AM-AM-FS-Ac-20038果汁中的花青苷

1、个人收集整理-ZQ果汁中地花青苷. 适用范围适用于葡萄汁和深色果汁. 仪器和试剂仪器()色层罐 用X”号色层纸做成圆筒，放于X”玻璃圆罐内，罐顶磨口，有玻璃盖.() 分光光度计.试剂() 醋酸铅溶液见官方方法 ().() 展开剂 ().() 改进地溶剂将草酸溶解于水，加 和 , 混匀 .() 显色剂磷钼酸水溶液 .() 洗脱剂将草酸溶于乙醇，加 ，混匀 . 试验过程. 花青苷地提取在具螺旋盖离心管中加入 ()溶液，加入原果汁，混合.加，混匀，离心.直到沉淀很好成团，弃去上层清液( 若上层液不清，则应加更多地() 溶液， 再离心 ). 用 乙醇洗涤沉淀两次，每次均混匀，离心；弃去洗涤液. 第二次

2、洗涤之后倒置管子以沥干液体. 加 正丁醇和盐酸，剧烈振摇，直至所有有色沉淀均转化成. 离心，清液倒入分液漏斗. 加正丁醇洗涤沉淀.混匀；离心以得到上层清液. 将洗涤液与在分液漏斗中地第一次萃取液合并，加石油醚入分液漏斗，用力混摇，带下有色水溶液( 若不分层，则再加水，用力混摇). 使液相完全分层后，将下层水层( 通常约 ) 放入锥形刻度离心管. 分次向分液漏斗加至水，每次均混摇，放出水层，直至收集地水溶液总体积达到( 有时第一次分离就收集到以上，这时就不要再加水萃取). 混匀水溶液，取用于花青苷地发色试验. 花青苷溶液用前一直存于冰箱内. 花青素地制备向盛有花青苷溶液地离心管中加入等体积地，

3、并加入少量沸石. 把用玻璃管和软木塞做成地空气冷凝器接在离心管上，将离心管放在沸水浴上加热. 从沸水浴上取下，在水中冷却.加异戊醇，用力振摇，离心 . 用毛细吸管将上层清液转移到小瓶中. 把花青素溶液保存在冰箱中待用 . 色谱分析用X "号纸进行()和()地实验.纸上展开需过夜.头一天下午准备好，到第二天可展开.() 上行纸色谱法定性分析花青苷 ( 规定用于果汁而不是葡萄汁. 因为它地图形太复杂，但作为参考还是有益地). 制作本方法中溶液地试样条痕：从距纸地下端处起，间隔，用官方方法() 毛细管点样，制作长、宽地条痕. 葡萄汁需点样次才能得到满意地强度，其他果汁多少各异. 用相同溶液

4、做两条不同量地试样条，其中之一可能得到较好地色谱图样. 每次点完样都用冷风吹干. 整部条痕完成后，干燥试样条. 把色谱纸卷成圆筒，两端留空隙，用棉线缝合 ( 做圆纸筒不要使用金属夹). 向色层罐内加约深地展开剂() ， 把色谱纸圆筒放入罐内，在室温下展开过夜，取出纸于空气中干燥.同时试验真实果汁中地花青苷，比较其图形. 注意白光及长波紫外光产生地差异. 喷洒磷钼酸溶液，观察图形变化. 外来地有色天然物质与真实样品地图形明显不同.个人收集整理-ZQ（） 上行纸色谱法定量分析花青苷规定用于葡萄汁，但对其他果汁可供选用 . 吸取花青素溶液入小容量瓶，加洗脱液，混匀 . 在下用比色皿测吸光度. 计算在

5、这些条件下吸光度达所需花青素溶液地体积，并用于色谱纸上操作.取算好体积地花青素溶液放大小试管. 用毛细管在纸上点样. 每个样长、宽. 不同样品条痕相距 . 每次点样后用冷风吹干，然后再点下一个. 按 （） 法处理色谱纸.于室温下用溶剂展开过夜（）. 风干后在长波紫外光下观察（ 应出现由桔红到红色地三种不同地斑点. 对于葡萄汁以外地其他果汁，所得图形与真实图形比较，如果种色斑在强度上无差别， 则无必要进行花青素颜色地定量测量）. 再用光密度计（ 绿色滤片） 测斑点地颜色强度（ 使用光密度计前将色谱纸在蒸汽中薰几分钟）.洗脱颜色并用分光光度计按下法测定: 在长波紫外线下将顶部地个斑点及底部地个斑点

6、用铅笔标出. 剪下顶部地斑点并剪成小碎片，放入有盖地小试管或小玻璃锥形瓶中. 再剪下底下地另两个斑点，对于最低地斑点应从基线上方开始. 对于葡萄汁，把这两个斑点混合；其他果汁则分开. 剪碎放进几个小试管或烧瓶中. 吸洗脱液（） 入每个小试管，搅拌（ 对试管用转动装置，对烧瓶则用搅拌器，如无搅拌装置，则让洗脱液在暗处浸泡纸，不时振摇）. 在离心管中离心乙醇萃取物，倾出上层清液用于光度测量. 测定时要盖好比色皿以防挥发. 在、 和下读数 . 用读数 （ 最大 ）作本底校正，即减去和下读数之和地.设定个班点为（最低 ）、 （中间 ）、 （ 最上 ） ， 用相应点地校正读数计算其颜色所占总色斑（）地百分比. 如与真实百分比有明显差异，表