血清总胆汁酸TBA测定

1、血清总胆汁酸TBA测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果 的准确。2 实验原理胆汁酸被3 a -羟雷醇脱氢酶（3 a -HSD）以及B -硫代烟 酰尿喀陡二核昔酸氧化型（Thio-NAD）特异性氧化，生成3- 酮类固醇以及B -硫代烟酰尿喀陡二核昔酸还原型（Thio-NADH）o止匕外，生成的 3-酮类固醇在3a-羟雷醇脱 氢酶及还原型烟酰胺腺喋吟二核昔酸（NADH存在下，生成胆汁酸及氧化型烟酰胺腺喋吟二核昔酸（NAD。在上述循环酶反应过程中，还原型B-硫代烟酰尿喀陡二核昔酸（Thio-NADH）的生成量与样本中被放大的微量胆汁酸浓度成正比。通过在405nm处测定固定时

2、间内吸光度的变化值， 即可测得样本中总胆汁酸的浓度。3标本:3.1 病人准备：标本以空腹血清为宜，餐后胆汁酸会升高, 应注意采血时间。3.2 类型：血清、肝素或EDT颂理的血浆。应使用新鲜标本。标本需避光保存。3.3 标本存放 4c保存可稳定 7天，-20 C保存可稳定 3个月。3.4 标本运输常温条件下避光保存运输。3.5 标本拒收标准细菌污染的标本。4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司TBA试剂盒（沪食药监械（准）字 2014 第 2400166 号 YZB/ 沪 1546-40-2014 ）4.1.1 试剂组成试 齐【J1 B -硫代烟酰尿喀陡二Good, s缓冲液(R

3、1)核昔酸（氧化型）952.9mg/L试剂 2 B -还原型辅酶I 3a-羟雷醇脱氢酶12500U/L(R2)6.1g/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存： 在28c避光、密封的储存条件下，试剂(盒)自生产之日起有效期为 12个月。 试剂启用后，在210c避光的条件下可稳定 30天。4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.1.5 注意事项：不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的TBA校准品对自动分析仪进行校准。4

4、.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。5仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝 TBA-120生化分析仪6操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位 置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积 等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数： 参见生化检验 AU2700生化分析仪，罗 氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝 TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4 仪器操作步骤：参见生化检验 AU2700生化分析仪，罗氏 P800生化分析仪，西门子 ADVIA-2

5、400生化分析仪，东芝 TBA-120生化分析仪操作规程。7质量控制在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以 2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控8计算方法以TBA复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以以 mol/L报告。9参考值范围成年人：10以mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。我室的参考范围:0-10以mol/L10 临床意义当患有肝脏疾病和胆酸吸收受阻时，进入血中的胆酸增加。在急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝癌疾病时，总胆汁 酸都

6、有不同程度的升高。另外，总胆汁酸升高还见于胆汁淤 积、胆管阻塞、胆囊炎等慢性疾病。11操作性能11.1 试剂空白吸光度： 0.60A o11.2 线性范围：200以mol/L ±10%,线性相关系数（r） n0.990 o11.3 准确度：用相对偏差（RE%表示测定结果的不准确度，相对偏差（RE% < ±10%11.4 精密度：（1）批内精密度：变异系数（CV% < 5% （2） 批间精密度：相对极差（ 衿w 10%12超由范围结果处理本法的检测范围为1200以mol/L o当样品测定值超过上 限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1:4稀释，重新测定， 结果乘以5。13 病危报警值的处理无警告/危急值14方法局限性14.1 测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器