二胺溶液：称取0.5g盐酸蔡乙二胺 （G0H7NHCHCH2NH22HCD溶于500mL水中，盛于棕色试剂瓶中保存于冰箱。13. 硝酸盐氮标准溶液：称取 0.7218g硝酸钾（KNQ）（经110c烘干12 小时），溶于少量水中。转入1000mL容量瓶中至标线，摇匀，力口 1mL三氯甲烷（CHC3）混匀，贮于棕色瓶中保存于冰箱。此溶液浓度为100g/mL取上述溶液10mL于100mL容量瓶中，加水至标线，混匀，配成硝酸盐氮标准使用液，浓 度为10仙g/mL临用时配制。14. 20%氯化镉溶7取:称取20g氯化镉（CdC2 2.5H2O）加水至100mL,待溶 解后分装于滴瓶中。15.

8、锌粉。五、步骤1 .绘制标准曲线：取0.00、0.30、0.45、0.60、0.75、1.00mL钱标准使用液于6支50mL具塞比色管中，加水至标线，混匀。系列各点的浓度分别为：0、0.060、0.090、0.12、0.15、0.20g-N。在上述比色管中各加入1.5mL柠檬酸钠溶液，混匀，再加入1.5mL苯酚溶 液，混匀，最后加入1.5mL次氯酸钠溶液，混匀，放置6小时以上（淡水样品3 小时以上）。将样品和参比比色池都注满蒸储水，用722分光光度计在640nm波长处， 进行相互测量，所测定比色池的吸光度值 Ac,应从读数中减去。以水为参比溶剂，用722分光光度计在640nm波长处，测定吸光度值Ai。 其中O浓度为Ado以（Ai-A0）为纵坐标，氨一氮浓度（g）为横坐标，绘制标准 曲线。2 .水样测定（双样）取移过滤澄清的待测水样于50mL具塞比色管中，以下按、步骤测定水 样的吸光度值Aw。同时取50mL无氨蒸储水，置于50mL具塞比色管中，按水样 测定步骤测定空白吸光度值 Abo查标准曲线或用线性回归方程计算水样中的钱 氮浓度(g)。五、计算1.测定海水样品，若绘制标准曲线用盐度相近的无氨